HIV感染病人中抗-HCV检出率

1989年建立以丙肝病毒(HCV)非结构区重组肽C_(100)为抗原的第一代抗-HCV检测方法,因其敏感性不够可能导致对HCV感染率估计过低。后来加入另一个非结构区重组抗原C_33和HCV核壳区抗原建立了第二代抗-HCV检测方法,提高试验敏感性。该文作者以四种免疫学方法(第一代EIA和中和试验、第二代EIA和免疫印迹试验)检测人类免疫缺陷病毒(HIV)感染病人中抗-HCV阳性率,探讨HIV对HCV感染的影响及HCV的传播。研究对象为法国多中心前瞻性研究中的272例HIV血清学阳性至少一年以上的患者,男174例、女98例,平均年龄30.9岁(18～78岁)。因静脉毒瘾而感染者97例(35.7％)、同性恋男子68例(25.0％)、     

应用抑制性消减杂交技术克隆丙型肝炎病毒 E2蛋白反式调节基因

目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建丙型肝炎病毒(HCV)E2蛋白反式调节基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HCVE2蛋白反式调节相关基因。方法以HCVE2表达质粒pcDNA3.1(-)_E2转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照,制备转染后的细胞裂解液,从中提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaI酶切后将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR)扩增,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。结果成功构建人HCVE2蛋白反式调节基因差异表达的cDNA消减文库。文库扩增后得到78个阳性克隆,进行菌落PCR分析,均得到100～1000bp插入片段。挑取38个含有插入片段的阳性克隆测序分析,获得35个已知基因序列和3个未知基因。通过生物信息学分析获得其全长序列,其功能正在研究中。结论应用SSH技术成功构建了HCVE2反式调节基因差异表达的cDNA消减文库。该文库的建立为进一步阐明HCVE2反式调节的靶基因及致慢性肝脏疾病发生的分子生物学机制提供理论依据。     

YL-1型颅内血肿粉碎穿刺针在治疗大面积脑梗死的临床应用

重症大面积脑梗死在临床上并非少见,传统治疗多采用保守治疗,病死率和病残率极高,目前及时手术去骨瓣减压是治疗大面积脑梗死,降低病死率,改善预后的重要手段.近年来我们应用YL-1型颅内血肿粉碎穿刺针微创清除坏死脑组织治疗重症大面积脑梗死35例,取得一定临床疗效,报告如下.     

HIV感染的预防性保健

本文就近年来HIV相关疾病的早期发现、预防、改善健康状况和提高生存质量等方面的研究现状作一简要综述。     

超声雾化治疗复发性口腔溃疡100例报告

超声雾化治疗复发性口腔溃疡１００例报告山西省左权县人民医院口腔科张树林，许彦江我科于１９９０年开始用超声雾化治疗复发性口腔溃疡，疗效满意，现报告如下。临床资料１００例中，男４７例，女５３例；年龄以中年人为主。病程最短７天，最长５年。溃疡面有黄白色渗出...     

重症乙肝和慢性活动性乙肝血浆sIL－2R水平变化及其意义

重症乙肝和慢性活动性乙肝血浆ｓＩＬ－２Ｒ水平变化及其意义西安医科大学第一临床医学院肝炎研究室７１００６１张树林，吴广利，严玉兰，陈太平，李义方急、慢性病毒性肝炎可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平变化已有报道，但未见研究重症肝炎者。我们以单克隆...     

乙型肝炎病毒基因组中前-X-编码基因启动子序列的确定及转录活性的鉴定

利用长距离精确聚合酶链反应 (LA PCR)扩增慢性乙型肝炎患者血清来源的 5个全长的HBV基因组DNA ,在分析不同克隆之间的序列变异程度时 ,发现所获得的 5个克隆在X区之前可能还存在一个开放读码框架 (ORF) ,长度 16 8bp ,编码 5 6个氨基酸残基(aa) ,并将其暂时命名为前 X(pre X)。为了解前 X编码区上游DNA序列是否具有启动子活性 ,选取翻译起始密码子ATG上游 2 2 5bp的基因片段 ,将其克隆至报告基因表达载体pCAT3中 ,构建pCAT3 前 X promoter表达载体 ,以该质粒转染HepG2细胞 ,用ELISA法检测报告基因编码产物氯霉素乙酰转移酶 (CAT)的表达活性。结果发现 ,质粒 pCAT3 前 X promoter能够指导CAT的表达 ,吸光度 (A值 )是pCAT3的 3 5倍 ,提示pCAT3 前 X promoter中插入的DNA序列具有启动子活性 ,说明这一段基因序列中存在新的启动子区 ,为研究、界定前 X的ORF的存在提供了直接的依据。     

聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎的随机对照临床研究

目的评价小剂量聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型病毒性肝炎的疗效和安全性.方法192例慢性丙型肝炎患者随机分为两组：聚乙二醇干扰素α-2b 0.5μg/kg每周一次联合利巴韦林750～1050 mg/d,或普通干扰素α-2b 3 MIU每周3次联合利巴韦林750～1050 mg/d.疗程48周,治疗结束后随访24周.结果聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗的持续病毒学应答率为53.8%,而普通干扰素α-2b联合利巴韦林治疗的持续病毒学应答率为58.1%,两组持续病毒学应答率相当（P=0.966）.聚乙二醇干扰素α-2b治疗组的药物相关性不良反应发生率为100%,而普通干扰素α-2b治疗组的不良反应发生率为95.2%,两组间差异有统计学意义（P=0.033）.但是没有与干扰素α-2b聚乙二醇化相关的特有的新的不良反应发生.结论小剂量聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎的疗效和安全性与普通干扰素α-2b联合利巴韦林治疗的疗效和安全性相当.     

HCV基因型对慢性丙型肝炎干扰素疗效的影响

目的 探讨HCV基因型对慢性丙型肝炎的干扰素（IFN）治疗效果的影响。方法 采用随机、开放和对照的多中心临床试验设计。208例受试者按1：1随机分到聚乙二醇干扰素α—2a(Peg-IFN）组和IFN-α-2a组。在治疗之前，用Simmonds基因分型法酶切分型，在治疗24周结束和完成24周的随访后检测患者的ALT和HCV RNA，以HCV RNA的阴转率作为主要评价指标，经ITT人群的统计学分析。结果 202例患者确定了HCV基因型，基因1型158例（78.2%），非基因1型44例（21.8%），治疗结束病毒应答率（ETVR）和持续病毒应答率（SVR）基因1型患者分别为53.8%和25.3%，非基因1型患者分别为61.4%和43.2%，SVR两组患者差异有显著性，x^2=5.313,P=0.021。Peg IFN组基因1型和非1型患者的ETVR分别为76.8%和81.0%，SVR分别为35.4%和66.7%，SVR两组患者差异有显著性，x^2=6.735,P=0.01。病毒复发率基因1型和非基因1型患者分别为55.6%和23.5%，差异有显著性，x^2=5.496,P=0.02.IFN-α-2a组，ETVR和SVR基因1型患者分别为29.0%和14.5%，非基因1型患者分别43.5%和21.7%，差异无显著性。病毒复发率基因1型患者为72.7%，非基因1型患者为50.0%，差异无显著性。结论 IFN对基因1型丙型肝炎患者的疗效低于非基因1型，HCV基因型主要影响IFN对慢性丙型肝炎的持续应答，也与药物和IFN的疗程相关。     

噬菌体展示技术的原理及应用

0 引言 1985年Smith首次证实丝状噬菌体fd基因组能通过基因工程的手段进行改造,将EcoR Ⅰ内切酶的部分基因片段(171 bp和132 bp)与pⅢ基因融合,获得的重组噬菌体可在体外稳定增生,表达产物能被抗EcoR Ⅰ内切酶抗体所识别。1988年Parmley et al将已知抗原决定族与p Ⅲ的N端融合呈现在表面,可特异性地被抗体选择出来,并提出通过构建随机肽库可以了解抗体识别的抗原决定簇表位的设想。1990年McCafferty et al地报道了用噬菌体展示技术筛选溶菌酶的单链抗体的方法,从而开始了这项技术的广泛应用的新时代。