TitonX—100存在下的Lowry蛋白定量法

本文建立了一种ＴｒｉｔｏｎＸ－１００存在下的Ｌｏｗｒｙ蛋白定量法，可在Ｔｒｉｔｏｎ－１００存在下较简便、准确地测定蛋白质的含量。     

应用亲和层析分离纯化人小脑乙酰胆碱酯酶的初步研究

目的 分离纯化小脑乙酰胆碱酯酶（AChE)。材料和方法 采用ConA和B10亲和层析法纯化小人脑AChE，以纯化的人小脑AChE为免疫原，免疫6只BALB/c小鼠制备小鼠抗人小脑AChE抗血清，并检测其与电鳐AChE和人红细胞膜AChE的交叉免疫反应性。结果 SDS-PAGE还原状态下呈一条主带，相对分子质量为67000，比活性为373U/mg。结论 免疫亲和层析法操作简单，可快速纯化人小脑AChE。     

小儿白塞氏综合征1例治验

小儿白塞氏综合征１例治验湖北长阳县中医院（４４３５００）张兴梅【关键词】白塞氏综合征，狐惑《金匮要略》我院于１９９３年１２月诊治１例５岁白塞氏综合征患儿，现介绍如下。董某，女，５岁。其母代述：受凉后发热２天，伴咽部不适，食欲差，腹痛，大便干小便黄。出...     

基因治疗人类多发性硬化症的可能性研究:腺病毒转染CTLA-4Ig对动物实验性自身免疫性脑脊髓炎病理过程的抑制或阻断作用

背景实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)同人类的多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)的病理机制相类似,因此认识和阻断EAE的病理过程是攻克MS的关键.目的寻求一种可能抑制或阻断EAE病理过程,加速神经功能恢复进程的方法.设计随机对照的实验研究.单位解放军第三军医大学附属西南医院神经内科和烧伤研究所.材料实验在解放军第三军医大学动物实验室完成.实验材料豚鼠4只(雌雄不限,体质量300～400 g),Wistar大鼠40只(雌雄不限,体质量180～200 g).方法用所构建的CTLA-4Ig腺病毒通过侧脑室注射到Wistar大鼠EAE模型体内观察其疗效,用冷冻切片观察CTLA-4Ig在脑组织中的表达,观察发病情况、病理改变.主要观察指标①两组大鼠致敏后的发病天数、发病只数及潜伏期及神经功能评分情况.②光镜下观察两组大鼠病理学改变情况.结果发病情况生理盐水对照组大鼠于致敏后第10天开始发病.于第16天全部发病,平均发病天数为12.2 d,临床评分平均为3.1;腺病毒介导的CTLA-4Ig组于致敏后第14天开始发病,第18天共发病6只,平均发病天数为14.1 d,临床评分平均为2.4.病理结果侧脑室注射AdCTLA-4Ig后24,48,72 h取脑组织做冷冻切片在荧光显微镜下观察侧脑室周围和脊髓有荧光.在光镜下可见对照组大鼠的脑和脊髓组织中有大量炎性细胞浸润,炎性细胞聚集在血管周围呈现袖套样改变,髓鞘染色(Loyez染色)可见髓鞘脱失;腺病毒介导的CTLA-4Ig组的脑脊髓组织炎性细胞浸润明显减轻,形成的血管套样改变也减少,髓鞘脱失也减少.结论CTLA-4Ig可诱导T细胞失活化,有效地抑制细胞及体液免疫,能阻断以T细胞过度活化为主要原因的自身免疫性疾病EAE的病理过程,可以提高大鼠的神经功能评分,有效地改善神经功能症状.     

基于适配子的分子探针在肿瘤分子影像学中的应用

理想的分子影像探针应具有一定的特异性、敏感性、安全性。适配子是可与靶分子高特异性和高亲和力结合的单链 DNA 或 RNA 分子,具有靶分子广泛、分子小、易生产和修饰、免疫原性低、渗透性强等特点,是一种新型的分子影像探针。目前基于适配子的肿瘤分子影像学研究越来越多,为肿瘤的诊断和治疗提供了新的技术和工具。     

SELEX技术及其在肿瘤研究中的应用

配体指数级富集系统进化技术(SELEX)是一种很有发展前途的组合化学技术,它可筛选出针对靶分子的高特异性和高结合力的适配子.适配子可识别、结合特定靶分子或作为功能阻断物质或直接阻断疾病进程,所以适配子可应用于临床疾病的诊断和治疗.现综述SELEX技术及其在肿瘤研究中的应用前景.     

I型γ-分泌酶抑制剂对恶性胶质瘤细胞株增殖及凋亡的影响

目的 探讨I型γ-分泌酶抑制剂(GSI-I)对U87、U251胶质瘤细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用.方法 应用GSI-I作用于U87、U251胶质瘤细胞,通过MTT法观察GSI-I对上述两种细胞的增殖抑制作用,通过流式细胞仪检测GSI-I对该两种细胞细胞周期的影响及诱导凋亡的作用.结果RT-PCR及实时定量荧光RT-PCR结果显示,GSI-T可明显抑制胶质瘤细胞中Notch通路的活性,主要体现为Notch通路的靶基因Hes-1表达明显下调.MTT检测结果显示2.5μmol/L及以上浓度的GSI-I对U87及U251胶质瘤细胞有明显的增殖抑制作用.与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),且该抑制作用呈剂量依赖型增加.流式细胞检测结果显示GSI-I主要使U87胶质瘤细胞的细胞周期阻滞在G1期而抑制细胞增殖,对于U251胶质瘤细胞则主要通过诱导凋亡来抑制增殖.结论 GSI-I可明显抑制U87及U251胶质瘤细胞的增殖并诱导凋亡,为恶性胶质瘤的临床治疗提供了理论参考依据.     

核酸适配子在胶质瘤中的研究进展

核酸适配子是由指数级富集配体系统进化技术（SELEX）从寡核苷酸文库中筛选合成所得的一类核酸分子,它可特异结合靶分子,具有识别或抑制靶分子生物学活性的作用。针对胶质瘤的适配子是以胶质瘤细胞或已知的生物标志分子为靶标筛选得到的,它们可与纳米粒子、药物或分子探针相结合,用于胶质瘤的显像、靶向治疗和药物转运。     

靶向notch1的siRNA对U87-EGFRvⅢ胶质瘤细胞株凋亡和放射敏感度的影响

目的 探讨靶向notch1的siRNA对过表达EGFRvⅢ的U87胶质瘤细胞株U87-EGFRvⅢ凋亡和放射敏感度的影响。方法 利用脂质体转染合成的siRNA转染U87-EGFRvⅢ细胞。用RT-PCR和免疫印迹法来分别检测 notch1的蛋白和mRNA的表达水平;用AnnexinⅤ-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况;用平板集落形成实验检测转染后细胞的放射敏感度。结果 合成的notch1 siRNA可有效抑制notch1在mRNA和蛋白水平的表达（P<0.05）。转染notch1 siRNA作用后细胞凋亡率比对照组明显增加（P<0.05）。平板集落形成实验初步证明notch1 siRNA可提高U87-EGFRvⅢ细胞的放射敏感度。结论 下调notch1基因可促进U87-EGFRvⅢ细胞的凋亡和提高其放射敏感度,为研究notch1基因在肿瘤放疗中的作用及其靶向联合治疗胶质瘤提供基础。