肺表面活性物质相关蛋白C真核表达载体的构建及体外表达

目的 克隆人肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)基因,构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/SP-C,并检测其在体外的表达,为SP-C的批量生产提供可靠的方法.方法 提取肺癌手术患者病灶周围正常肺组织总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术获得SP-C cDNA序列.用NotI和XhoI内切酶双酶切SP-C cDNA序列和质粒pcDNA3.1(+),胶回收后体外连接.酶切和测序后,用脂质体包裹转染人乳腺癌细胞株MCF-7,采用RT-PCR和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测SP-C的表达.结果 能够正确克隆人SP-C基因并插入至质粒pcDNA3.1(+)中;重组质粒体外转染MCF-7细胞后可以表达SP-C蛋白.结论 采用体外重组技术,成功构建了人SP-C真核表达载体 pcDNA3.1(+)/SP-C,并能在体外表达SP-C,为下一步构建人SP-C乳腺特异表达载体,利用乳腺生物反应器大量生产SP-C奠定了基础.     

小分子Survivin干扰RNA逆转肺癌细胞耐药的研究

目的探讨小分子Survivin干扰RNA（siRNA-Survivin）逆转人肺癌耐药细胞（A549DDP）耐药性的研究。方法应用RT-PCR法及Western-blot方法证明Survivin基因在人肺腺癌耐药细胞系（A549DDP）细胞系呈现高表达;并采用脂质体为转染介质,将Survivin小片段RNA导入A549DDP细胞沉默Survivin基因;应用MTT法观察顺铂、多西他赛、吉西他滨、表阿霉素对沉默Survivin基因后的A549DDP细胞的细胞增殖抑制及半数抑制浓度的变化。结果 1,Sur-vivin-mRNA、Survivin蛋白在A549DDP细胞系表达水平均显著高于A549细胞系;2,顺铂、多西他赛、吉西他滨、表阿霉素对沉默Survivin后A549DDP细胞的细胞增殖抑制与对照组（A549DDP细胞s、iRNA-control A549DDP细胞）相比明显增加,半数抑制浓度（IC50）明显下降,差异显著（P〈0.01）。结论 Survivin参与了肺腺癌细胞耐药的形成;小分子Sur-vivin干扰RNA沉默Survivin可以提高耐药的肺癌细胞对化疗药物的敏感性。Survivin可能成为临床监测肿瘤耐药性变化,逆转肺癌耐药的一个新的靶点。     

小组负责制护理对产妇产后自我护理能力及心理状态的影响

目的探讨小组负责制护理在产妇产后护理中的应用效果。方法将我院80例初产妇按护理方法的不同分为观察组和对照组各40例,对照组产后采用常规护理,观察组采用小组负责制护理。结果观察组在自我护理技能、健康知识水平、自我责任感等自我护理能力方面的得分均显著高于对照组（P〈0．05）。观察组在母乳喂养、臀部护理、沐浴等方面的新生儿护理知识得分显著高于对照组（P〈0．05）。观察组的SAS、SDS评分均显著低于对照组,护理满意度显著高于对照组,住院时间显著短于对照组（P〈0．05）。结论小组负责制能够有效改善产后护理质量,提高产妇的自我护理能力,减少不良心理。     

诱导多能干细胞建系及体外造血祖细胞定向分化体系的建立

背景：目前,大量文献报道了诱导多能性干细胞系的建立,但大规模体外诱导分化造血祖细胞的研究还缺乏深入的探讨。 目的：建立诱导多能性干细胞体外定向诱导形成造血祖细胞的方法。 方法：采用慢病毒感染的方法将含有Oct4、Sox2、Nanog和Lin28全能性基因的慢病毒颗粒转导人皮肤成纤维细胞,获得了诱导多能性干细胞;在诱导分化体系中添加了 Y-27632,克服干细胞扩增中的凋亡现象;运用OP9细胞产生的条件培养液建立诱导多能性干细胞体外定向分化形成造血祖细胞的分化体系。 结果与结论：①前3代细胞克隆传代时,诱导多能性干细胞发生凋亡的现象很多,很难大规模扩增培养。培养基中添加阻断 ROCK活化的抑制剂,能够明显抑制胚胎干细胞的凋亡。②诱导多能性干细胞在 OP9细胞条件培养液作用下,经过体外诱导分化,形成CD34＋造血祖细胞。     

第3代和第4代HIV检测试剂对无偿献血人群筛查结果比较

HIV流行在国内部分地区已由高危人群转为普通人群,对保证血液安全造成很大压力.第4代HIV检测试剂因同时包被HIV抗原和抗-HIV P24,能同时检测HIV-1/2抗体和P24抗原,相对说能缩短检测窗口期[1].本站从2005年1月开始,就使用国产第3代和进口第4代试剂同时对无偿献血人群的进行筛查,现将2种试剂的HIV筛查结果报告如下.     

