乌索酸诱导K562/DNR细胞凋亡的实验研究

目的通过体外细胞实验,证实乌索酸对柔红霉素(DNR)诱导的K562耐药细胞株(K562/DNR)有细胞毒和诱导凋亡作用,并摸索出作用的最佳浓度和时间,为乌索酸治疗血液系统恶性肿瘤奠定理论基础。方法利用WST-8分析,研究不同浓度和作用时间的乌索酸对K562/DNR细胞的体外细胞毒作用情况;利用流式细胞仪技术,研究不同浓度和作用时间的乌索酸诱导K562/DNR细胞凋亡的情况。结果乌索酸对K562/DNR细胞增殖具有明显抑制作用,诱导凋亡作用亦显著,并呈现一定的时间、浓度依赖性。结论乌索酸对于K562/DNR细胞具有确切的抗肿瘤活性。     

外科系统分离菌对抗生素耐药性的监测

研究外科感染的病原菌及其对抗生素的耐药性，以指导临床用药。方法：采用Ｖｉｔｅｋ－ＡｍｓＳｙｓｔｅｍ和Ｋ－Ｂ法，对外科临床标本进行细菌培养并菌株对１８种的耐药性。     

腹腔感染细菌流行病学调查

目的监测2006年10月至2007年10月我国不同地区14家教学医院分离的腹腔感染病原菌的菌种分布及其体外药物敏感性。方法按设计方案收集来自腹腔感染的病原菌。菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定10类共29种抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）,数据输入WHONET5．4软件进行耐药性分析。结果此次监测收集的腹腔感染病例数为742例,分离出的病原菌为743株,其中革兰阴性菌占76．7％（570／743）,革兰阳性菌占23．3％（173／743）。病原菌中分离率位于前5位的分别为大肠埃希菌（38．8％）、肺炎克雷伯菌（10．2％）、铜绿假单胞菌（9．2％）、屎肠球菌（8-2％）和金黄色葡萄球菌（4．4％）。对于所有肠杆菌科菌,敏感率高于90％的抗菌药物包括美罗培南、亚胺培南、替加环素、阿米卡星和他唑西林-三唑巴坦。对产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的大肠埃希菌和克雷伯菌,敏感性大于90％的药物包括亚胺培南（100％）、美罗培南（100％）、替加环素（100％）和他唑西林-三唑巴坦（91．5％～91．7％）。铜绿假单胞菌中多重耐药菌株的检出率为14．7％,鲍曼不动杆菌为61．3％。金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林（MRSA）的发生率为69．7％,所有菌株对替加环素、万古霉素和替考拉宁均敏感。替加环素对所有粪肠球菌和屎肠球菌均保持了100％的敏感率。粪肠球菌中敏感性较高的抗菌药物还有万古霉素（100％）、替考拉宁（100％）和氨苄西林（81．5％）。屎肠球菌中敏感性较高的抗菌药物还有万古霉素和替考拉宁（96．7％）。结论引起腹腔感染的病原菌以革兰阴性菌特别是肠杆菌科菌为主。替加环素、碳青酶烯类、他唑西林-三唑巴坦和阿米卡星对腹腔感染肠杆菌科菌保持了较高的抗菌活性,非发酵的革兰阴性杆菌的耐药性令人担忧。替加环素、万     

烧伤创面铜绿假单胞菌的分离和耐药谱分析

目的　探讨烧伤创面铜绿假单胞菌耐药谱的变迁及诱导型 β 内酰胺酶的产生。 方法对笔者医院 1996年 6月～ 2 0 0 0年 6月鉴定的 4 5 2株烧伤创面铜绿假单胞菌 ,用VITEK AMS全自动细菌鉴定及药敏系统、E test浓度梯度法做药敏试验 ,以K B法为基础作诱导酶的检测。　结果　 4年中临床常用的头孢菌素及亚胺培南的耐药率均有提高 ;其中以头孢哌酮 /舒巴坦的耐药率最低 ,但 4年中耐药率的变化差异也有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ,亚胺培南的耐药率在 2 0 %～ 4 0 %之间。 12 0株野生型铜绿假单胞菌中 ,以亚胺培南为诱导剂 ,检出产生诱导酶者为 72 .5 %。　结论　烧伤创面铜绿假单胞菌耐药谱的分析和诱导酶的检测 ,可以及时监控和调整抗生素的使用 ,对避免铜绿假单胞菌在医院内流行具有重要意义     

