Expression of blood AFPmRNA in the patients with distant metastasis of human hepatocellular carcinoma (HCC)

Hepatocellularcarcinoma(HCC)iscommoninChina;about20,000patientsdiedofHCCeveryyear.OneofthedifficultiesinmanagementofHCCisitsinvolvemtntcharacteristic,includingintrahepaticmetastasis,portalvenousinvasionandspreadingintoperipheralblood,whichisthemainreasonforHCCrecurrenceanddistantmetastasisafterHCCresected.Inthisstudy,weattempttodemonstrateinHCCpatientswithdistantmetastasiswhoseperipheralbloodsexpressedAFPmRNA,theeffectsandsignificanceintherecurrenceordistantmetastasisofHCCaftertheir…     

胆囊切除术后残余胆囊19例分析

目的 提高对胆囊切除术后残余胆囊的认识,做出正确诊断和治疗。方法回顾分析19例胆囊切除术后残余胆囊的临床表现、影像学和病理学检查,以及外科治疗。结果大多数病例获得正确的临床诊断。19例均获得手术切除,术后恢复良好。结论根据临床表现和影像学检查,该病能获得正确诊断。再次手术切除是治愈该病的唯一手段。     

黄色肉芽肿性胆囊炎与胆囊结石的关系

目的研究黄色肉芽肿性胆囊炎（XGC）与胆囊结石的关系，探讨胆囊结石在XGC发病中的作用。方法回顾性分析1996年1月至2005年12月33例经病理确诊为XGC的临床资料。结果33例均行B超检查，其中20例行CT检查。全部行手术治疗。术中发现合并胆囊结石32例，单发胆囊结石ll例，多发胆囊结石21例。26例胆囊结石直径≥1．0cm；20例结石位于胆囊颈部，占所有合并胆囊结石病例的62．5％。此外，5例合并胆总管结石，3例合并Mirizzi综合征，无一例合并肝内胆管结石。结论XGC是一种特殊类型的慢性胆囊炎症，伴有黄色肉芽肿形成，重度增生性纤维化，以及泡沫状组织细胞为特征，临床上非常少见，术前诊断困难。需依赖病理检查确诊。几乎所有的XGC均合并胆囊结石。胆囊结石会引起胆汁淤积，使胆汁渗入破损的胆囊壁，从而可能引起XGC的发生。胆囊颈部结石嵌顿很可能在XGC的发病中起着重要作用。     

肝癌细胞凋亡中TIP30对Bcl-2蛋白家族的表达的调节

Objective: To investigate the role of TIP30 in the apoptotic signal pathway in HepG2, and Hep3B and Hu-7 hepatoblastoma cell lines. Methods: In order to confirm whether TIP30 conducted Bcl-2 family was involved in apoptosis signal pathway, MTT assay, in situ 3 end labelling of DNA assay and Western blot were carried out to detect the diverse apoptotic function of TIP30 and the regulation of Bcl-2 family. Results: TIP30 induced apoptosis as evidenced by morphological changes in hepatoblastoma cells, which was accompanied by up-regulating Bax and Bad proteins and stimulating them from cytoplasm to mitochondria, and down-regulating Bcl-xl, while it had no effect on the level of Bak protein. Conclusion: TIP30 induced apoptosis partly by modulating the protein levels of members of Bcl-2 family in hepatoblastoma cells. Elucidating the mechanism by which TIP30 induces cell death might establish it as an anticancer factor.     

重组质粒pSUPER-HBs RNAi的构建及筛选

目的:利用pSUPER-RNAi载体系统进行HBs RNAi序列的初步筛选和干扰效果鉴定。方法:设计并合成针对HBs基因区的3条siRNA(HBs-siRNA1、HBs-siRNA2、HBs-siRNA3),构建3种重组载体pSUPER-HBs-siRNA,与HBV质粒同时瞬转人胚肾293T细胞,72 h后观察转染效果,实时定量PCR和ELISA法鉴定3种干扰序列对HBs的干扰效果,筛选最佳干扰序列。结果:成功构建3种干扰质粒pSUPER-HBs-siRNA,能高效转染人胚肾上皮细胞293T,转染效率在70％以上；实时定量PCR和ELISA法结果均显示HBs-siRNA2可有效抑制HBs的表达,抵制率可达80%,而HBs-siRNA1、HBs-siRNA3干扰效果不显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建3种干扰质粒pSUPER-HBs-siRNA,筛选出其中能有效抑制HBs基因表达的pSUPER-HBs-siRNA2序列,为后续研究奠定了基础。     

