荔枝果实中泛变应原profilin基因的克隆及序列分析

目的克隆荔枝果实中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白(profilin)同源基因。方法采用生物信息学方法对多个植物泛变应原基因进行序列同源性比对,根据序列保守区域设计并合成简并性引物,通过RT-PCR和3'-RACE技术克隆荔枝果实中泛变应原profilin的全长基因,并进行序列分析。结果获得了一个全长的新基因(689bp)。该基因开放阅读框为396个碱基,编码131个氨基酸残基,经分析该蛋白等电点为4.98,分子量约为14060。此序列已被GenBank收录,登陆号为DQ309464。序列分析结果显示所克隆到的基因与许多水果和花粉的泛变应原profilin基因有很高的同源性(与桦树和橡胶花粉泛变应原profilin的同源性分别为80%和84%,与桃子profilin的同源性为85%),因此认定其为泛变应原基因。结论从荔枝果实中成功地克隆出了一个泛变应原基因,为进一步的蛋白表达奠定了基础。     

浅析护理学基础课后评估的优化

课后评估是教师检查课堂教学质量、反馈教学信息的有效措施。只有通过优化课后评估，在教与学的双向评估及教师的自我评估中，不断总结自己在教学中成功的经验和失败的教训，才能最大限度地发挥评价对教学活动产生的导向、反馈、诊断和激励作用，提高教学质量和教学效率。     

小剂量雌激素治疗高促性腺激素性闭经后妊娠1例报告

高促性腺激素闭经的病变部位在卵巢。由于卵巢病变,如卵巢早衰（Prematureovarianfailure．POF）、卵巢不敏感综合征（Resistantovariansyndrome．ROS）和先天性卵巢发育不全（Turner’ssyndrome）等。其临床特点为：年龄在40岁前闭经或原发闭经．血清促性腺激素（Gn,包括FSH和LH）异常增高．特别是FSH增高（FSH＞40mIU／ml）,雌激素水平低（EZ＜20Pg／ml）,部分病例因此不孕。临床上通常采用人工周期方法治疗,很少获孕。今报道一例应用小剂量雌激素治疗后妊娠如下。临床资料朱5X,已婚,32岁。因闭经5年就诊。5年前无明显…     

非酒精性脂肪性肝病，需要治疗吗？

<正>非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）我国患病率约25%～30%,往往没有什么明显不适感,大家都不当一回事,也想不到去咨询专科医生,时间一长甚至都不去管它了。那么NAFLD到底是不是病？需不需要治疗？NAFLD疾病谱包括单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）及其有关肝硬化和肝细胞癌。NAFLD患者经常合并其他严重的代谢性疾病,如肥胖、高血糖、胆固醇和甘油三酯升高以及全身性高血压（通常称为代谢综合征）,这些疾病进一步增加了罹患心血管疾病的风险。     

NGS技术检测自然流产胚胎或绒毛染色体非整倍体及拷贝数变异的研究

目的探索新一代测序技术(NGS)在检测自然流产胚胎或绒毛组织染色体非整倍体和拷贝数变异(CNV)应用中的价值。方法选择20例自然流产患者的绒毛进行染色体核型分析,同时应用NGS技术进行染色体非整倍体和拷贝数变异的检测,并以染色体核型分析结果为"金标准"进行NGS方法的评估。后于2013年共收集1074例自然流产胚胎或绒毛组织,应用NGS技术完成染色体非整倍体和CNV的检测,并对检测结果进行分析。结果 20例自然流产样本的NGS结果与核型分析结果对比,检测灵敏度和特异性均为100%。临床检测的1074例流产组织样本中,42例样本DNA不符合质控标准,实际完成检测1032例。1032例组织样本中阳性445例(43.12%),其中非整倍体369例(82.92%),以16、X、22、21、15、18号染色体高发;CNV共76例(17.08%),阳性样本集中发生在8-12w。阴性587例(56.88%)。根据孕妇年龄将样本分为三组比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论 NGS技术用于检测流产组织的非整倍体和拷贝数变异具有较高的灵敏度和特异性,是适用于临床的有效检测方法。     

