PM2.5致大鼠肺损伤模型中肺巨噬细胞NLRP3 炎性小体活化研究

摘要： 目的 探讨肺巨噬细胞NLRP3炎性小体活化在大气细颗粒物 （PM2.5） 所致肺炎症损伤中的作用。方法 采用中流量采样器收集PM2.5颗粒物制成混悬液， 经气管滴注给予高、 中、 低剂量 （分别为15、 10、 5 mg/kg） 制成大鼠肺损伤模型， 3 d后麻醉动物进行肺泡灌洗， 收集支气管肺泡灌洗液 （BALF） 中的巨噬细胞， 中性红法测定其吞噬功能， 并采用免疫荧光双染色观察肺巨噬细胞内NLRP3的表达； 处死大鼠解剖取肺组织， HE染色观察肺损伤严重程度并评分， 免疫组化法检测肺组织NLRP3表达， ELISA法测定肺组织内IL-18、 IL-1β及Caspase-1的表达情况。结果 大鼠经气管滴注PM2.5染毒后， BALF内巨噬细胞吞噬功能下降。实验组大鼠肺损伤明显， 表现为间质性肺炎； 肺泡间隔明显增宽， 部分肺泡壁断裂， 尤以高剂量组表现明显； 各实验组大鼠的肺组织病理学评分均明显高于对照组 （均 P＜0.05）。低、 中、 高剂量组大鼠肺组织内NLRP3表达均高于对照组。肺组织内IL-18、 IL-1β及Caspase-1的表达不同程度上调。结论 大鼠气管滴注PM2.5引起的肺损伤和炎症反应与肺巨噬细胞内NLRP3炎症小体的活化有关。     

DNA定量分析法筛查宫颈癌及癌前病变的评价

目的:探讨细胞DNA倍体分析方法在筛查宫颈癌及CIN中的作用及临床意义。方法:对参与普查的15643名妇女采用宫颈刷取材,液基薄层制片,DNA染色,应用全自动DNA倍体分析系统扫描诊断,对516例(3.3%)可见异倍体细胞或异倍体峰妇女行阴道镜检查,并取活检,经病理检查确诊。结果:检出425例(82.4%)CIN和宫颈癌,检出率为2.7%(425/15643);CIN及宫颈癌可发生于任何糜烂程度甚至光滑的宫颈;异倍体数目越多,病变程度越高。结论:采用DNA倍体分析方法筛查宫颈癌能显著提高阳性检出率。     

柴胡成分抗肾炎效果的研究

从柴胡Bupleurtim falcatum L.根中提取的柴胡皂甙,对炎症初期血管通透性亢进有抑制作用,并且在抑制右旋糖酐(Dextran)所致浮肿的同时,尚有抗肉芽形成的作用。以柴胡为中心的方剂柴苓汤、小柴胡汤、TJ-8014(小柴胡汤去生姜加黄连、茯苓)对小鼠抗GBM肾炎、加速型passive Heymann肾炎及Puromycin aminonucleoside肾病均有治疗效果。本次实验主要研究柴胡成分柴胡皂甙用于豚鼠抗GBM肾炎(anti-GBM nephritis)的效果。同时探讨了其作用机制方面的内容,如柴胡皂甙对血小板聚集力、内源性皮质酮(corti-     

柴胡成分抗肾炎效果的研究

从柴胡Bupleurum falcatum L·根中提取的柴胡皂甙,对炎症初期血管通透性亢进有抑制作用,并且在抑制右旋糖酐(Dextran)所致浮肿的同时,尚有抗肉芽形成的作用。以柴胡为中心的方剂柴苓汤、小柴胡汤、     

复方泛影葡胺用于子宫输卵管造影960例分析

我院门诊自1995年5月～2004年5月应用复方泛影葡胺做子宫输卵管造影960例，现将情况报告如下。     

变态反应性心脏病变一例

<正> 变态反应性疾病主要引起泛发性或弥漫性小血管炎称为变态反应性血管炎或过敏性血管炎。心脏是较常受累的器官,由此引起心脏改变称心肌血管神经性水肿或称心脏荨麻疹。我们曾遇到1例,现报道分析如下。 1.临床资料 1·1 一般情况 患者为女性,36岁,既往无过敏史,无高血压病史,无心脏病史。     

