大鼠微管相关蛋白4重组腺病毒载体的构建及在细胞中的表达鉴定

目的构建大鼠微管相关蛋白4(m icrotubu le-ossoc iated prote in 4,MAP4)重组腺病毒载体,并转染新生大鼠体外培养的心肌细胞进行表达和鉴定,为真核表达及有关实验研究提供基础。方法设计1对引物,应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术,从大鼠心肌细胞总mRNA中扩增出MAP4 cDNA,并将MAP4 cDNA克隆到腺病毒穿梭质粒pShuttle2中,构建pShuttle2-MAP4表达质粒。将此表达质粒扩增纯化酶切获得含有目的片段MAP4 cDNA的表达盒与Ad-eno-X V iru l DNA重组并线性化后转染HEK293T细胞,包装产生大鼠MAP4重组腺病毒。并且转染新生大鼠原代心肌细胞,应用免疫组化的方法进行表达鉴定。结果扩增所得的MAP4 cDNA片段经酶切鉴定、PCR扩增、DNA测序最终确定为大鼠MAP4基因,所得大鼠MAP4重组腺病毒滴度为2.3×108pfu/m l。转染原代心肌细胞48 h后MAP4表达显著增强。结论为研究MAP4的生物学活性及功能的基因治疗提供了基础。     

重症川崎病四肢指（趾）甲脱落1例报告

川崎病已成为儿科常见病种，但仍有临床医生对此不是很了解。重症川崎病及恢复期四肢指（趾）甲脱落临床又少见，本院诊治1例，现报道如下。     

机械牵张对缺血缺氧心肌细胞肌球蛋白重链mRNA表达的影响

目的　探讨机械牵张对缺血缺氧心肌细胞肌球蛋白重链 (MHC)mRNA表达的影响。方法　建立离体培养的SD乳鼠心肌细胞机械牵张模型 ,并施加无糖缺氧刺激因素 ,模拟烧伤后缺血缺氧损害。实验分 10 %牵张组、缺血缺氧培养组、10 %牵张 缺血缺氧培养组 ,每组每时相点 3皿细胞。各组分别在刺激前和刺激后 1、3、6、12h时相点进行观察。采用二步法逆转录聚合酶链反应检测心肌细胞MHCmRNA表达的变化 ,并用凝胶软件进行分析。　结果　与刺激前比较 ,10 %牵张组α、β型MHCmRNA表达均增加 ,但以 β型增加为主 (P <0.0 1)。缺血缺氧培养组α MHCmRNA向 β MHCmRNA转化加速 ,且缺氧 12h后心肌细胞α MHCmRNA下调明显 (P <0.0 5);β MHCmRNA表达先升后降 ,6h表达最强 (P <0.0 5 )。10 %牵张 缺血缺氧培养组α MHCmRNA向 β MHC mRNA转化明显 ,随机械刺激时间的延长转化加剧 ;12h后α、β型MHCmRNA表达均下调 (P <0.0 5)。　结论　机械牵张进一步加剧缺血缺氧对MHCmRNA表达的下调 ,可能是严重烧伤后早期心肌功能降低的原因之一。     

珞巴族中小学生视力调查分析

目的　了解居住在西藏自治区境内的珞巴族中小学的视力状况。　方法　采用随机抽样方式进行 ,“标准对数视力表”检查 ,并把视力低下分为轻、中、重三度。　结果　视力低下率为 35 .2 % (185 / 5 2 5 ) ,小学、初中、高中学生分别为2 2 .9%、2 7.3%和 39.2 % ;视力低下程度以轻中度为主。　结论　视力低下的发生率与学习环境 ,采光照明、营养、卫生和学习负担有关。     

缺氧复合烧伤后血清诱导心肌细胞凋亡变化中p38激酶的作用

目的:观察缺氧复合烧伤血清作用条件下心肌细胞的凋亡变化,探讨p38激酶、caspase-3在其中的作用。方法:采用乳鼠心肌细胞原代培养,检测缺氧复合烧伤血清作用后心肌细胞p38激酶的磷酸化程度,对比观察使用SB203580抑制p38激酶前后,心肌细胞caspase-3活性、酶前体蛋白表达及心肌细胞凋亡率变化。结果:缺氧复合烧伤血清使心肌细胞p38激酶迅速、持续活化,使用SB203580可降低心肌细胞caspase-3活性、稳定caspase-3酶前体和减少心肌细胞凋亡。结论:p38激酶途径参与缺氧复合烧伤血清诱导的心肌细胞凋亡过程,促进caspase-3活化是其介导凋亡的重要机制。     

