袖式肺叶切除术联合肺动脉成形术治疗中央型支气管肺癌

目的 研究袖式肺叶切除术联合肺动脉成形术治疗肺癌的疗效.方法 回顾性总结15例行袖式肺叶切除联合肺动脉成形术支气管肺癌患者临床资料及手术方法.结果 15例患者住院期间无吻合口出血、瘘发生,未发生肺不张、肺部感染等并发症,均顺利痊愈出院.术后随访1年,患者均生存.结论 对于肿瘤侵犯肺动脉的中央型肺癌患者,采用肺叶袖式切除联合肺动脉成形术,既可较彻底切除肿瘤组织,又最大限度地保留肺功能,扩大了手术适应证,疗效满意.     

低氧反应元件对低氧复氧状态下心肌细胞转染人血管内皮生长因子165基因表达的调控作用

目的研究9拷贝低氧反应元件（HRE）对低氧、复氧心肌细胞转染人血管内皮生长因子（hVEGF165）基因表达的调控作用。方法分离新生SD大鼠心肌细胞进行培养，将在HEK293T细胞进行包装后获得的腺相关病毒转染培养的心肌细胞。心肌细胞分为8组，采用无血清培养基，分别在低氧（氧浓度5％）、正常氧（氧浓度21％）条件进行培养．取低氧／复氧不同时段的心肌细胞或培养液，采用细胞免疫荧光法、ELISA法分别测定心肌细胞及培养液中hVEGF165蛋白表达情况；逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）法测定心肌细胞hvEGF165 mRNA的表达。结果病毒转染率约为87％；转基因低氧1组（A组）、2组（B组）及复氧1组（E组）培养液中hVEGF165蛋白含量显著升高（P〈0．01），细胞免疫荧光hVEGF165蛋白染色呈阳性；RT-PCR结果亦显示，转基因低氧1组（A组）、2组（B组）及复氧1组（E组）可见484bp目的条带。结论在低氧状态下，9拷贝HRE作为氧敏感调控开关，可促使心肌细胞转染的hVEGF165基因高度表达，而在复氧（正常氧浓度）状态下，hVEGF165因的表达即行中止。     

心脏不停跳心内直视手术的应用

我院自 1997年 6月至 2 0 0 0年 8月 ,采用心脏不停跳心内直视手术进行了 15 8例心脏直视手术 ,效果良好 ,现报道如下。临床资料一、对象　 15 8例中 ,男 98例 ,女 6 0例 ;年龄 3～ 5 8岁。术前经心脏超声明确诊断 ,常规检查无手术禁忌。临床诊断为 :室间隔缺损 96例 ,其中合并肺动脉高压 8例 ;继发孔房缺 37例 ;右室流出道及肺动脉瓣狭窄 10例 ;法乐氏三联症 10例 ;房缺合并二尖瓣关闭不全 1例 ;室缺合并肺动脉狭窄 3例 ;二尖瓣狭窄合并关闭不全 1例。二、方法　手术均采用体外循环辅助转流 ,在心脏不停跳状态下完成手术。采用静脉复合麻醉…     

缺血预处理对兔未成熟心肌缺血/再灌注损伤后心肌细胞形态及细胞内钙超载的影响

目的 探讨缺血预处理对兔未成熟心肌缺血再灌注后心肌细胞形态及细胞内钙超载的影响。方法 3～4周幼兔24只,随机分为对照组(Con)、缺血预处理1组(IPC 1)、缺血预处理2组(IPC 2)、缺血预处理3组(IPC 3)。对照组心脏采用95％O_2+5％CO_2混合气体饱和的K—H液灌注20分钟后续灌39分钟,而IPC1、IPC2和IPC3三组心脏在上述K-H液灌注20分钟后,分别于缺血前给予1、2、3次的IPC,每个IPC由5分钟的缺血和5分钟的再灌注组成。各组心脏均缺血45分钟,再灌注30分钟。实验结束时取左心室前壁心肌标本分别用电镜观察心肌细胞形态及细胞内钙超载;并测定组织中AIP及MDA含量和SOD及Ca~92+)—ATP酶的活性。结果 缺血预处理可以明显减轻兔未成熟心肌缺血再灌注损伤,减轻再灌注后心肌细胞形态结构的改变和钙离子超载,以2次预处理组的效果最为显著。研究显示,IPC 1、IPC 2及IPC 3组再灌注后心肌组织中的ATP含量(μg·100mg~(-1))分别为191.8±75.1、281.0±53.1及207.6±69.8,显著高于对照组的(128±26.3)ug·100mg~(-1)(P<0.05)。此外,IPC 2组MDA含量显著低于Con组,而IPC 2和IPC 3组的Ca~(2+)—ATP酶活性均显著高于Con组。结论 缺血预处理可以减轻兔未成熟心肌缺血再灌注后形态学的改变及细胞内钙超载,并与IPC的方式有关。其机制     