PM2.5对大鼠肺泡巨噬细胞内NLRP3炎性小体表达及细胞凋亡的影响

目的:初步探讨大气细颗粒物(fine particulate matter,PM2.5)诱导大鼠肺泡巨噬细胞内NLRP3炎性小体活化及细胞凋亡的潜在分子机制.方法:采用中流量采样器收集PM2.5颗粒物,经超声提取制成混悬液,作用于大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)后,MTT法检测细胞存活率,Western blot检测Nod样受体蛋白3(NLRP3)、组织蛋白酶B(Cathepsin-B)及凋亡相关蛋白[Bax、Bcl-2及半胱天冬酶-3(Caspase-3)]的表达水平,ELISA检测PM2.5诱导的细胞上清液中半胱天冬酶-1(Caspase-1)、白介素(in-terleukin,IL)-18和IL-1β的含量.结果:随着PM2.5浓度的增加和刺激时间的延长,NR8383细胞存活率降低(24 h:F=17.253,P=0.000;48 h:F=18.678,P=0.000;72 h:F=256.104,P=-0.000);PM2.5诱导NR8383细胞内NLRP3 (F=437.166,P=0.000)和Cathep-sin-B(F=42.062,P=0.000)蛋白的表达上调;PM2.5上调细胞内促凋亡蛋白Bax(F=72.827,P=0.000)表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2(F=390.322,P=0.000)表达,下调Caspase-3(F=169.833,P=-0.000)蛋白的表达;PM2.5上调细胞培养液中Caspase-1(F=629.866,P=0.000)、IL-18(F=587.165,P=0.000)和IL-1β(F=68.472,P=0.000)的水平.结论:PM2.5可通过溶酶体模式诱导肺泡巨噬细胞内NLRP3炎性小体活化,促进IL-18和IL-1β分泌,并引起肺泡巨噬细胞发生凋亡.     

基于TGR5/NLRP3信号通路探讨活血清解灵对NASH大鼠炎症反应的影响

目的 基于TGR5/NLRP3信号通路,探讨活血清解灵干预非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠炎症反应的作用机制。方法 将70只SD雄性大鼠随机分为5组,分别为对照组20只,模型组20只,阿托伐他汀阳性药组、活血清解灵高、低剂量组各10只。对照组给予维持饲料,其余各组均给予高脂饲料,通过模型评价确定于第20周末NASH大鼠模型造模成功。造模成功后,对照组和模型组灌胃生理盐水,阿托伐他汀阳性药组、活血清解灵高、低剂量组灌胃给予相应药物,每日1次,连续4周。第24周末处死大鼠,计算肝指数,全自动生化仪检测血清中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平,苏木素-伊红（HE）、油红O染色观察肝脏组织病理变化,蛋白免疫印迹法（Western Blot）、免疫荧光法检测肝脏组织G蛋白偶联胆汁酸受体（TGR5）及核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（NLRP3）蛋白表达,酶联免疫吸附测定法（ELISA）试剂盒检测肝脏组织白细胞介素18（IL-18）及白细胞介素1β（IL-1β）含量。结果 活血清解灵能显著改善NASH大鼠一般状态,各剂量组均能显著降低大鼠体质量、肝指数（P<0.01）,血清TG、TC含量和ALT、AST活性水平显著下降（P<0.01）,病理结果提示活血清解灵能明显改善肝脏脂肪变、炎症及气球样变,TGR5蛋白表达显著上升（P<0.01）、NLRP3蛋白表达及IL-18、IL-1β含量均显著下降（P<0.01,P<0.05）。结论 活血清解灵能够明显改善NASH大鼠状态,抑制其肝脏脂肪变和炎症反应,其作用机制可能与抑制TGR5/NLRP3信号通路传导密切相关。     

小檗胺及其衍生物抗肿瘤作用及机制研究进展

小檗胺(berbamine,BER)系自清热燥湿、泻火解毒中草药黄芦木(Berberis amurensisRupr.)根中提取的一种双苄基异喹啉类生物碱(分子式C37H40N2O6,相对分子质量608.71,结构式见图1),不溶于水,溶于乙醇等有机溶剂,其盐酸盐微溶于水(小于30g/L),作为升白细胞药已长期应用于临床,不良反应较小。BER具有多种药理作用,如抗炎、免疫调节[1]、增     

加味茵陈蒿汤对大鼠胆汁淤积性肝病的治疗作用

目的:探讨加味茵陈蒿汤对α-异硫氰酸萘酯(ANIT)诱导胆汁淤积性肝病(CSLD)大鼠模型的治疗作用。方法:将56只大鼠随机分为7组,分别为空白组,模型组,复方甘草酸苷胶囊组(22.5,45 mg·kg^-1),加味茵陈蒿汤低、中、高剂量组(4.1,8.1,16.2 g·kg^-1)。以ANIT(100 mg·kg^-1)灌胃1次,制备胆汁淤积性肝损伤模型。复方甘草酸苷胶囊及加味茵陈蒿汤在造模第2天开始灌胃给药,连续4 d。第5天进行胆管插管手术测量大鼠胆汁流速,取血清检测各组总胆红素(TBIL),直接胆红素(DBIL),间接胆红素(IBIL),丙氨酸氨基转移酶(ALT)和总胆汁酸(TBA)等血清学指标。采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肝组织中G蛋白偶联胆汁酸受体(TGR5),核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3),半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)蛋白表达情况。结果:与空白组比较,模型组胆汁流速显著降低(P<0.01),各血清学指标均显著增高(P<0.01),肝组织病变严重,且肝组织中TGR5,Caspase-1蛋白表达显著增强(P<0.01);与模型组比较,复方甘草酸苷胶囊组对于胆汁流速和血清学指标无显著影响,加味茵陈蒿汤高剂量组胆汁流速增快(P<0.05),各血清学指标均降低(P<0.05),复方甘草酸苷胶囊组和加味茵陈蒿汤组大鼠肝组织病变均有不同程度地改善,且肝组织中TGR5,Caspase-1蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论:加味茵陈蒿汤可有效治疗大鼠CSLD,其机制可能与胆汁酸分子及胆汁酸受体TGR5介导的炎症因子有关。