基于1H-NMR的当归四逆汤抗凝血作用的代谢组学研究

采用¹H-NMR代谢组学技术研究当归四逆汤抗凝血作用机制以及对小鼠血浆内源性代谢产物的影响。当归四逆汤灌胃给药1周后,观察当归四逆汤对小鼠凝血酶时间的影响,并采用¹H-NMR技术分析小鼠血浆代谢指纹图谱,采用主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares-discrimination analysis,OPLS-DA),研究给药组与正常组之间的代谢物组差异,筛选与抗凝血作用相关的潜在生物标志物。连续当归四逆汤灌胃给药1周后,能显著延长小鼠凝血酶时间(P<0.05)。代谢组学结果显示空白组和复方组能明显区分,与空白组比较,复方组内源性代谢产物肉碱、苯丙氨酸和异丁酸显著上调(P<0.01),赖氨酸、组氨酸和胆固醇显著下调(P<0.05)。肉碱、苯丙氨酸、组氨酸和胆固醇为当归四逆汤抗凝过程中潜在代谢标志物,当归四逆汤可能通过调节脂质代谢、能量代谢和氨基酸代谢影响血小板聚集功能和组织因子、纤维蛋白酶的表达来发挥抗凝作用。     

正交试验优选和肾络颗粒乙醇提取工艺

目的实验研究和肾络颗粒药物乙醇提取工艺。方法采用正交设计,以大黄素和芍药苷为指标,考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间和提取次数等工艺因素的影响。结果影响因素从大到小依次为提取次数乙醇浓度提取时间乙醇用量;其中提取次数对指标成分提取率有显著影响(P0.05),其他三个因素影响不显著(P0.05)。结论最佳提取工艺条件是用浓度为60%的乙醇,提取2次,每次乙醇用量为药材重量的6倍,每次提取时间为40分钟。     

OCT在急性中心性浆液性脉络膜视网膜病变诊治中的应用

目的:应用OCT动态观察急性中心性浆液性脉络膜视网膜病变(acute central serous chorioretinopathy,ACSC)细微结构的变化,比较其激光治疗、药物治疗与二者联合治疗的疗效。方法:经FFA及OCT确诊的96例98眼ACSC患者,应用OCT比较单纯药物治疗、激光治疗以及激光联合药物治疗对视网膜下液的吸收,并比较各组间的视力差异。随访时间为治疗后2,4,8wk。结果:各组之间在治疗前视网膜脱离范围均没有统计学意义。在治疗后2,4,8wk比较,激光治疗组与药物治疗组间视网膜脱离范围和治愈率均没有统计学意义;联合治疗组与前两组比较,其视网膜脱离范围更小,治愈率更高,其差异均有统计学意义。结论:药物联合激光治疗急性中心性浆液性脉络膜视网膜病变能缩短病程,提高治愈率;OCT无创、简便、直观,能对CSC的愈后过程进行灵敏的追踪。     

负性共刺激分子B7-H4赋予肾癌细胞对化疗药物的耐药性研究

通过RT-PCR方法克隆出人野生型负性共刺激分子B7-H4基因,将目的片段双酶切(EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ)后,与pIRES2-EGFP真核表达载体连接,构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-B7-H4-WT并进行鉴定;然后用定点突变法构建B7-H4核定位序列突变体基因,再构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-B7-H4-NLS-MT;脂质体转染法将重组载体导入786-O细胞,CCK8法研究转基因细胞株的增殖率及对化疗药物5-氟尿嘧啶、阿霉素和顺铂的耐药性。结果显示:B7-H4野生型转基因细胞株相较于空白质粒组,可有效促进786-O细胞增殖,并赋予786-O细胞对3种化疗药物的耐药性。与空白质粒组相比,对5-氟尿嘧啶的耐药倍数为2.06,对阿霉素的耐药倍数为1.81,对顺铂的耐药倍数为1.72。机制研究显示B7-H4野生型可赋予肿瘤细胞抗凋亡作用,1.25 μg/mL 5-氟尿嘧啶引起B7-H4 WT/786-O的细胞的凋亡率是20.2%,而Mock/786-O和B7-H4 NLS/MT/786-O细胞的凋亡率分别是41.1%和35.1%。说明B7-H4可能通过调控细胞凋亡赋予肿瘤细胞多药耐药性。当B7-H4核定位序列被突变后,这些功能都消失,说明B7-H4促肿瘤细胞增殖、赋予其多药耐药性的功能与其核定位序列密切相关。     

长眼轴患者白内障超声乳化术后角膜生物力学的变化

目的　观察长眼轴患者行白内障超声乳化术后角膜生物力学的变化。方法　收集拟接受白内障手术的患者58例68眼，将其分为长眼轴组（28例34眼）和正常眼轴组（30例34眼），应用可视化角膜生物力学分析仪（corneal visualization scheimpflug technology，Corvis ST）对患者术前及术后1周、1个月的角膜生物力学参数进行测量。结果　术前及术后1周、1个月两组峰距、中央角膜厚度、矫正眼压、眼压及长眼轴组第二压平时间和最大形变幅度的总体比较，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）；术后1周与术前相比，两组峰距、中央角膜厚度、矫正眼压、眼压明显增大，长眼轴组最大形变幅度较术前减小，差异均有统计学意义（均为P＜0.05），但术后1个月正常眼轴组峰距、中央角膜厚度、矫正眼压、眼压均恢复到术前水平（均为P＞0.05），而长眼轴组最大形变幅度较术前减小，矫正眼压、眼压较术前均增高（均为P＜0.05）。术后1个月与术后1周比较，两组峰距、中央角膜厚度、矫正眼压、眼压均有减小趋势（均为P＜0.05）。长眼轴组术后1周中央角膜厚度、矫正眼压及最大形变幅度的变化量与眼轴长度均存在正相关性（r=0.493，P=0.003；r=0.575，P＜0.001；r=0.587，P＜0.001），而正常眼轴组的相关参数的变化量与眼轴长度均无相关性（均为P＞0.05）。结论　白内障超声乳化术能影响角膜生物力学，且长眼轴患者较正常眼轴者术后更易引起角膜生物力学改变，在白内障术后应注意其用药时间及激素类药物的使用，防止伤口愈合不良导致迁延感染及高眼压的发生。     

