普乐可复替换环孢素A减缓早期CAN肾功能减退

目的了解用普乐可复(FK506)替代环孢素A(CsA)能否减缓早期慢性移植肾肾病(CAN)患者肾功能衰竭的速度,及其机制。方法1999年1月~2003年4月期间,对病理诊断为慢性移植肾肾病(I级)肾功不全、且正在服用CsA的124例肾移植患者随机分为A、B两组。A组(68例):将CsA改为FK506,替换剂量比例约为75∶1,其他免疫抑制剂不变;B组(56例):环孢素A和其他免疫抑制剂均不作调整。对上述患者进行至少3年的随访,比较两组肾功能、3年随访期内肌酐清除率(Ccr)减损量、急性排斥反应发生率、血浆转移生长因子β1(TGF-β1)浓度等。结果3年后A组有42例(61.8%)患者移植肾功能稳定或好转,而B组除6例(10.7%)肾功能稳定外,其他患者肾功能均进行性减退;3年随访期内A、B两组Ccr分别减少了(10.1±9.9)ml/min和(22.3±16.7)ml/min;3年后A、B两组血浆TGF-β1浓度分别为(16.7±8.7)ng/ml和(39.7±10.8)ng/ml。上述结果比较,两组差异有统计学意义(P<0.01)。3年随访期内,两组急性排斥反应发生率分别为11.8%和10.7%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论以FK506替代CsA可延缓慢性移植肾肾病患者肾功能衰竭的速度,其机制可能与降低体内TGF-β1分泌有关。     

肾移植术后卡氏肺孢子虫肺炎的诊治及预防

目的 探讨肾移植术后发生卡氏肺孢子虫肺炎的诊断、治疗及预防.方法 综合分析我院2002～2004年13例肾移植术后发生卡氏肺孢子虫肺炎患者的临床资料,提出治疗方案以及预防措施.结果 本组患者发病时间在肾移植术后88～142d,平均106d.病程为12～30d,平均22d.本病的临床特点为临床症状重、肺部体征轻,胸片及胸部CT有特异性表现,纤支镜肺泡灌洗可以确诊.经调整免疫抑制药物剂量,给予口服复方新诺明,吸氧、支持治疗,13例患者均康复出院.结论 卡氏肺孢子虫肺炎是一种严重威胁肾移植术后患者生命安全的肺部感染性疾病,常见于过度免疫抑制患者,如不及时治疗可发生急性呼吸窘迫综合征,威胁患者生命.采用复方新诺明治疗本病疗效可靠.     

HLA衍生肽RDP1258对大鼠淋巴细胞增殖活性的影响

目的探讨合成HLA衍生肽RDP1258对T细胞活化、增殖活性的影响。方法采用Fmoc固相化学合成法人工合成RDP1258，MTT法分别进行大鼠淋巴细胞增殖试验、大鼠单向混合淋巴细胞反应（MLR）及人外周血淋巴细胞毒试验。结果合成RDP1258纯度达95％以上，相对分子质量与理论值相符；RDP1258显著抑制刀豆蛋白A（ConA）刺激的淋巴细胞增殖；RDP1258能抑制单向MLR反应体系中应答细胞对刺激细胞的反应能力。结论RDP1258体外能抑制由丝裂原或同种异体抗原引起的大鼠淋巴细胞增殖反应。     

尿毒症患者活动性巨细胞病毒感染的发生状况及其对肾移植的影响

目的 :了解肾移植患者术前活动性巨细胞病毒 (CMV)感染的发生状况及其对术后的影响。方法 :自2 0 0 2年 6月至 2 0 0 3年 12月 ,检测 196例肾移植患者术前外周血CMV pp65抗原血症 ;肾移植后则每 2～ 4周检测 1次 ,共为期 6个月 ;分析术前CMV pp65抗原血症状况对术后患者CMV pp65抗原血症强度和CMV病发生率的影响 ;另于同期内检测 2 9例健康成人CMV pp65抗原血症作对照。结果 :2 9例健康成人CMV pp65抗原血症均为 (-) ;肾移植前有 11 2 % (2 2 / 196)的尿毒症患者CMV pp65抗原血症为 (+ ) ;这类患者肾移植后发生高活动性CMV感染 (即CMV pp65抗原血症指数 >10 0 )和CMV病的发生率均明显高于移植前CMV pp65抗原血症为 (-)的患者 ;肾移植后6个月内有 87 8% (172 / 196)的肾移植受者CMV pp65抗原血症为 (+ )。结论 :肾移植前活动性CMV感染为11 2 % ;肾移植后 6个月内活动性CMV感染高达 87 8% ;术前活动性CMV感染是导致肾移植后发生高活动性CMV感染和CMV病的重要原因。     

