药学专业药理学实验课程重建与探索

药理学是医药专业重要的支柱课程,其实验教学是学生培养动手、应用和创新能力,提高综合素质的重要一环。为适应教学要求,结合培养目标,从整改实验内容、编写配套实验教材以及建立集体备课制度、注重教师团队培训、加强实验室建设等方面,重建药理学实验课程,构建新的药理学实验体系。     

不同剂量的环磷酰胺对大鼠骨药理作用探讨

目的　观察不同剂量的环磷酰胺对大鼠骨代谢的影响 ,并探讨用环磷酰胺建立大鼠骨质疏松的动物模型。方法　用三种不同剂量的环磷酰胺分别按每天 1 5mg·kg-1,4 5mg·kg-1,13 5mg·kg-1,灌胃给予♂大白鼠 ,连续 15d ,另设生理盐水正常对照组。各组实验结束后用原子吸收分光光度法和羟脯氨酸法测定该模型大鼠肱骨的骨钙及骨羟脯氨酸含量。同时观察对照组和用药组的体重、白细胞数量以及胸腺、肝、脾、肾、肾上腺和睾丸重量 ,并进行比较。结果　 3种不同剂量的环磷酰胺组大鼠与正常对照组比较 ,大鼠的体重、血白细胞数量、重要的免疫器官等的变化与环磷酰胺的剂量有量效关系 ,随着环磷酰胺的剂量增加而药理作用增强 ,免疫抑制作用增大 ,毒性也增加。对骨代谢的影响观察 ,高、中、低 3种剂量的环磷酰胺均可使大鼠骨钙总量减少和骨钙 /骨干重比值明显降低 ,低剂量的环磷酰胺可使骨羟脯氨酸含量增高 ,中剂量的环磷酰胺可使骨羟脯氨酸含量降低 ,而高剂量环磷酰胺对骨羟脯氨酸没有明显影响。结论　环磷酰胺有促进骨钙释放 ,抑制骨钙沉积的作用 ,中剂量的环磷酰胺 (4 5mg·kg-1)可致大鼠胸腺萎缩 ,可造成大鼠骨矿物质和骨基质等比例的减少的骨质疏松模型。     

大鼠椎骨生物力学与骨组织形态计量学的灰色关联分析

目的:运用灰色关联分析,探讨大鼠椎骨生物力学与骨组织形态计量学之间的相关关系.方法:10.5月龄未交配的雌性SD大鼠48只,随机分为6组:① 10.5月龄基础对照组(Basal);② 13月龄假手术组(Sham-1);③ 13月龄去卵巢10周组(OVX-1);④ 16月龄假手术组(Sham-2);⑤ 16月龄去卵巢22...     

淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠骨骼的影响

目的:观察淫羊藿总黄酮(EF)对去卵巢大鼠骨骼的影响。方法:4.5月龄雌性SD大鼠40只,随机分为假手术组、去卵巢组、己烯雌酚(DES)组和淫羊藿总黄酮组。己烯雌酚组和淫羊藿总黄酮组大鼠行双侧卵巢去除术后,分别灌喂DES22.5μg·kg-1·d-1、EF300mg·kg-1·d-1,持续90d。用骨组织形态计量学等方法测量胫骨上段和第5腰椎松质骨及胫骨中段皮质骨的动态参数和静态参数,同时测量股骨钙、磷及羟脯氨酸含量,测量子宫湿重及子宫内膜厚度。结果:淫羊藿总黄酮可使去卵巢大鼠股骨钙、磷含量增加,胫骨上段的骨量有增加的趋势,但无统计学意义,腰椎和胫骨中段皮质骨的变化均不明显,子宫湿重及子宫内膜厚度也无明显变化。结论:淫羊藿总黄酮能有效预防去卵巢大鼠的股骨丢失,但不能有效预防胫骨上段和腰椎松质骨的丢失,对子宫没有刺激作用。     

半边旗有效成分及抗肿瘤活性研究

 目的:半边旗的植化研究及其有效部位和有效成分的杭种瘤活性研究。方法:半边旗乙醇提取物上活性炭柱，乙醇洗脱液减压浓缩得粗提物(C)，甲醉-氛仿(2:1)洗脱液浓缩后以硅胶柱层析分离，得到一个倍半萜(B)，两个二萜(4F,SF)。 B,4F,SF的结构经光谱鉴定，尤其是用二维NMR确证了空问结构。以台盼蓝染色作活细胞计数，算出药物对细胞的生长抑制率，IC₅₀按改良Karber公式计算。结果:分离得到三个化合物，确定了结构。以HL-60细胞为筛选模型，结果表明:粗提物(C)、化合物SF明显抑制HL-60细胞增值。结论:药理实验表明，粗提物的杭种瘤活性明显高于5F,预示粗提物中仍有高活性化合物，值得进一步研究。     

