表达CtxB的非抗生素标记载体的构建

目的 构建用于表达CtxB的非抗生素基因作为选择标记的载体。方法 用PCR从质粒pMT999中,扩增获得2．9kb的汞抗性基因,与pBR322的复制起始区（ori)相连,得到重组质粒pBRH02。然后将含有β-内酰胺酶启动子的CtxB基因插入pBRH02中,构建表达质粒pBRC09。结果 pBRC09经转化大肠杆菌、痢疾杆菌,用GM1－ELISA均检测到CtxB在上述菌株中的有效表达。结论 利用汞抗性基因和pBR322的复制起始区,成功地构建成以非抗生素为选择标记的表达CtxB的重组质粒。     

颈椎脊神经后支射频热凝术有效性的随机对照研究

目的:通过随机对照研究,评价射频热凝术治疗颈椎脊神经后支诱发慢性颈肩痛的有效性.方法:自2005年12月至2008年12月共127名患者纳入研究,所有病人均经诊断性颈椎脊神经后支阻滞有效,明确为颈椎脊神经后支诱发慢性颈肩痛.随后随机分为两组,A组采用DSA影像引导下脊神经后支射频热凝术治疗,B组采用口服药物保守治疗,随访期2年.利用视觉模拟评分法(Visual Analog Scores,VAS)进行治疗前后疗效评定.以VAS评分小于治疗前的50％视为优良疗效,反之视为疗效不佳.利用Kaplan-Meier生存曲线与Log-Rank检验进行两组疗效对比.记录手术并发症与用药副作用.结果:A组VAS评分回到术前50％的平均时间是217天,B组为27夭(P＜0.0l).在第27周(治疗后200天),A组36名患者完全无痛,B组为1名.A组术后疗效优良率显著高于B组(P＜0.01).B组3例病人出现胃部不适,纳差,经对症治疗后消失.A组9例病人术后出现神经支配区域的皮肤麻木,无感染及脊神经前支、椎动脉损伤等并发症.结论:对于颈椎脊神经后支诱发慢性颈肩痛,颈椎脊神经后支射频热凝术相比保守治疗,能够更有效的长期缓解疼痛,且操作安全,副作用很少.     

颈2背根神经节脉冲射频术治疗颈源性头痛的疗效

本院2007年6月-2009年6月行颈2背根神经节脉冲射频术的颈源性头痛患者74例,年龄26～63岁,病程3个月-21年.术后随访18个月,行疼痛评分、生活质量参数(日常活动干扰参数、情绪干扰参数、睡眠干扰参数)评估,记录并发症发生情况和术后12、18月内头痛的复发情况.失访22例患者.与术前1 d时比较,术后VAS评分、日常活动干扰参数、情绪干扰参数、睡眠干扰参数降低(P＜0.05或0.01).部分患者在术后当晚出现一过性的枕神经支配区域不适,24 h内缓解.无颈髓损伤、椎动脉损伤和感染等并发症发生.术后12、18月内头痛复发率分别为19%、31%.

Abstract：

Seventy-four patients aged 26-63 yr who had suffered cervicogenic headache for 3 months-21 yr were treated with puked radiofrequency applied to C2 dorsal root ganglion, which is located in the middle of the posterior side of lateral atlantoaxial joint. A trochar was introduced percutaneously under the guidance of X-ray aiming at the target point. As it was inserted through the deep fascia, the stylet was withdrawn and a 10 cm long 22 gauge curved blunt electrode was inserted into the trochar and advanced until the patients felt radiating pain from the point of puncture to occiput. Lateral radiograph was obtained to verify the placement of electrode. The tip of the electrode was usually located in front of spinal canal at the atlantoaxial joint level. Sensory stimulation was performed with 50 Hz and 0.1-0.5 V and the patients could feel radiating pain at occiput. Motor stimulation was performed with 2 Hz and 0.4-1.0 V and regular pulsation of the patient's muscle of occiput could occur. Pulsed radiofrequency was applied at 42 ℃7 for 240 s and was performed twice on each side. VAS scores and disturbances of daily activity, mood and sleep were recorded before operation and at 1 week and 1, 3, 6, 12 and 18 months after pulsed radiofrequency treatment. Complications and recurrence within 12 and 18 months were recorded. Follow-up was lost in 22 patients. VAS scores and disturbances of daily activity, mood and sleep significantly decreased after procedure. All of the patients responded without complications like infection, spinal cord and vertebral artery injury. Some patients had transient occipital neuralgia which was usually relieved within 24 h. The recurrence rate in 12 and 18 months after operation was 19% and 31% respectively.     

白内障手术患者心理干预血压

目的探讨心理干预对白内障患者围手术期血压稳定性的效果观察。方法将358例白内障手术患者随机分为两组,干预组179例,对照组179例,两组均进行常规手术治疗和护理。干预组在此基础上进行心理干预,比较两组患者手术中血压。结果干预组血压与对照组比较差异有显著性P〈0.01。结论对白内障手术患者进行心理干预,可以减轻患者的不良心理反应,提高围手术期血压的稳定性。     

人工全踝关节置换的早中期疗效分析

[目的]探索采用STAR非限制活动型假体进行全踝关节置换术治疗终末期踝关节炎的早中期临床效果。[方法]1999年3月-2004年5月，共实施STAR假体全踝关节置换术11例，男7例，女4例；年龄27—68岁，平均53．5岁；创伤性关节炎7例，骨性关节炎3例，类风湿性关节炎1例；病程9—60个月。按Kofoed踝关节评分系统对患者术前、术后疼痛程度、关节功能、活动度进行综合评分。[结果]随访资料完备者8例，随访时间14—76个月，平均38个月。8例患者术前Kofoed评分：6—48分，平均29分；术后Kofoed评分：58—95分，平均80分。术前踝关节疼痛评分：0一15分，平均7分；术后疼痛评分：35—50分，平均48分。1例患者术中内踝劈裂，行可吸收螺钉内固定后完成假体置换；1例患者切口延迟愈合。随访时摄x线片均未见假体松动或下沉。[结论]STAR非限制活动负重型假体全踝置换术可有效缓解踝关节疼痛，改善踝关节活动度，并矫正踝关节畸形，是治疗终末期踝关节病变的有效手段。     

