CYP17A1基因新突变致17α-羟化酶/17,20-裂解酶部分性缺陷症

目的研究1例17α-羟化酶/17,20-裂解酶部分性联合缺陷症患者CYP17A1基因突变特点,并结合患者的临床表现与基因突变类型初步探讨P450C17酶蛋白的结构与功能的关系。方法收集1例17α-羟化酶/17,20-裂解酶部分性联合缺陷症患者的临床资料及其亲属血标本,提取基因组DNA,设计7对引物扩增CYP17A1基因的8个外显子及外显子与内含子的连接区域,琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物,产物胶回收后直接做为DNA双链模板测序。DNA双链模板不一致的PCR产物经克隆后测序。测序结果在核苷酸序列数据库进行比较分析。结果患者CYP17A1基因突变检测结果为5994-5995delAT/7541C>T复合杂合子。这两种突变均未见报道。推测5994-5995delAT导致I259H,274X,突变形成的截短蛋白质缺少血红素结合区域,因此是没有功能的;而通过人类P450C17酶计算机模型分析显示7541C>T导致的A398V远离酶的活性中心,推测突变可能使酶的活性减弱,而不是完全地丧失。患者临床表现为有自发不规则月经及轻度高血压、低血钾,结合激素测定结果提示肾上腺和性腺保留部分功能。因而患者的基因型与其临床表型是一致的。结论应进行突变P450C17酶的功能学研究来进一步明确结构改变对功能的影响。     

严重急性呼吸综合征相关冠状病毒检测探针制备及组织原位杂交

严重急性呼吸道综合征(SARS)的流行暴发引起了世界范围内对SARS病原体的分离及发病机制的研究。国内外多个研究机构报道一种新型的冠状病毒为SARS的致病因子；于部分患者的血液、呼吸道分泌物，粪便中检测到这种病毒的存在，或血清中具有该病毒的抗体产生。这对SARS的诊断和治疗都具有重要的意义。但直接于患者的病变组织中检测SARS病毒的报道较少。我们尝试从病变组织中检测SAPS病毒。     

GMP法玻璃化冷冻人胚胎的效果观察

目的探索GMP法玻璃化冷人胚胎的可行性。方法选用IVF中多精受精的4-10细胞阶段的胚胎为研究对象，先后在玻璃化1液（10％乙二醇＋10％二甲亚砜）和玻璃化2液（20％乙二醇＋20％二甲亚砜＋0．3M蔗糖）中分别平衡1mim和0．5mim，然后用GMP管虹吸胚胎直接浸入液氮。其结果与常规的程序化慢冻进行比较。结果GMP法的存活率、胚胎完整率、卵裂球存活率比程序化慢冻法更高（分别为94．4％对73．9％，P〈0．01；79．6％对33．9％，P〈0．01；91．6％对67．8％；P〈0．01），但卵裂球完全死亡率更低（0％对10、4％；P〈0．01）。结论GMP法玻璃化冷冻人胚胎是可行的。     

胰腺癌微淋巴管的分布及其临床意义

目的探讨胰腺癌组织周边和内部VEGF-C、VEGF-D蛋白表达与微淋巴管密度(microlymphtic vesseles density,MLVD)及淋巴结转移之间的相关关系,阐明癌周淋巴管增生的机制及意义。方法免疫组化检测30例胰腺癌组织周边和内部VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3(MLVD)蛋白的表达。结果肿瘤周边部位VEGF-C、VEGF-D蛋白阳性率分别为73.3%(22/30)、56.7%(17/30),显著高于肿瘤中心部位;在VEGF-C蛋白阳性组,MLVD显著高于阴性组(P<0.01),淋巴结转移发生率增高(P=0.0318);VEGF-D蛋白阳性组MLVD高于阴性组(P<0.01),淋巴结转移发生率增加(P=0.0179)。结论胰腺癌癌周VEGF-C、VEGF-D蛋白表达、MLVD显著高于肿瘤中心部位;癌周VEGF-C、VEGF-D蛋白表达、MLVD与淋巴结转移发生率呈正相关;提示VEGF-C和VEGF-D诱导胰腺癌癌周淋巴管生成,促进肿瘤细胞淋巴道转移。     

骨髓瘤细胞免疫球蛋白重链基因可变区的研究

为分析多发性骨髓瘤 (multiplemyeloma,MM )细胞对免疫球蛋白重链基因可变区 (VH)基因家族的取用 ;根据VH 基因突变特点 ,揭示MM细胞的起源。以重链基因可变区 (VH1 VH6 )基因家族特异性引物 ,用PCR法扩增骨髓瘤细胞系CZ 1细胞和 98例MM患者外周血单个核细胞VH 基因片段 ,纯化后的PCR产物和pMD18 T载体连接并转化JM10 9细菌 ,经克隆鉴定后 ,目的DNA片段用末端双脱氧法测定DNA序列 ,和其对应的胚系基因序列比较。结果表明MM细胞对各VH 基因家族的取用顺序为VH3>VH1>VH4 >VH2 >VH5 >VH6 ;MM细胞VH 基因互补决定区 (CDR )氨基酸替换性突变 (R突变 ) /氨基酸静寂性突变 (S突变 )等于 9 6 7,而骨架区 (FR )R/S等于 0 87,而且随着疾病的进展 ,IgVH 基因并不发生进一步的突变。结论是MM前体细胞在进行VDJ基因重排时 ,对VH 基因家族的取用和基因家族相对大小有关 ;MM细胞可能起源于已经发生抗原选择和体细胞突变的B记忆细胞或前浆细胞。     