胆管癌的磁共振诊断与误漏诊原因分析

目的总结胆管癌MR征像,提高MR对胆管癌的诊断与鉴别诊断的准确性。方法本组收集1996年1月～2005年12月,经MRI及MRC诊断为胆管癌或MRI诊断胆管炎但临床怀疑胆管癌67例。分析MRI和MRCP的影像学表现和诊断,并与手术病理结果进行对照。结果术前MR诊断正确的56例,漏诊8例,误诊3例。肝门区胆管癌31例;胆总管区胆管癌24例。病理学表现为结节型18例,肿块型21例,浸润型13例,乳头型14例。结论胆管癌的MRI表现与生长方式有关,MRCP诊断胆管梗阻定位准确率高,仔细观察各种征像并结合临床,可提高胆管癌诊断的准确性。     

64层螺旋CT对消化道梗阻的诊断价值

目的探讨螺旋CT对消化道梗阻的诊断价值。方法回顾性分析了12例临床怀疑为消化道梗阻病例的螺旋CT检查结果并将其中螺旋CT确诊为消化道梗阻病例与临床结果对照,图像重建方法主要为多平面重建法（MPR）和最大密度投影法（MIP）。结果44例患者,无肠梗阻2例,有肠梗阻42例,其中33例经手术病理证实,4例经临床确诊。33例手术病例CT诊断梗阻部位与手术对照符合率为100％（33／33）,病因诊断符合率为100％（33／33）。结论螺旋CT扫描及重建对消化道梗阻具有重要诊断价值。     

耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌对利奈唑胺的耐药机制及分子流行病学研究

目的 研究耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCoNS)临床分离株对利奈唑胺的耐药机制及分子流行病学.方法 2011年3-8月我院分离到17株对利奈唑胺耐药的MRCoNS,包括10株头状葡萄球菌、4株科氏葡萄球菌、2株溶血葡萄球菌和1株松鼠葡萄球菌.用E-test法测定抗生素对细菌的最低抑菌浓度(MIC);脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株之间的同源性;PCR扩增和序列分析研究细菌对利奈唑胺耐药的分子机制.结果 9株利奈唑胺MIC值为＞256 μg/ml的头状葡萄球菌为同一克隆株,MIC值为4μg/ml的另1株头状葡萄球菌为密切相关菌株.4株利奈唑胺MIC值为＞256 μg/ml的科氏葡萄球菌为同一克隆株.松鼠葡萄球菌利奈唑胺MIC值为64 μg/ml,2株溶血葡萄球菌分别为4 μg/ml和6μ/ml.对23S rRNA基因第5功能区和cfr基因进行PCR扩增和测序发现,9株利奈唑胺MIC值为＞256 μg/ml的头状葡萄球菌的23S rRNA基因第5功能区存在常见G2576T突变和一个未报道过的C2104T突变;松鼠葡萄球菌存在G2576T突变;除松鼠葡萄球菌外,其余16株菌株均携带cfr基因.结论 首次报道在国内分离到利奈唑胺耐药的葡萄球菌临床菌株.MRCoNS对利奈唑胺耐药与23S rRNA基因第5功能区碱基突变和携带cfr基因相关.利奈唑胺耐药MRCoNS在我院有克隆传播现象.     