高原新兵集训期训练伤调查分析

目的　了解高原地区集训期新兵训练伤的发生情况 ,研究集训期新兵训练伤的防治措施。方法　连续 3年对驻西藏海拔 30 0 0～ 330 0m地区新兵集训期间军事训练损伤情况进行调查 ,对训练伤的发生、分布、损伤发生率、损伤部位、损伤类型、致伤科目、致伤因素等结合高原地区特点进行分析。结果　集训期新兵训练伤发生率较高 ,受伤部位以四肢为主 ,软组织损伤最多。结论　科学训练、合理安排、提高新兵个人素质、改善训练场地设施 ,是减少训练伤发生的关键措施     

低氧环境对创面修复主要效应细胞表达MMP-9的作用

目的 探讨低氧(2％O2)对创面修复主要效应细胞(表皮细胞及真皮成纤维细胞)表达MMP-9的影响.方法 常规培养人表皮细胞及人真皮成纤维细胞,分为常氧组和低氧组(设低氧培养3h和6h两个组),采用Western blot、明胶酶谱法和荧光定量PCR法检测人表皮细胞和真皮成纤维细胞MMP-9细胞蛋白表达、MMP-9细胞外分泌和MMP-9转录水平变化.结果 常氧培养的表皮细胞中,MMP-9呈一定程度的基础表达和细胞外分泌.与常氧组比较,低氧能明显促进表皮细胞MMP-9的蛋白表达(6h时增强约20％,P＜0.01)和MMP-9的细胞外分泌[(44.03±3.00)vs(60.64±3.77),P＜0.01].常氧与低氧条件下真皮成纤维细胞极少表达和分泌MMP-9.荧光实时定量PCR结果显示,低氧培养条件下表皮细胞MMP-9 mRNA水平显著增高,常氧对照组为(1.67±0.69),低氧6h组为(5.47 ±0.51),两者比较差异有统计学意义(P =0.002).结论 低氧刺激能显著诱导表皮细胞,而非真皮成纤维细胞,表达和分泌MMP-9,这一作用可能与低氧刺激促进MMP-9的转录有关.     

淋巴化疗与静脉化疗对胃癌淋巴转移灶细胞凋亡的影响

目的探讨淋巴化疗与静脉化疗对胃癌淋巴转移灶细胞凋亡的影响。方法我院2006年6月至2009年3月行胃癌根治性切除术的患者30例,术后经病理证实为转移癌,其中15例在术中进行淋巴化疗,15例进行静脉化疗,采用免疫组化ABC法检测两组不同化疗方式的胃癌患者原发灶淋巴转移灶P53、Bcl-2及CD95基因的表达,并用原位末端脱氧核苷转移酶标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况。结果术中淋巴化疗可以有效抑制Bcl-2的表达,明显增强胃癌淋巴结转移灶癌细胞P53和CD95的表达,并与细胞凋亡呈正相关;静脉化疗未见明显Bcl-2的表达抑制、胃癌淋巴结转移灶癌细胞P53和CD95的表达增强;两组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论淋巴化疗可影响P53、Bcl-2及CD95基因的表达,进而加速淋巴系统肿瘤细胞凋亡,对淋巴结转移灶具有直接治疗作用,值得临床推广。     

高原颅脑损伤58例临床分析

我院位于西藏高原海拔3千多米处,低氧环境加之交通不便和血源困难等,给救治颅脑损伤带来一定困难。为提高高原颅脑伤的救治水平,现就我院1971—1988年资料完整的58例重型颅脑伤,结合文献分析如下。     

高原地区颅脑外伤的临床特点与护理

高原地区(海拔≥3000m)颅脑创伤,因受高原缺氧的影响,易加重伤情和同时并发高原脑昏迷,故强调氧疗、气管切开术的护理在高原脑外伤护理中的重要性。对降低颅压采取的侧脑室穿刺插管脑脊液持续引流的病人,应密切现察生命体征、意识、瞳孔、肢体的变化情况,以及引流液的色、泽、量的变化,准确记录。通过整体、全面的护理,全组58例无一例发生护理并发症。