肾移植早期巨细胞病毒感染对移植肾远期预后的影响

目的:探讨肾移植受者术后早期巨细胞病毒(CMV)感染与远期肾功能的关系. 方法:自1999年8月～2001年6月,根据肾移植术后6个月内CMV-pp65抗原血症指数(I)和持续时间,将96例随访达3年的肾移植受者分为CMV非感染组(I=0)、低感染组(I= 1～30)、短期高感染组(I >100,≤2周)和长期高感染组(I >100,≥8周),比较四组在肾移植6个月时肾功能、移植肾活检组织中转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白和mRNA表达;随访3年期内肌酐清除率(Ccr)减损量、肾功不全发生率,并对出现肾功不全者在血肌酐(SCr)升高1个月内进行移植肾穿剌活检,以明确病因. 结果:在肾移植6个月时,四组肾功能无明显差异(P > 0.05),但"长期高感染组"肾组织中TGF-β1蛋白和mRNA表达量明显大于其他3组;在肾移植3年时,"长期高感染组" Ccr下降了(16.2±7.2)ml/min,43.5%(10/23)患者出现肾功能不全,二者均明显大于其他3组(P < 0.01,P <0.05).肾功不全者,移植肾活检均证实为慢性移植肾肾病. 结论:肾移植术后早期长时间严重的CMV感染是影响移植肾远期肾功能、导致慢性移植肾肾病的重要原因.     

供体抗原特异性的CD4+CD25+Treg对心脏移植小鼠体内B细胞功能的影响

目的 观察供体抗原特异性的CD4+CD25+Treg对同种异系心脏移植小鼠受体B细胞功能的影响.方法 以Balb/c小鼠为供体、C57bl/6小鼠为受体建立小鼠心脏移植模型,于术前1 d、术后2周分别将供体抗原特异性的CD4+CD25+Treg (1×106)于尾静脉注入受体体内,术后1个月抽取小鼠外周血,分离B细胞,检测其在抗IgM抗体刺激下的增殖情况,检测小鼠外周血IgG、IgA水平,以判断应用CD4+CD25+Treg后小鼠体内B细胞功能状态.实验组:术前、术后2周使用CD4+CD25+Treg(n＝8);阳性对照组:术前、术后未使用CD4+CD25+Treg(n＝8);空白对照组:未移植小鼠(n＝8).结果 实验证实,实验组B细胞增殖水平最低,空白对照组其次,阳性对照组最高,3组差异均有统计学意义(P<0.05).外周血IgG、IgA水平检测证实,实验组与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),二者明显低于阳性对照组(P<0.01).结论 经尾静脉注入CD4+CD25+Treg后心脏移植受体体内B细胞的功能可明显受到抑制,CD4+CD25+Treg可通过对B细胞的这一作用调节受体免疫状态,从而达到控制排斥反应,诱导免疫耐受的作用.     

改良的大鼠原位肾移植模型的建立

目的建立一种术式简单、初学者易于掌握、成功率高的大鼠肾脏移植模型.方法采用原位肾脏移植术式,动脉采用Fabre方法吻合,静脉吻合使用带支架管的供肾腔静脉与受体肾静脉吻合,输尿管吻合采用输尿管-膀胱瓣与受体膀胱吻合,对侧肾脏切除采用术中留置结扎线,术后3 d结扎的方法.结果采用新方法建立的大鼠肾脏移植模型,手术时间较经典术式明显缩短,手术成功率明显提高.结论新方法建立大鼠肾移植模型使该移植模型比较稳定,成功率较高,易于掌握.     