能量多普勒评价类风湿关节炎疾病活动度的价值

 目的 通过与DAS28比较,探讨能量多普勒评价类风湿关节炎(rheumatoid arthritis ,RA) 疾病活动度的价值。方法 选择RA患者74例,记录膝关节的能量多普勒信号,并记录28个关节的肿胀数、压痛数、血沉(erythrocyte sedimentation,ESR)、C-反应蛋白(CRP)及患者基于100 mm视觉模拟尺(VAS),对疾病活动度进行评价,计算DAS28评分。专业超声医师对患者肿胀膝关节进行能量多普勒检查,PD评分分为4级后与DAS28评分做Kappa检验。结果 74例中,1例(1%)无血流信号,2例(3%)少量点状信号,32例(43%)大量短条状血流信号,39例(53%)树枝状信号。将DAS28-CRP及DAS28-ESR分组后与能量多普勒信号分别比较发现,能量多普勒与DAS28一致性好(DAS28-ESR κ=0.701,P<0.05;DAS28-CRP κ=0.777,P<0.05)。结论 能量多普勒能够评价RA关节炎的疾病活动度。     

Ophtha TOP测量角膜屈光参数的稳定性及其与Pentacam测量的一致性评估

背景 角膜屈光参数的准确测量对于眼表疾病的诊治、屈光手术的设计、人工晶状体屈光度的计算等至关重要,Ophtha TOP是一种用于临床的新型角膜人工晶状体测量仪,但验证其测量角膜屈光参数稳定性及准确性的研究尚少见. 目的 评估Ophtha TOP测量正常人群角膜屈光参数的稳定性,并评价白内障术前患者用Ophtha TOP测量的角膜屈光参数与Pentacam测量结果的一致性. 方法 采用诊断试验可靠性评价方法,2013年9月至2014年10月在天津市眼科医院选取健康志愿者30人60眼行Ophtha TOP检查,评价Ophtha TOP测量角膜屈光参数的稳定性;另选取拟行白内障手术的白内障患者30例30眼进行OphthaTOP检查,以评估Ophtha TOP测量角膜屈光参数与Pentacam测量结果的一致性.记录角膜曲率最平坦曲率径线(Kf)、最陡峭曲率径线(Ks)、平均角膜曲率(Km),并记录轴位J0和J45的散光度.正常眼使用OphthaTOP连续测量5次以上,采用组内相关系数(ICC)、变异系数(CoYs)和重复度(2.77Sw)评价Ophtha TOP测量上述参数的稳定性;白内障患者用Ophtha TOP和Pentacam连续测量2次以上,采用Bland-Altman一致性分析法评估Ophtha TOP测量的角膜屈光参数和散光参数与Pentacam测量结果的一致性. 结果 Ophtha TOP测量的正常眼Kf、Ks、Km、J0和J45的ICC均≥0.90,重复度2.77Sw均≤0.36,Kf、Ks、Km的CoVs均≤0.30.Ophtha TOP与Pentacam测量的白内障眼的角膜屈光参数Kf、Ks和Km的平均差值分别为(0.18±0.28)、(0.24±0.29)和(0.21±0.26)D,Ophtha TOP测量值均略高于Pentacam测量值,差异均有统计学意义(t=3.48、4.50、4.49,均P=0.00);而2种测量仪器测量的散光参数J0、J45的平均差值分别为(0.07±0.21)D和(-0.02±0.18)D,差异均无统计学意义(均P＞0.05).Bland-Altman一致性检验显示,2种测定方法测量的Kf、Ks和Km的95％一致性区间(LoA)分别为-0.37 ～0.73、-0.33～0.81和-0.30 ～0.72 D,J0和J45的95％LoA分别为-0.34～0.48和-0.37～0.33D. 结论 Ophtha TOP对正常人眼角膜屈光参数测量结果的稳定性较好.在白内障术前患者中,Ophtha TOP测量的角膜曲率和角膜散光结果与Pentacam测量值一致性好.     

强直性脊柱炎合并阵发性睡眠性血红蛋白尿一例

患者：男,１５岁。因反复多关节肿痛伴面色苍白３年,发热２个月于１９９８年８月３１日入院。３年前无诱因右髋关节疼痛,不发热,发现血沉快、血色素９６ｇ／Ｌ,自行用烧酒擦浴,症状略缓解。２年前左踝关节红、肿、热、痛,活动受限,晨僵不明显。Ｘ线检查未见异常。左踝关节肿胀并渐累及右踝、右膝、左膝,晨僵３小时。１年前因关节肿痛卧床。外院检查：血色素５０ｇ／Ｌ,白细胞２－６×１０９／Ｌ,血小板１２４×１０９／Ｌ,网织红细胞０－０５４,尿含铁血黄素（＋）,酸溶血试验（＋）,蔗糖溶血试验（＋）,诊断“阵发性睡眠性…