采用MALDI-TOF MS和全基因组测序鉴定和分析动弯杆菌属及其亲缘关系北大核心CSCD

目的用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）技术结合16S rRNA基因测序鉴定动弯杆菌,并通过全基因组测序分析动弯杆菌的耐药基因及该菌属种间亲缘关系。方法将65例细菌性阴道病（bacterial vaginosis,BV）患者的阴道分泌物标本厌氧培养获得25株动弯杆菌,采用MALDI-TOF MS及16S rRNA基因测序鉴定细菌种属,并提取细菌全基因组DNA进行二代测序,测序后得到的原始数据根据SPAdes软件进行拼接组装,并与ARGD耐药基因库比对得到这些细菌含有的获得性耐药基因,最后通过Harvest软件对所有菌株进行核心基因组多样性比较,构建进化树。结果采用MALDI-TOF MS鉴定动弯杆菌属仅能获得柯氏动弯杆菌的鉴定结果;采用16S rRNA基因测序能将动弯杆菌属菌株区分为柯氏动弯杆菌和羞怯动弯杆菌;全基因组分析显示动弯杆菌主要含有四环素耐药基因tet（o）及大环内酯类耐药基因erm（x）,其中tet（o）基因的检出率为84.7%,erm（x）基因的检出率为61.5%;动弯杆菌属两个种内亲缘关系相近,种间亲缘关系甚远。结论本实验结果表明目前MALDI-TOF MS不能鉴定出动弯杆菌属中的羞怯动弯杆菌;动弯杆菌对四环素类及大环内酯类抗生素具有潜在的耐药性;动弯杆菌在种内进化缓慢,暂无新种出现的趋势。     

头孢哌酮/舒巴坦对ICU常见革兰阴性杆菌抗菌活性的研究

目的 了解头孢哌酮/舒巴坦对临床常见革兰阴性杆菌的抗菌活件,比较不同浓度的头孢哌酮/舒巴坦纸片药敏试验结果的差异.方法 分离自浙江大学医学院附属第二医院、浙江省人民医院、杭州市第三人民医院和杭州市中医院的临床常见381株革兰阴性杆菌用头孢哌酮/舒巴坦含量75/75(150)和头孢哌酮/舒巴坦含量75/30(105)的药敏纸片进行K-B法药敏试验,同时用标准的琼脂稀释法检测头孢哌酮/舒巴坦的最低抑菌浓度(MIC),并采用WHONET 5.4软什和SPSS统计软件对实验结果进行分析.结果 头孢哌酮/舒巴坦105浓度和150浓度纸片法检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌,两种浓度纸片的符合率分别为:26.3%,79.2%,83.7%和33%,用SPSS 10.0统计k-related samples检验,P＜0.05;105浓度纸片法和琼脂稀释法针对以上4种菌的比对符合率分别为77.8%,89.6%,70.9%和77%;150浓度纸片法和琼脂稀释法的比对符合率分别为:27.3%,79.2%,61.6%和30%,两种浓度纸片法和稀释法的误差率比较,150纸片的假敏感和假中介要高于105纸片.结论 105浓度纸片法的结果更接近于作为金标准的稀释法,而目前临床药敏实验使用的150浓度的纸片法提高了细菌的敏感性.     

如何调控“灵感”

常有读者朋友来信问及我的写作“诀窍”。在本义中我论述这个问题，供朋友们参考和商讨。我写东西有三个特点：一是敏捷，我曾做过试验，一天的写作量可达到五万字以上；二是流畅，我可以轻轻松松地连续写作十二小时，而且文不加点；三是灵活，即不怕干扰，可随时“中止”写作，也可随时调控“灵感”。我并非什么天才，只不过有一套特殊调控“灵感”的理论与技术。下面，就从三个角度予以说明。一、“灵感”是阴性物质的表现形式首先应肯定，“灵感”是客观存在的。曾有科学家做过这方面的研究，结论是：60％以上的科学发明来自于“灵感”。…