低剂量他克莫司为基础四联免疫抑制方案在肾移植中的应用：4年随访结果

背景：免疫抑制药物日新月异的发展及药物应用存在较大的个体差异使得目前国内外对于肾移植后免疫抑制的选择和应用剂量等仍无法达成完全统一的共识。 目的：观察以低剂量他克莫司为基础的四联免疫抑制剂方案的免疫抑制效能、保护肾功能的作用和安全性。 方法：以他克莫司+酶酚酸酯+泼尼松龙(方案1)为对照组;将方案1中他克莫司和酶酚酸酯减量为方案2,以方案2+西罗莫司为组1;方案2+咪唑立宾为组2。检测3组受者肾移植后第2,4周、6个月及1年时淋巴细胞对供体树突状细胞的反应强度;每6个月测定1次受者尿转化生长因子β1;移植后每1~3个月检查肝肾功能、血尿常规、血糖,随访时间为4年。 结果与结论：3组急性排斥反应发生率及感染发生率无显著差异;移植4周,组1,组2的反应强度明显低于对照组 (P < 0.05);移植1年,组1、组2尿转化生长因子β1浓度均显著低于对照组(P < 0.05);移植2年,组1、组2血肌酐和肌酐清除率降低值均显著低于对照组(P < 0.05);组1、组2肝功损害、高血糖等不良反应发生率均低于对照组 (P < 0.05)。提示与常规剂量他克莫司为基础的三联免疫抑制方案相比,低剂量他克莫司为基础的四联免疫抑制方案能够发挥同样的免疫抑制效果,同时能减轻移植肾纤维化进程,改善移植肾功能,减少严重不良反应发生率,更有利于移植肾长期存活。     

应用供体抗原特异性CD4+CD25+ Treg细胞延长大鼠移植肾的存活

背景：随着磁分选技术的完善,体外分选、扩增足量的对移植抗原具有特异性的细胞已成为可能,但就其在体内应用剂量及免疫耐受的效能问题目前鲜有报道。 目的：探索供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞在体内应用诱导移植免疫耐受的量效关系。 方法：以SD大鼠为供体、Wistar大鼠为受体,建立同种异体肾移植动物模型;体外分选、富集Wistar大鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞,并诱导其对SD大鼠供体抗原的特异性表型;根据不同数量(2×105、5×105、1×106、2×106)供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞在肾移植中单剂量尾静脉注射,并以未注射组为对照。术后15 d分析移植肾脏存活状况。术后4,9,15 d采血检测各组肌酐水平,同时进行移植肾脏病理检查,按照Banff Schema标准进行诊断,并根据Watanabe的方法进行半定量评分。 结果与结论：术后15 d内对照组死亡率最高83.3%,2×105组次之66.7%,2×106组为58.3%,5×105组为33.3%,1×106组则全部存活;各实验组术后4,9,15 d血肌酐水平均明显低于对照组(P < 0.05,P < 0.01);术后第9,15天,2×105组、5×105组血肌酐水平均明显高于1×106组、2×106组(P < 0.05);术后第4,9,15天移植肾脏病理检查的半定量评分结果显示,各时间段5×105组、2×105组与对照组间差异无显著性意义,各时间段1×106组与2×106组优于对照组 (P < 0.05)。结果初步证实供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞受体内应用能够改善大鼠移植肾功能,延长移植肾存活时间,1×106为相对理想的单次应用剂量。     

大鼠肾移植动物模型实验研究

目的 探讨大鼠肾移植动物模型构建方案,提高该动物模型构建效能.方法 以封闭群SD 大鼠作为供、受体建立同系异体肾移植动物模型.原位灌注切取左侧供肾,保留肾动、静脉全长;自供肾下极顺行钝性分离两侧输尿管,至膀胱开口部切取输尿管.于距肾门部约5 mm 处原位切取受体左侧肾脏.端端吻合移植肾动脉;应用内支架法两定点(两点固定)端-端吻合移植肾静脉;采用受体膀胱浆肌层隧道包埋法进行尿路重建.结果 构建大鼠肾移植动物模型54 例次,成功49 例,手术成功率90.7%,静脉吻合时间为(6.2 ±1.5)min,尿路重建用时(7 ±2.0)min;术中肾静脉吻合口通.率达100%,术后病理检查未发现吻合口血栓形成;术后尿路并发症发生率为12.2%.结论 应用内支架法行移植肾静脉吻合及包埋法行尿路重建操作性强、并发症少,可有效提高大鼠肾移植动物模型构建效率.