静脉注射携带人白介素-10的腺病毒载体对肝硬化大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨静脉注射携带hIL-10腺病毒载体对淤胆性肝硬化大鼠肝常温缺血再灌注损伤的保护作用。方法结扎SD大鼠的胆总管建立淤胆性肝硬化模型,4周后通过每只尾静脉注射Ad-hIL10-EGFP1×109PFU/ml,体内转染72h后,进行常温肝缺血再灌注损伤实验(缺血15min,再灌注60min)。经静脉取血,进行肝功能生化检测,再通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清内hIL-10的表达情况。并取肝脏冰冻切片,用倒置荧光显微镜观察肝组织中EGFP的表达,石蜡切片HE染色观察肝脏的组织形态变化;免疫组化方法观察肝脏内hIL-10的表达情况;Tunel法检测肝脏内细胞凋亡情况。结果治疗组的肝脏冰冻切片,荧光显微镜下可见EGFP的表达;同时免疫组化有较多的hIL-10染色;ELISA检测血清中hIL-10的表达量为(723·8±301·7)ng/ml。相对应的是,治疗组的肝功能较对照两组明显改善,组织病理改变较对照两组减轻,肝细胞凋亡数量明显减少,差异有显著意义(P<0·05)。结论hIL-10肝脏基因治疗可以减轻肝硬化大鼠的肝缺血再灌注损伤,其机制可能是减少肝缺血再灌注损伤过程中肝细胞凋亡的数量。     

巢式逆转录多聚酶链反应检测荷人肝癌裸鼠周围静脉血液中肝癌细胞的实验研究

原发性肝癌（ＰＬＣ）的预后取决于多种因素，包括肿瘤细胞的组织学分化程度、肿瘤细胞的生长方式、肿瘤大小和浸润范围以及淋巴或血行转移的程度。肿瘤细胞侵入静脉血管，引起血源性播散或转移，是影响预后的重要因素之一。本研究拟应用巢式逆转录多聚酶链反应（巢式ＲＴ...     

伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌血液AFPmRNA表达情况

肝癌细胞播散入血液循环，是造成术后肝内复发或肝外远处器官转移的主要原因之一。我们检测了伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌血液ＡＦＰｍＲＮＡ表达情况，现将结果报告如下。材料与方法１９９５年１１月～１９９６年１０月收入长海医院康复部的伴有肝外远处器官转移的...     

腺相关病毒介导的大鼠移植肝基因转移

目的　研究腺相关病毒载体介导的移植肝基因转移的可行性和转导率。方法　以绿色荧光蛋白 (GFP)作为报告基因 ,在大鼠供肝冷保存前经门静脉注入不同剂量 (1× 10 10 pfu/ml、5× 10 10pfu/ml和 1× 10 11pfu/ml)的带有绿色荧光蛋白的腺相关病毒载体 (AAV GFP) ,保存后行异体肝移植 ,术后 2、4及 8周取供肝组织活检 ,运用免疫荧光显微镜和流式细胞仪检测GFP的表达 ,计算转导率 ,观察不同剂量的AAV GFP及不同保存时间 (1h、4h和 10h)对转导率的影响。结果　 3个剂量组肝移植术后第 4周移植肝细胞内均可观察到GFP的表达 ,随着AAV GFP剂量的增加 ,转导率也增加 (6 %、15 %和 34 % ) ;随着冷保存时间的延长 ,转导率逐步提高 (15 %、32 %和 5 4% ) ;除移植肝细胞外 ,脑、心、肺、肾、脾脏内均未见GFP的表达 ;与对照组比较 ,移植肝功能的差异无显著性。结论　在模拟临床肝移植条件下 ,利用腺相关病毒可将目的基因转移入移植肝细胞内 ,且能高效表达 ;转导率随病毒剂量的增加、冷保存时间的延长而提高 ;经冷保存途径腺相关病毒的转染具有嗜肝性 ;移植肝功能不受基因转导的影响