空调空气滤网灰尘中尘螨变应原Derfl和Derpl基因的检测

目的应用PCR技术检测空调空气滤网灰尘中尘螨变应原Derfl和Derpl的基因。方法从深圳和北京地区分别收集20台、10台空调过滤网上的灰尘样品，分别提取其生物总基因组DNA作PCR模板。分别设计Derfl和Derpl各两套内外扩增引物分两步进行PCR，通过扩增出目的片段来检测空调空气滤网灰尘中尘螨变应原Derfl和Derpl基因片段，并以深层泥土DNA提取物为阴性对照和以培养的粉尘螨、屋尘螨基因组DNA提取物为阳性对照。PCR产物经电泳后切胶回收日的片段并克隆到T载体上，进行DNA序列分析并与GenBank进行同源性比较分析。结果深圳地区20台空调空气滤网上收集的灰尘中均含有粉尘螨和屋尘螨主要变应原Derfl和Derpl基因片段；北京地区10台空调空气滤网上收集的灰尘样品中，只有4份均含有Derfl和Derpl；它们扩增部分的序列与GenBank数据库里相应序列同源性为100％。从阴性对照提取物中未扩增得到目的变应原Derfl和Derpl基因片段，从阳性对照的DNA提取物中分别扩增得到目的交应原Derfl和Derpl基因片段。结论本研究首次应用分子生物学技术证实了空调空气滤网上的灰尘中存在尘螨主要变应原Derfl和Derpl基因，并提示深圳地区空调过滤网灰尘中尘螨可能比北京地区的多，从而为今后防治空调中尘螨引起的变态反应性疾病提供了依据。     

综合疗法治疗颈椎病

我科采用以动态颈椎牵引为主的综合治疗方法治疗颈椎病,收到了较好的疗效,现报道如下:1资料和方法1.1资料     

腰硬联合麻醉在妊高征剖宫产手术中的应用

目的 腰硬联合麻醉对骶神经阻滞要比硬膜外麻醉更为完善,有利于减轻或防止手术创伤所致的不良应激反应,妊娠并发妊高征时多需剖宫产终止妊娠,可以达到从根本上治疗妊高征的目的 .选择30倒妊高征患者(轻、中度),孕期28～30周,年龄24～32岁,随机分为两组,Ⅰ组采用腰硬联合麻醉组,Ⅱ组采用单纯硬膜外麻醉组.术中监测BP、HR、SPO2.结果 Ⅰ组麻醉显效时间短,阻滞范围广,运动阻滞效果满意,局麻药用量少,麻醉效果优于Ⅱ组.两组病倒中均有不同程度的血压下降,但Ⅰ组血压下降速度明显快于Ⅱ组.麻醉开始至胎儿娩出时间Ⅰ组病例要短于Ⅱ组.因此,蛛网膜下腔阻滞因其起效速度和可靠性成为剖宫产中最常用的区域阻滞.     

将法律意识培养融入护理学基础教学中

护理教学中,结合当前护理工作面临的新形势、新挑战,将法律知识融入护理学基础教学中,有意识地强化护生的法律意识,帮助护生认识护理工作中潜在的法律问题,自觉应用法律手段来规范护理行为,保障服务对象和自身的合法权利不受侵害。这对于进一步完善教学内容,提高教学质量,适应社会发展,培养新形势下的高素质护理人才具有重要意义。     

成人急性阑尾炎患者腹腔病原菌变迁及耐药分析

目的研究成人急性阑尾炎患者腹腔病原菌变迁及耐药分析。方法对168例急性阑尾炎患者腹腔渗出物进行细菌培养、鉴定及药敏试验,回顾性分析培养阳性的191株需氧菌及药敏结果。结果分离菌中革兰阴性菌占72.3%,革兰阳性菌占27.2%,需氧菌的混合感染达14.3%。近7年来革兰阴性条件致病菌、凝固酶阴性葡萄球菌及耐甲氧西林葡萄球菌分离率上升,革兰阴性菌对第三代头孢菌素的耐药率在29.5%以上,β-内酰胺酶抑制剂与第三代头孢菌素的复合物仍有较高的抑菌率,在94.4%以上。革兰阳性菌最敏感的药物仍为去甲万古霉素,本组检测到1例耐万古霉素肠球菌(占8.3%)。结论成人急性阑尾炎患者腹腔病原菌在变迁,病原菌对临床常用抗生素的耐药率在增高。