叶酸/聚酰胺一胺介导miR -7抑制胶质瘤U251恶性表型的研究

目的 研究叶酸/聚酰胺-胺( FA/PAM AM)作为miR -7载体治疗胶质瘤U251的效果。方法将FA/PAMAM/miR -7络合物转染胶质瘤细胞株U251,绘制细胞生长曲线,检测细胞周期和细胞凋亡情况,Transwell体系检测瘤细胞迁移能力,软琼脂克隆实验检测细胞致瘤性;qRT - PCR方法检测miR -7水平,Western blot方法检测EGFR、PI3K和AKT2的蛋白表达。结果 获得稳定转染的U251细胞增殖速度减慢,细胞周期延长,凋亡细胞比例增多,细胞迁移能力、软琼脂克隆形成能力均有明显降低(P＜0.05);miR -7水平明显提高,EGFR、PI3K和AKT2蛋白水平均有一定程度降低(P＜0.05)。结论 FA/PAMAM能够高效投递miR -7基因至胶质瘤细胞,发挥肿瘤生长抑制作用。     

全髋置换与带血运骨瓣移植在治疗中晚期股骨头缺血性坏死的疗效比较

目的 比较带血运骨瓣移植术和全髋关节置换术治疗中晚期股骨头缺血性坏死的优缺点及临床疗效。方法 1986年7月。1991年1月间,作者采用带血运骨瓣移植术和全髋关节置换术治疗中晚期股骨头缺血性坏死患者81例89髋,通过追踪复查、问卷调查等手段共收集59例64髋患者的相应临床资料。其中采用带血运骨瓣移植术治疗36髋,全髋关节置换术治疗28髋。结果 随访时间12年3个月～16年7个月,平均15年4个月。术后早期Harris评分全髋组优于骨瓣组;后期Harris评分低龄骨瓣组及高龄全髋组相对较高,而再次手术率则相对较低。结论 对于中晚期股骨头缺血性坏死,带血运骨瓣移植术适合于年轻患者;全髋关节置换术适合于高龄患者。     

可逆性脑血管收缩综合征一例

患者男,29岁。主因"无明显诱因剧烈头痛5d"于2012年5月2日就诊于天津市泰达医院神经内科门诊。患者既往健康,无吸毒史、冶游史,无偏头痛病史。头痛以头顶部、双侧颞部为著,自诉为电击样疼痛,无恶心、呕吐,无视物模糊等症状,无肢体瘫痪、抽搐及意识障碍。体格检查:血压120/80mmHg,意识清楚、语言流利,脑神经检查正常,肌力、     

大鼠局灶性脑缺血后受累动脉调节功能受损

Objective To investigate the effect of cerebral ischemia on functional parameters of affected arteries and probe into the possible pathogenesis of ischemia-reperfusion injury.Methods Intraluminal suture ischemic model was used by occlusion of left middle cerebral artery in rats.Two hours later,the middle cerebral artery segments were isolated from both ischemia and control groups for measurement of changes in vessel diameter induced by increasing pressure and vasoactive compounds.And then,distensibility,myogenic tone,reactivity to 5-HT and ACh were calculated and compared between groups.Results In lower pressure range,ischemic vessels showed an increased myogenic tone(at 40 mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa,19.3%±0.4% vs 10.0%±0.2%,t=20.568,P=0.000)and decreased diameter.In higher pressure range,ischemic vessels showed an increased diameter.distensibility and decreased myogenic tone(at 120 mm Hg,12.0%±0.2% vs 21.8%±0.4%,t=-23.575,P=0.000).In normal pressure range,myogenic tone was not altered after ischemia. Both groups constricted to 5-HT and dilated to ACh,however,the response was significantly diminished after ischemla.Conclusion These findings demonstrate that contractile and diastolic function of affected artery was impaired after ischemia,a result that may contribute to ischemia-reperfusion injury by losing upstream cerebrovascular resistance and increasing perfusion on the microcirculation.     

miR-7沉默EGFR/PI3K通路逆转脑胶质瘤U251细胞的恶性表型

目的:探讨利用微RNA(microRNA-7,miR-7)靶向沉默表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)/磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol kinase-3,PI3K)通路途径逆转脑胶质瘤的恶性表型。方法:利用脂质体转染法将带有miR-7基因序列的表达质粒转入人脑胶质瘤细胞株U251中;采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)方法检测转染细胞中miR-7的表达水平;免疫细胞化学法和蛋白质印迹法检测EGFR、PI3K和AKT2蛋白的表达情况;绘制细胞生长曲线,FCM法检测细胞周期变化,Transwell小室法检测瘤细胞迁移能力,软琼脂克隆形成实验检测肿瘤细胞致瘤性。结果:RFQ-PCR结果显示,miR-7基因转染组细胞中miR-7水平明显高于对照组和无义序列组;蛋白质印迹法检测结果显示,转染组U251细胞中EGFR、PI3K和AKT2蛋白的水平较对照组均有明显降低(P<0.05);U251细胞增殖速度减慢,处于S期的细胞所占比例减少,细胞迁移及软琼脂克隆形成能力均有明显降低(P<0.05)。结论:转染miR-7可有效沉默胶质瘤U251细胞中EGFR/PI3K通路主要成员蛋白的表达,进而逆转其恶性表型,有望成为一种新的胶质瘤基因治疗方法。     

大鼠局灶性脑缺血后受累动脉调节功能受损

目的 研究脑缺血对受累动脉调节功能的影响,探讨缺血再灌注损伤发生的可能机制.方法 线栓法制作大鼠大脑中动脉梗死模型,2 h后取受累侧大脑中动脉游离血管段,测量压力和血管活性物质诱发的动脉直径变化,据此计算出膨胀性、肌源性张力及对5-羟色胺和乙酰胆碱的反应性,与对照组对比.结果 低压区,缺血动脉肌源性张力增加[40mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)时,19.3%±0.4%与10.0%±0.2%,t=20.568,P=0.000],直径缩小(F=9.572,P=0.009);高压区肌源性张力下降(120 mm Hg时,12.0%±0.2%与21.8%±0.4%,t=-23.575,P=0.000),动脉易膨胀,直径增大;生理压力区,肌源性反应变化不明显(80 mm Hg时,18.7%±0.4%与18.3%±0.3%,t=0.635,P=0.537).缺血后动脉对5-羟色胺和乙酰胆碱反应性下降.结论 脑缺血可引起受累动脉调节功能0下降,动脉再通后易出现缺血区的过度灌注,造成缺血再灌注损伤.     

Ommaya囊联合侧脑室外引流治疗高血压脑室出血

目的探讨高血压脑室出血的治疗方法并评价其临床疗效。方法对17例高血压脑室出血患者采用Ommaya囊联合侧脑室外引流并早期注入尿激酶治疗。结果存活14例，死亡3例。有效随访14例，随访时间3-6月，其中恢复良好4例，中残6例，重残3例，植物生存1例。结论Ommaya囊联合侧脑室外引流并早期注入尿激酶治疗高血压脑室出血具有操作简单、并发症相对较少的优点．是治疗高血压脑室出血的一种新的有效方法。