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pEGFP-PDX-1真核表达载体的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:构建真核表达载体pEGFP-PDX-1,为基因水平研究PDX-1在肝干细胞定向分化中的调控机制提供理论参考。方法:参考分子克隆技术,采用PCR的方法从SK900/BLSCRIPT质粒中扩增PDX-1,同时将一个单个限制性酶切位点连接反应转变为以Hind Ⅲ和BamHⅠ为末端的双限制性内切酶位点连接反应,将PDX-1 cDNA定向插入pEGFP-C1的多克隆位点中,构建重组表达质粒pEGFP-C1-PDX-1,并对重组子进行SmaⅠ单个限制性内切酶酶切鉴定。结果:构建了含有PDX-1 cDNA的真核表达载体pEGFP-PDX-1。结论:将PDX-1插入pEGFP-C1的C-末端,提高PDX-1在真核细胞中的表达,而且不影响其目的蛋白的结构和功能,对研究PDX-1调控肝干细胞的定向分化机制具有重要的意义。 相似文献
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在知识的传授中要注重培养学生的自学能力和学习的迁移能力 总被引:1,自引:0,他引:1
21世纪将是高度科学化、专业化、技术化、信息化的时代。人们将面临“知识爆炸”的挑战 ,知识陈旧周期缩短 ,新学科不断涌现。这些特点在未来社会会更为突出。人生有限知识无涯 ,更何况医学知识浩瀚如烟 ,学生要想在学校有限的几年中把所有的知识都学会和掌握 ,既不切实际 ,也不符合客观的认识规律。科学家达尔文曾经说过“我认为我们学到的任何有价值的知识都是从自学中得到的”。进学校靠教师传授知识的时间 ,毕竟是短暂的 ,绝大部分的知识要靠自己坚持不懈 ,刻苦努力的自学 ,不断积累才能获得 ,教书育人是教师义不容辞的责任 ,我们每位教… 相似文献
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目的利用电穿孔仪对成年雄性SPFKM小鼠睾丸进行电穿孔实验,以观察电穿孔对成年雄性SPFKM小鼠睾丸的损伤,为体内精子介导基因转移提供依据。方法设置高压和低压两组不同的体内电穿孔参数,将SPFKM小鼠睾丸置于电穿孔仪上的钳型电极的两侧进行体内电穿孔,2周后处死动物,分离睾丸和附睾,将睾丸称重后用4%多聚甲醛固定,常规组织切片和HE染色,显微镜下观察;将附睾置于M16培养基中分离其中精子,稀释后置显微镜下观察。结果(1)高压电穿孔2周后,附睾精子活力检查和睾丸组织切片镜下观察显示:高压电穿孔可造成睾丸的不可逆损伤;其睾丸质量也显著低于对照组睾丸质量(P<0.01)。(2)低压电穿孔2周后,附睾精子活力检查和睾丸组织切片镜下观察显示:低压电穿孔虽可造成睾丸一定的损伤,但这种损伤是可逆的,经过一段时间的恢复后雄鼠仍具有生殖能力。并且电穿孔后的睾丸质量与对照组睾丸质量不存在显著差异(P>0.05)。结论合理地设计体内电穿孔参数,一方面不会对SPFKM雄鼠睾丸的生殖能力造成严重影响,另一方面它还可为外源基因导入到生殖细胞提供了一种可能。 相似文献
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目的 比较人与小鼠胚胎鼻咽部的解剖学和组织学差异,为研究一些鼻咽部疾病发病机制提供参考资料。 方法 用组织学方法观察E9-28周人胚胎及E9.5~19.5 d C57BL/6J小鼠胚胎鼻咽结构及粘膜形态。 结果 人胚胎鼻咽部呈不规则的立方形,顶后壁呈约120°的弧形;鼻咽部富含皱襞、隐窝及淋巴组织。小鼠鼻咽部是一个接近直线的弧形管腔,无淋巴组织及隐窝等结构。人胚胎鼻咽粘膜早、中期主要是假复层纤毛柱状上皮被覆,只有少量过渡上皮及复层鳞状上皮存在。小鼠胚胎鼻咽粘膜全部为假复层纤毛柱状上皮。 结论 人与小鼠胚胎鼻咽解剖学和组织学差异,可能导致他们对某些疾病易感性不同。 相似文献
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我们参照Joris的方法,采用顺行血管灌注法固定取材,制备主动脉内皮铺片标本,现报告如下。材料和方法成年雄性Wistar大鼠10只,5只喂致粥样硬化饲料两个月,5只喂基础饲料以作对照。 相似文献
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介绍一种培养细胞简易的HE染色法 总被引:1,自引:0,他引:1
<正>在现代医学和生物学研究中培养细胞是非常好的实验对象。固定,染色是细胞培养中常用显示细胞形态的一种有效方法。它能使我们直接观察细胞的生长情况和形态结构,制做好的标本即能长期保存又便于日后观察、分析。我们经过反复的实践和摸索得出一种染色时间短,效果好,步骤简便的培养细胞HE染色示。 相似文献
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