补骨胶囊与羟乙磷酸钠比较对去睾丸大鼠骨代谢的影响

目的通过骨组织形态计量学方法观察和比较中药补骨胶囊与西药羟乙膦酸钠对去睾丸(ORX)大鼠骨代谢的影响。方法40只3月半龄SD雄性大鼠,随机分成年龄对照组、ORX组、ORX分别加羟乙膦酸钠和补骨胶囊组。前两组每日生理盐水,羟乙膦酸钠组药物按36mg/kg.d,补骨胶囊用药组按5mL/kg.d(330g/kg),共灌胃90d。实验结束,取胫骨近心端进行不脱钙骨制片进行骨组织形态计量学分析。结果ORX组骨小梁面积百分率(%Tb.Ar)比对照组降低(-50.7%,P<0.05),代表骨形成和骨吸收的参数值均显著增加。与ORX组相比,羟乙膦酸钠组%Tb.Ar增加( 86.1%,P<0.05),补骨胶囊组%Tb.Ar增加( 54.0%,P<0.05),代表骨形成和骨吸收的参数值均降低,两组间差异无显著性。结论羟乙膦酸钠和补骨胶囊均能防止ORX大鼠造成的骨量丢失,两者的效果相当,选用中药副作用小。     

骨髓基质干细胞成脂分化的调控及其对骨质疏松的影响

研究发现随着年龄的增长和绝经期后骨质疏松,骨髓腔内的脂肪细胞逐渐增多,取代了成骨细胞,因此抑制骨髓基质干细胞成脂分化是目前治疗骨质疏松的新途径。应用各种成脂诱导剂建立体外定向诱导骨髓基质干细胞成脂分化模型是研究新途径的基础。除了通过光学显微镜观察成脂分化的能力,还可运用分子生物学的方法定性、定量检测成脂分化的程度。过氧化物酶增殖子激活受体(PPARγ)是脂肪细胞的分化过程中起关键性作用的调节因子,组蛋白去乙酰化酶(SIRT1)被激活后能抑制PPARγ的表达,减少脂肪细胞的生成,起到预防和治疗骨质疏松的作用。笔者就以上方面和对减少骨髓脂肪分化的策略作了综述。     

药物调控骨髓基质细胞成骨分化与骨质疏松症治疗的方向

目的：骨髓基质细胞向成骨细胞方向分化的潜能与骨质疏松密切相关，据此，探讨药物通过调控骨髓基质细胞分化方向从而治疗骨质疏松症的前景。资料来源：应用计算机检索Medline1985—01／2005—01期间的与药物调控骨髓基质细胞向成骨方向分化作用相关的文献，检索词“marrow stromal cells，osteoblast”，或“mesenchymal stem cells，osteoblast”，并限定文献语种为“English”。同时检索中国期刊网全文数据库、万方数据库1990—01／2005-01期间的药物调控骨髓基质细胞向成骨方向分化作用相关的文献，检索词“骨髓基质细胞，成骨细胞”，并限定文献语种为中文。并手工检索近期的相关中文期刊和相关书籍。资料选择：对资料进行筛选，选择观察药物（包括中药复方）对细胞分化方向进行调控的文章。排除观察其他因子对细胞分化方向进行调控的文章。资料提炼：共收集到调控骨髓基质细胞向成骨方向分化作用相关的文献293篇，21篇符合标准，排除272篇。资料综合：能调控骨髓基质细胞向成骨方向分化的药物包括地塞米松、雌激素、他汀类降血脂药、二甲胺四环素和中药生脉成骨方等。对各种药物调控的特点进行分析，并对通过调控骨髓基质细胞分化方向进行骨质疏松症的治疗的前景进行初步的展望和分析存在的困难。结论：药物如果能促进骨髓基质细胞向成骨细胞方向分化，又对骨有较高的器官选择性的话，将可能有治疗骨质疏松症的作用，但也还存在很多尚未解决的问题。     

糖代谢对骨骼细胞的影响

骨骼细胞之间的相互平衡是维持骨骼健康的重要因素之一,骨骼细胞之间失衡容易造成骨质疏松等骨骼疾病。很多研究表明,糖代谢异常会打破骨形成和骨吸收的平衡,从而引起骨量减少和骨质疏松性骨折等疾病。笔者对成骨细胞、破骨细胞以及骨细胞相关的糖代谢的最新研究进展进行总结,系统剖析糖代谢对成骨细胞、破骨细胞以及骨细胞分化和功能的关键调控作用,为骨质疏松等骨疾病的治疗提供理论指导。     