对退行性腰椎关节源性腰痛行脊神经后支标准射频手术治疗的随机对照研究

目的:通过随机对照研究,评价腰脊神经后支标准射频术治疗退行性腰椎关节源性腰痛的安全性和有效性.方法:选取2008年6月至2010年6月间广东医学院附属南山医院患者96名纳入研究,所有患者均经诊断性腰椎脊神经后支阻滞有效,明确为腰椎关节源性腰痛.随后随机分为2组,A组采用X线影像引导下腰脊神经后支射频热凝术治疗,B组采用口服药物保守治疗,随访期2年.利用视觉模拟评分法(visual analogue scores,VAS)进行治疗前后疗效评定.以VAS评分小于治疗前的50％视为优良疗效,反之视为疗效不佳.利用Kaplan-Meier生存曲线与Log-Rank检验进行2组疗效对比.记录手术并发症与用药不良发应.结果:A组VAS评分回到术前50％的平均时间是196 d,B组为35d (P＜0.01).在第27周(治疗后200 d),A组32名患者疗效评价仍为优良,B组为1名.A组疗效优良率显著高于B组(P＜0.01).B组15例患者出现胃部不适,纳差,经对症治疗后消失.A组2例患者术后出现神经支配区域的皮肤麻木,无感染及脊神经前支损伤等并发症.结论:对于退行性腰椎小关节源性腰痛,腰椎脊神经后支射频热凝术相比保守治疗,能够更有效的长期缓解疼痛,且操作安全,不良反应很少.     

儿童肱骨远端全骺分离的误诊原因分析

目的：提高对儿童肱骨远端全骺分离的认识，减少误诊。方法：回顾性分析了我院1985－2001年收治的22例误诊患儿的临床资料及随访结果。年龄9个月－7岁（3．5岁）。按Delee分类：A型5例；B型9例；C型8例，病程24h以内10例，1－7d7例，1周以上5例，最长35d。结果：切开复位内固定治疗13例，闭合复合，外固定治疗7例，尺骨鹰嘴牵引2例，结果随访1－16年14例外观和功能恢复满意。5例有不同程度的肘内翻畸形（3例已行截骨矫形），3例肱骨远端明显畸形。关节活动明显受限。结论：此病误诊率较高。仔细分清幼儿及儿童肱骨小头骨化中心和桡骨的关系是正确诊断的关键。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂与骨肉瘤

骨肉瘤是儿童和青少年中最常见的恶性骨肿瘤，因生长较快和早期发生远处转移尤其是肺转移而预后不良。多种实体肿瘤中基质金属蛋白酶（MMPs）表达增强，MMPs／TIMPs平衡紊乱有助于加强蛋白水解活性，在骨肉瘤中起重要作用。     

大段同种异体骨移植在骨肿瘤性骨缺损修复中的应用

目的探讨大段深冻同种异体骨及异体半关节移植在治疗四肢骨肿瘤切除后大段骨缺损中的疗效。方法1993年6月～2003年12月应用大段深冻同种异体骨及异体半关节移植治疗四肢骨肿瘤切除后大段骨缺损患者53例，年龄13～58岁，平均36，5岁，其中大段骨移植45例，异体半关节移植8例，异体骨移植长度9～25cm，平均13cm。钢板固定23例，动力髋（或动力髁）固定12例，交锁髓内钉固定12例，普通髓内钉固定6例。结果随访资料完整者48例，术后随访6～132个月，平均38个月，异体骨愈合45例，不愈合3例。主要并发症：复发3例，骨不连3例，感染2例（后治愈），骨折2例，内固定失败1例。关节功能按Mankin标准评定；优18例，良15例，中9例，差6例。结论大段深冻同种异体骨及异体半关节是四肢骨肿瘤切除后大段骨缺损较为理想的修复材料。     

pIRES-p16ink4a-hRb1载体的构建及其对骨肉瘤细胞周期的调控

目的 应用内部核糖体插入位点（IRES）序列构建单启动子双顺反子穿梭载体pIRES-p16ink4a—hRb1并鉴定，观察其导入骨肉瘤细胞后对细胞周期的调控。方法 利用基因工程技术，将p16ink4a与hRb1全长cDNA编码区依次亚克隆至pIRES载体中，质粒构建通过PCR、双酶切与测序鉴定；脂质体转染至p161nk4a表达缺失、hRb1表达阳性的骨肉瘤细胞株MG63，G418筛选获得抗性克隆，通过RT-PCR和Western blot法分析外源基因表达；流式细胞术分析细胞周期特异性和细胞凋亡率，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法与细胞生长曲线观察细胞增殖情况。结果 成功构建出pIRES-p16ink4a—hRb1载体，外源基因在靶细胞mRNA和蛋白水平分别有独立表达。与对照组比较，双基因导人组细胞生长抑制率显著上升，细胞周期显著阻滞在G1期，且细胞凋亡率极显著升高。结论 pIRES-p16ink4a—hRb1双顺反子穿梭载体的构建与真核细胞导入、目的基因表达成功，为进一步研究p16ink4a与hRb1相互关系在细胞周期调控中的作用奠定了基础。