背阔肌肌皮瓣一期移植重建踝趾背伸功能

我院自 1996年 1月至 2 0 0 0年 1月采用吻合神经血管蒂的背阔肌肌皮瓣一期移植修复小腿胫前肌群缺损 ,重建踝趾背伸功能共 6例 ,效果满意。现报告如下。1　临床资料1.1　一般资料　本组 6例 ,男 4例 ,女 2例 ,年龄 17～ 45岁。平均 2 7.5岁。交通事故伤 5例 ,重物砸伤 1例。创伤情况 :均为胫前皮肤及胫前肌群缺损 ,面积 7～ 14cm× 17～ 2 4cm,合并胫前血管、腓深神经挫伤、断裂。其中胫腓骨骨折 3例(无骨缺损 )。切取肌皮瓣面积 8～ 15 cm× 18～ 2 5 cm。术前患侧足趾背伸肌力 0级 ,踝不能背伸。本组 6例均在伤后 6小时内进行手术。手术…     

扩张器治疗头皮巨大神经纤维瘤病20例分析

对于巨大的头皮神经纤维瘤,临床上处理起来较为棘手。１９８８～１９９８年,我们采用预置扩张器,一次手术切除病灶并修复缺损治疗头皮巨大神经纤维瘤病２０例,取得了良好的效果,现总结如下。ｌ临床资料１．ｌ一般资料 头皮巨大神经纤维瘤病病人 ２０例,男９例,女 １１例;年龄１２～３０岁,平均１８岁。头皮瘤体直径均超过１５ｃｍ,最大面积接近 ３／５头皮。 １２例全身伴有散在多发性瘤结节。 ８例全身皮肤未见异常,但瘤区头皮有黑褐色斑,局部毛发均表现为枯黄、白发或稀少等营养不良状态。１１例有家族史。１．２治疗方法 ２…     

ACEI对去卵巢骨质疏松大鼠激肽释放酶-激肽系统及骨丢失的影响

目的探究血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)卡托普利对去卵巢(OVX)骨质疏松大鼠骨丢失及激肽释放酶-激肽(kallikrein-kinin system,KKS)系统的影响。方法去卵巢法制备绝经骨质疏松大鼠模型,分为OVX组、ACEI组[6 mg/(kg·d)卡托普利]、阳性对照雌激素组[0.05 mg/(kg·d)己烯雌酚],另不去卵巢为Sham组。给药8周后,全自动生化分析仪检测血清钙(Ca)、Ⅰ型前胶原N-端肽(PINP)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)及Ⅰ型胶原交联C端肽β序列(β-CTX)水平,微型计算机断层摄影术(micro CT)法检测骨密度及微结构,TRAP法观察骨组织破骨细胞数量,Western blot法检测骨组织中骨形态发生蛋白2(BMP2)、Runt相关转录因子2(Runx2)、组织激肽释放酶(KLK)、缓激肽受体1(B1R)及缓激肽(BK)蛋白表达。结果相较于Sham组,OVX组大鼠骨密度、骨小梁数量及厚度、骨体积分数、SMI、PINP、ALP、OCN水平、BMP2、Runx2蛋白表达均降低(P均0.05),骨小梁分离度、TRAP、β-CTX水平、破骨细胞数量、KLK、B1R及BK蛋白水平均增加(P均0.05)。相较于OVX组,ACEI组、阳性组大鼠骨密度、骨小梁数量及厚度、骨体积分数、SMI、PINP、ALP、OCN水平、BMP2、Runx2蛋白表达均增加,骨小梁分离度、TRAP、β-CTX水平、破骨细胞数量、KLK、B1R及BK蛋白水平降低(P0.05)。结论 ACEI可抑制KKS系统,降低破骨细胞活性减少骨吸收,增强成骨细胞活性增加骨形成,提高骨密度,改善骨微结构,进而改善OVX大鼠骨质疏松症状。     

神经钙黏蛋白在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的探讨神经钙黏蛋白在宫颈癌中的表达及其临床意义。方法随机选取2017年8月-2019年8月浙江省肿瘤医院全子宫切除术宫颈标本存档蜡块150例,分为宫颈鳞癌组76例、宫颈上皮内瘤变组50例和正常宫颈组织组24例,统计分析3组患者的N-cad、N-cadherin、HIF-1α、p53、p63表达情况,并分析宫颈鳞癌组患者的临床病理特征与N-cad表达的差异。结果宫颈鳞癌组患者的N-cad、N-cadherin、HIF-1α、p53表达阳性率均显著高于宫颈上皮内瘤变组、正常宫颈组织组,p63表达阳性率显著低于宫颈上皮内瘤变组、正常宫颈组织组,差异均有统计学意义(P<0.05)。宫颈上皮内瘤变组患者的N-cad、N-cadherin、HIF-1α、p53表达阳性率均显著高于正常宫颈组织组,p63表达阳性率显著低于正常宫颈组织组,差异均有统计学意义(P<0.05)。宫颈鳞癌组临床分期Ⅱ期患者的N-cad表达阳性率显著高于Ⅰ期患者,组织学分级G2-G3级患者的N-cad表达阳性率显著高于G1级患者,差异均有统计学意义(P<0.05);但不同年龄、淋巴结转移患者的N-cad表达阳性率之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论神经钙黏蛋白在宫颈癌中的表达升高,能够将一种新的潜在靶分子提供给宫颈癌的治疗。     

双极人工股骨头置换术治疗高龄股骨颈骨折

目的 通过对６６例７０岁以上老年人股骨颈骨折临床分析,探讨其手术可行性、术式选择。方法 回顾分析患者的术前并存症、术前准备、术式选择、麻醉方式、术中情况、术后处理及随诊情况。结果 本组无术中死亡病例,平均住院２８天,平均随访２６个月。良好率６３．６％。结论 ７０岁以上老人股骨颈骨折行双极股骨头置换术治疗是可行的。