标准法与双腔静脉法同种异体原位心脏移植术的初步体会

目的 比较采用标准法与双腔静脉法行同种异体原位心脏移植术的手术方法及术后处理的不同。方法 总结分别采用标准法与双腔静脉法对2例终末期心肌病患者行同种异体原位心脏移植术并分析术后近期处理的特点。结果 2例患者术体外循环时间相同，均安全度过围术期。病例1采用标准法行同种异体原位心脏移植术，术后了出现明显的右心功能不全与心律失常。病例2采用双腔静脉法行同种异体原位心脏移植术，术后恢复顺利。2例患者术后均巳生存9个月。结论 与标准法相比双腔静脉法在术后较少发生右心功能不全和心律失常，且术后早期恢复顺利。     

PEDF对大鼠缺血心脏功能的影响及相关机制的研究

目的研究色素上皮衍生因子（pigmentepithelium—derivedfactor,PEDF）基因转染对大鼠缺血心脏功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法采用冠状动脉左前降支结扎法建立大鼠心肌梗死模型,将72只Sprague—Dawley大鼠随即分为6组（每组12只）：正常（Normal）组,转染PEDF—siRNA～LV（Infarct＋siPEDF）组,转染PEDF—LV（Infarct＋PEDF）组,载体对照（Infarct＋vector）组,溶剂对照（Infarct＋solvent）组,单纯梗死（Infarct）组。病毒转染4周后,超声心动图检测大鼠心脏功能,取各组心肌组织检测心肌局部炎症反应、心肌细胞和内皮细胞凋亡指数。结果超声心动图检测显示：模型建立4周时,与Infarct＋vector组、Infarct＋solvent组及Infarct组相比,Infarct＋siPEDF组左心室射血分数（1eftventricularejectionfraction,LVEF）显著降低,Infarct＋PEDF组LVEF显著升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。苏木精～伊红（H—E）染色检测局部炎症反应显示：与Infarct十vector组、Infarct＋solvent组及Infarct组相比,Infarct＋siPEDF组炎症细胞浸润显著增多,TNF—1α及TNFR1表达量显著增加,差异有统计学意义（P〈0．05）;Infarct＋PEDF组炎症细胞浸润显著减少,TNF-α表达量显著减少,差异有统计学意义（P〈0．05）,而TNFRl表达无显著变化。末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法（terminaldexynucleotidyltransferase（TdT）-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL）检测细胞凋亡显示：与各对照组相比,Infarct＋siPEDF组内皮细胞凋亡显著减少,心肌细胞凋亡显著增加;Infarct＋PEDF组内皮细胞凋亡数量显著增加,而心肌细胞凋亡数量显著减少,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论PEDF可通过降低局部炎症和保护心肌细胞而改善缺血心脏功能。     

厄贝沙坦联合氢氯噻嗪对原发性高血压患者心室重塑及脑动脉血流动力学的影响研究

目的:探讨厄贝沙坦联合氢氯噻嗪对原发性高血压患者心室重塑及脑动脉血流动力学的影响。方法:将2010年7月～2012年4月采用厄贝沙坦治疗的29例原发性高血压患者选为对照组,而将同一时期以厄贝沙坦联合氢氯噻嗪治疗的29例患者选为观察组,后将两组患者治疗前及治疗后4周、8周的心室重塑及脑动脉血流动力学指标进行比较。结果:治疗后4周及8周观察组的心室重塑指标中的IVS、LVMI、IVPW及LVESV均低于对照组,而脑动脉血流动力学指标中的Vs、Vd、Vm则均高于对照组,RI低于对照组,P均<0.05,均有显著性差异。结论:厄贝沙坦联合氢氯噻嗪对原发性高血压患者心室重塑及脑动脉血流动力学的影响较大。     