中西医结合治疗慢性肺源性心脏病急性加重期的疗效

目的探讨中西医结合治疗慢性肺源性心脏病急性加重期的临床疗效。方法将50例慢性肺源性心脏病急性加重期的患者按不同的治疗方法分为2组：治疗组（30例）和对照组（20例）。2组患者均采用常规的治疗,包括改善通气、解除支气管痉挛、祛痰、强心、利尿及纠正水、电解质平衡等。在此基础上,治疗组加用中药治疗。观察2组患者治疗前后心功能【左心室射血分数（LVEF）、每搏出量（SV）、心输出量（co）、心脏排血指数（CI）]、肺功能【第一秒用力呼出量（FEVl）、用力肺活量（FVC）、FEVl／FVC比值1改善及动脉血气分析（pH、PaO：、SaO：、PaCO：）、临床疗效的情况。结果治疗组总有效率明显高于对照组（P〈0．05）。对照组治疗后LVEF、SV、CO、CI、pH、Pa02、Sa02、PaC02均较治疗前明显改善（均P〈O．05）,治疗组治疗后LVEF、SV、CO、CI、FEVl、FVC、FEVl／FVC比值、pH、Pa02、Sa02、PaC02均较治疗前明显改善（均P〈0．05）,治疗组治疗后LVEF、SV、CO、CI、FEVl、FVC、FEVl／FVC比值、pH、Pa02、Sa02、PaC02均较对照组明显改善（均P〈O．05）。结论中西医结合治疗慢性肺源性心脏病急性加重期可明显改善患者的心、肺功能,无明显的不良反应,是一种治疗慢性肺源性心脏病急性加重期较理想的方法。     

急性冠状动脉综合征患者血浆脂联素的变化

目的 通过观察急性冠状动脉综合征（ACS）患者血浆脂联素（APN）水平的变化,推测APN与斑块稳定性的关系.方法 选取经冠状动脉造影证实的冠心病患者75例,包括ACS患者（ACS组,36例）、稳定性心绞痛患者（SAP组,39例）,并选取冠状动脉造影结果正常者为对照组（20例）.同时,根据造影结果对所有研究对象进行Gensini积分,分为0分组（20例）、1～30分组（45例）、≥30分组（30例）.ELISA检测所有研究对象血浆中APN水平变化.结果 （1）ACS组、SAP组血浆APN水平显著低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;（2） ACS组血浆APN水平显著低于SAP组,差异有统计学意义（P＜0.05）;（3） Gensini积分≥30分组APN水平显著低于＜30分组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 随着冠状动脉病变程度和不稳定性的加剧,APN在研究对象血浆中的水平逐渐降低,APN的降低可能加剧了病变处斑块的不稳定性,促进了动脉粥样硬化斑块的进程进展.     

全自动免疫分析法HIT-Ab检测对肝素诱导血小板减少症患者诊断敏感性及特异度的影响

目的探究全自动免疫分析法HIT-Ab检测对肝素诱导血小板减少症(HIT)患者诊断敏感性及特异度的影响。方法选取我院2014年11月~2016年11月收治的116例疑似HIT患者,均行全自动免疫分析法HIT-Ab检测及4Ts评分,以临床诊断为金标准,统计对比其诊断准确度、特异度、敏感度。结果全自动免疫分析法HIT-Ab检测诊断准确度、特异度、敏感度均高于4Ts评分,差异有统计学意义(P0.05)。结论全自动免疫分析法HIT-Ab检测可提高HIT诊断准确度、特异度及敏感度,为肝素诱导血小板减少症预防、诊断、治疗提供重要依据。     

应用透射电镜在小儿肾小球疾病诊断中的利弊

确定肾小球疾病的病理类型对于临床上肾小球疾病的诊断、选择合适的治疗方案和判断预后具有重要的意义[1]。目前在成人肾脏疾病的诊断中,开展透射电镜检查比较广泛,有些医院甚至成为常规的检查项目之一。但在小儿肾脏疾病的诊断中,尤其是光镜、免疫荧光和电镜同时应用,则受到诸多因素的影响和限制。为提高临床小儿肾脏疾病诊断和治疗中进行电镜检查的重视程度;评价电镜在小儿     

益气活血法对舒张性心力衰竭大鼠心肌细胞钙稳态的影响

目的 研究不同比例益气活血药对舒张性心力衰竭(DHF)大鼠的疗效,探讨其对心肌细胞钙稳态的影响机制。方法 采用改良缩窄腹主动脉术制备压力负荷致DHF大鼠模型。将大鼠分为假手术组、模型组、益气组(黄芪3 g、党参1.5 g)、益气活血1∶1组(黄芪3 g、党参1.5 g、丹参3 g、三七1 g)、益气活血2∶1组(黄芪6 g、党参3 g、丹参3 g、三七1 g),每组20只,连续干预12周。治疗4、12周进行心功能检测,测量舒张期左室前壁厚度、舒张期左室后壁厚度、舒张期左室内径、左室射血分数和左室短轴缩短率及舒张早期跨二尖瓣血流速度(E)与舒张早期二尖瓣环运动幅度(e)比值(E/e);12周进行血流动力学检测,分别在静息状态和盐酸多巴胺负荷状态下记录左室压力下降速率、左室舒张末期压力(LVEDP)以评价左室舒张功能,记录左室压力上升速率,左室收缩压力(LVESP)以评价左室收缩功能,并记录心率及颈动脉压力;12周后处死大鼠,检测心肌细胞舒缩功能及钙转运情况,测量心肌细胞的收缩速率、舒张速率、收缩50%时间(CT50)和舒张50%时间(RT50);测定钙释放速率、钙回摄速率、钙释放50%时...