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253.
目的 观察慢病毒载体转染豚鼠巩膜成纤维细胞的有效性及对细胞活性的影响.方法 转染组用慢病毒携带绿色荧光蛋白(lentiviral mediated green fluorescent protein,Lenti-GFP)转染豚鼠巩膜成纤维细胞,对照组加入空白培养液,转染组按最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)为50、100、200、400加入Lenti-GFP,转染2d、3d、4d、5d、6d和7d后,在倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况,流式细胞仪检测转染效率,MTT法检测病毒对细胞增殖的影响.结果 Lenti-GFP转染细胞后48 h可以看见绿色荧光;在同一MOI值下,随时间延长转染效率增高,第5天达到高峰;在MOI为400,转染5d时转染效率达82.86%;转染5d行MTT检测显示:MOI为50 ~400时,同一转染时间各组IOD值与对照组比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05).结论 慢病毒载体可以在体外稳定而有效地转染豚鼠巩膜成纤维细胞,且不影响细胞活性,是巩膜成纤维细胞理想的基因转染载体. 相似文献
254.
背景:在组织工程研究中,最常用的细胞分离方法是胰蛋白酶消化,但是这种方法可能破环细胞外基质蛋白造成细胞活性降低,因此研制一种避免酶消化的细胞分离技术将有重要的意义。
目的:利用聚N-异丙基丙烯酰胺能够随温度变化疏水性的特性,建立一种基于温度敏感性控制细胞分离技术。
方法:配制质量浓度为55%的异丙基丙烯酰胺异丙醇溶液,均匀涂抹在聚苯乙烯培养皿表面,然后通过电子束照射的方法接枝于培养皿表面。用原子力显微镜观察接枝前后聚苯乙烯培养皿表面微观结构,静滴法测量不同温度下接枝前后聚苯乙烯培养皿表面的水接触角,聚N-异丙基丙烯酰胺接枝后培养皿在不同温度下细胞分离能力变化。
结果与结论:原子力显微镜观察发现聚苯乙烯培养皿表面上形成薄层致密的聚N-异丙基丙烯酰胺聚合物;在37 ℃时聚N-异丙基丙烯酰胺接枝培养皿与未接枝培养皿水接触角差异无显著性意义,在20 ℃时聚N-异丙基丙烯酰胺接枝培养皿的水接触角明显低于未接枝培养皿;在37 ℃时细胞能正常的在温度敏感性培养皿上贴壁生长,在20 ℃时大量细胞从培养皿底面脱离悬浮在培养基中。结果说明聚N-异丙基丙烯酰胺接枝培养皿表面可以利用温度的改变控制细胞的分离,此技术有望在组织工程中发挥重要的作用。
关键词:组织工程;细胞分离;聚N-异丙基丙烯酰胺;温度敏感性;水接触角;疏水性
doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.03.025 相似文献
255.
Vero及Vero-dst细胞对犬瘟热病毒敏感性比较 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 为了更好地分离犬瘟热病毒(CDV)并确诊犬瘟热,本实验比较了Vero及Vero-dst细胞对此病毒的敏感性.方法 将CDV标准毒株Snyder Hill株及临床犬瘟热阳性犬组织匀浆分别接种Vero及Vero-dst两种细胞,通过观察细胞病变、检测病毒滴度(TCID50),并通过RT-PCR法进行比较,分析两种细胞对CDV的敏感性.结果 接种病毒后Vero细胞盲传5代始终未见细胞病变,而Vero-dst细胞12 h出现了明显的合胞样细胞病变,且RT-PCR扩增出了CDV基因特异性片段.结论 Vero-dst细胞对CDV表现了良好的敏感性,是体外分离培养CDV的一个有效细胞系.而所本实验中使用的Vero细胞并不适于CDV的分离与培养.另外,本实验利用Vero-dst细胞从临床犬瘟热阳性病例中成功分离到了野毒株,并确定其毒力较标准毒株毒力强,可用于进一步的研究. 相似文献
256.
目的:研究驱白巴布期对正常小鼠全血铜、锌含量的影响,同时,建立全血中铜、锌元素的含量测定方法。方法:采用血清药化给药方式给予小鼠灌胃7 d,取血,FAAS法测定全血中铜、锌含量。结果:实验组与对照组小鼠全血铜水平有显著性差异(P<0.05),锌水平无显著性差异(P>0.05)。结论:驱白巴布期对正常小鼠全血铜含量有影响,锌含量无影响,FAAS法作为全血中铜、锌含量测定的方法简便、快速、准确。 相似文献
257.
目的:探讨肿瘤相关抗原(TAAs)P53、Survivin、IMP1、CyclinD1、C-myc及CyclinE自身抗体联合CA125检测对卵巢癌早期诊断的价值。方法:应用间接ELISA法检测78例原发性上皮性卵巢癌、60例卵巢良性肿瘤、100例正常对照血清中以上6种TAAs抗体,电化学发光法测定血清CA125含量。结果:卵巢癌患者血清中TAAs抗体的阳性率高于正常对照组(P均<0.05),每种TAA单独检测的阳性率为11.5%~35.9%;对6种TAAs抗体进行组合,随着联合抗体数目的增加,检测阳性率随之增加,6种TAAs抗体联合检测的阳性率为55.1%;6种TAAs抗体联合CA125检测卵巢癌的灵敏度为96.2%,特异度为76.0%,阳性预测值为75.8%,阴性预测值为96.2%,阳性似然比为6.25,阴性似然比为0.14;6种TAAs抗体联合CA125检测早期卵巢癌的阳性率为89.3%,明显高于单独应用CA125的检测阳性率(χ2=4.909,P=0.027)。结论:利用6种TAAs抗体组合检测卵巢癌具有较高的真实性,可能为卵巢癌诊断提供一定的参考价值;6种TAAs抗体联合CA125检测可明显提高卵巢癌的检测灵敏度,特别是对早期卵巢癌的检测可能具有重要价值。 相似文献
258.
目的:利用快速识别整合多元化文献证据的概况性评价方法,分析近年来有关精神分裂症言语流畅性任务功能近红外光谱研究。方法:检索PubMed、Web Of Science、中国知网、维普、万方等数据库2014年1月-2021年6月精神分裂症言语流畅性任务的功能近红外光谱研究报告。依据概况性评价指南和清单制作综述。结果:纳入23篇文献。70%研究采用字母流畅性任务,5项研究探索精神分裂症生物学标记物分类方法。前额叶亚区与临床变量相关性结果不一致。结论:言语流畅任务下功能近红外光谱研究显示前额叶功能异常可能是精神分裂症的候选生物学标志物。 相似文献
259.
260.
目的 优选化湿败毒颗粒(Huashi Baidu Granules,HBG)的喷雾干燥工艺。方法 利用Box-Behnken设计-响应面法(Box-Behnken design-response surface method,BBD-RSM)设计实验,以药液相对密度、进风温度及进料速率为考察因素,得粉率、芍药苷、甘草素、大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖苷、甘草酸、和厚朴酚和厚朴酚的转移率的综合评分为评价指标,优选最佳喷雾干燥工艺。结果 HBG的最佳喷雾干燥工艺为药液相对密度1.02,进风温度175℃,进料速率50%,验证试验的综合评分分别为92.57、92.50、91.96,各质量指标的RSD均小于3.0%。结论 该方法优选的喷雾干燥工艺稳定可行,可为HBG的制剂工艺提供参考。 相似文献