己烯雌酚与淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎和股骨的影响

背景：以往实验结果提示淫羊藿总黄酮有提高雌激素预防去卵巢大鼠胫骨上段松质骨丢失的作用,又可减少雌激素在应用于防治绝经后骨质疏松症中对子宫的刺激等不良反应,将两者结合应用是否有协同作用？目的：观察己烯雌酚与淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎和股骨的代谢生化指标和骨组织形态计量学的影响.设计：随机对照动物实验.单位：广东医学院药理教研室.材料：4月龄未交配的雌性SD大鼠,体质量（225&;#177;15）g,由中国科学院上海实验动物中心提供,动物级别为清洁级（合格证号：中科动管第003号）.大鼠随机分为5组：假手术组、去卵巢组、己烯雌酚组、淫羊藿总黄酮组与联合用药组,每组10只.方法：除假手术组大鼠外,其余行双侧卵巢切除术,假手术组和去卵巢组给予溶剂对照,其余分别为：己烯雌酚组22.5 μg/（kg&;#183;d）,淫羊藿总黄酮组300 mg/（kg&;#183;d）,联合用药组[己烯雌酚22.5μg/（kg&;#183;d）＋淫羊藿总黄酮300 mg（kg&;#183;d）],均灌胃给药90天.应用骨组织形态计量学方法测量第5腰椎松质骨的动态参数（周长百分数、骨矿化沉积率、骨表面形成率、骨量形成率、骨组织形成率）和静态参数（骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁数量、骨小梁分离度、单位骨小梁面积破骨细胞数）,同时测量股骨钙、磷及羟脯氨酸含量.主要观察指标：①己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎松质骨的动态参数和静态参数的影响.②己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠股骨生化指标的影响.结果：5组大鼠,每组10只均纳入结果分析.①己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠股骨生化指标的影响：与假手术组比较,去卵巢组大鼠股骨湿重/体质量比、干重/体质量比均明显降低（P＜0.01）,骨钙、磷含量及钙/羟脯氨酸比值均降低（P＜0.05）.与去卵巢组比较,己烯雌酚组大鼠股骨生化指标无明显变化（P＞0.05）;淫羊藿总黄酮组大鼠骨钙、骨磷含量及钙/羟脯氨酸比值明显增加（P＜0.01）.联合用药组骨钙、骨磷含量及钙/羟脯氨酸比值均明显增加（P＜0.01）,而且高于己烯雌酚组和淫羊藿总黄酮组（P＜0.05）.②己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎静态和动态参数的影响：与假手术组比较,去卵巢组大鼠腰椎静态参数中骨小梁面积百分数、骨小梁厚度分别减少35.0%,31.0%,而骨小梁分离度、破骨细胞数分别增加31.6%,106.9%,差异均有显著性（P＜0.05～0.01）;动态参数标记周长百分数、骨量形成率分别增加126.8%,36.6%,差异有显著性（P＜0.01）.与去卵巢组比较,己烯雌酚使去卵巢大鼠腰椎的骨小梁面积百分数增加20.3%,但差异无显著性（P＞0.05）,骨小梁分离度、破骨细胞数分别减少15.1%,47.1%,差异有显著性（P＜0.05）;动态参数标记周长百分数、骨矿化沉积率、骨量形成率分别减少44.3%,28.0%,64.1%,差异有显著性（P＜0.05）.淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠腰椎静态参数和动态参数均无明显影响（P＞0.05）.联合用药使去卵巢大鼠腰椎松质骨的骨小梁面积百分数、骨小梁厚度分别增加52.7%,36.6%,而骨小梁分离度、破骨细胞数分别减少25.5%,61.0%,差异均有显著性（P均＜0.01）;动态参数标记周长百分数、骨矿化沉积率、骨量形成率分别减少56.1%,39.2%和2 80.1%,差异均有显著性（P均＜0.01）.联合用药组的作用明显强于己烯雌酚组和淫羊藿总黄酮组,差异有显著性（P＜0.05）.结论：己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药明显增加去卵巢大鼠腰椎的骨量和骨小梁厚度,减少骨小梁分离度,其增加骨量的效应比单用己烯雌酚和单用淫羊藿总黄酮的作用明显,且可使股骨钙、磷含量及钙/羟脯氨酸比值增加,提示己烯雌酚与淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎和股骨的作用具有协同作用.