诱导心脏肌成纤维细胞向心肌样细胞转分化的miRNA

背景：微小RNA(miRNA)是一类非编码小分子RNA,miRNA参与调控基因表达,在促进前体细胞增殖与分化中发挥了重要的作用。miRNA是否可促进前体细胞向心肌细胞的分化则鲜见报道。 目的：验证转入特定miRNA(miRNA-1、miRNA-499)诱导新生小鼠心脏肌成纤维细胞转分化为心肌样细胞的可行性。 方法：体外培养新生小鼠心脏成纤维细胞,常氧培养传代至P2;37 ℃低氧(体积分数3%O2)培养48 h;免疫荧光染色检测心脏成纤维细胞特异性标记物波形蛋白的表达,免疫荧光染色、流式细胞技术检测心脏成纤维细胞向心脏肌成纤维细胞表型转化的标记物α-平滑肌激动蛋白的表达。实验分为4组：miRNA-1转染组、miRNA-499转染组、miRNA-1/miRNA-499共转染组及空白对照组,采用miRNA芯片检测心脏肌成纤维细胞与心肌细胞中微小RNA的表达差异;real-time qPCR方法验证芯片检测结果。 结果与结论：心脏肌成纤维细胞中过表达miR-1、miR-499后,心脏发育不同阶段特异性因子发生不同程度的表达变化,与空白对照组相比,其余3组GATA4、Tbx5、Mef-2c、α-MHC表达明显增高,Mesp1、Isl1表达均无显著变化。结果表明,特定miRNAs可诱导心脏肌成纤维细胞表达心肌细胞特异性性标志物,具备诱导心脏肌成纤维细胞向心肌细胞直接转分化的潜力。     

低氧诱导因子在兔慢性缺血心肌中的表达趋势

目的探讨低氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）在兔缺血心肌的表达趋势。方法建立兔缺血心肌动物模型,于冠状动脉结扎前及术后第2、4、6、8、10、12周取各组动物缺血区心肌组织,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应（Q-RT-PCR）法测定心梗区HIF-1αmRNΑ的表达;应用免疫组化及West-ern Blot法测定HIF-1α蛋白表达。结果与非缺血组相比,兔心肌缺血早期HIF-1α表达水平显著增高（P〈0.01）,HIF-1αmRNA及蛋白分别于第2及第4周达到高峰,持续约24周后,于第8周再次升高,并随之开始持续缓慢降低,但在缺血后第12周仍高于正常心肌表达量。结论HIF-1α的表达与心肌梗死区氧供关系密切,在心肌缺血早期,高表达HIF-1α参与了维持氧稳态及对低氧代谢的适应,在慢性缺氧期,随着HIF-1α调控多种下游靶基因表达,增加组织氧供使其表达渐显著降低。     

低氧反应元件调控缺血心肌转染hVEGF165基因表达对新生血管的影响

目的探讨动物整体水平下低氧反应元件（HRE）调控缺血心肌转染hVEGF165基因表达对促生血管的影响。方法建立兔心肌缺血动物模型,实验分为转基因组、缺血对照组、载体对照组和假手术组。取缺血区心肌组织,检测心肌组织HIF-1α和hVEGF165表达,应用CD31及α-SMA免疫组化染色测定缺血心肌新生血管密度变化。结果心肌缺血早期,伴随内源性HIF-1α表达增加,hVEGF165mRNA及蛋白表达相继升高,缺血4～6周至高峰（P〈0.01）,缺血12周,hVEGF165表达下调至缺血前水平。缺血12周,转基因组CD31（＋）血管密度显著高于缺血对照组（P〈0.01）;但是,与缺血前相比,缺血12周,转基因组α-SMA（＋）血管密度显著低于缺血前水平（P〈0.01）。结论HIF-1α-HRE对缺血心肌转染hVEGF165表达发挥了有效的正相调控作用,有效地促进缺血心肌毛细血管生成。但hVEGF165作为促血管生成早期调节因子,其促生血管的结构尚不完整。