pEGFP-PDX-1真核表达载体的构建

目的：构建真核表达载体pEGFP-PDX-1，为基因水平研究PDX-1在肝干细胞定向分化中的调控机制提供理论参考。方法：参考分子克隆技术，采用PCR的方法从SK900/BLSCRIPT质粒中扩增PDX-1，同时将一个单个限制性酶切位点连接反应转变为以Hind Ⅲ和BamHⅠ为末端的双限制性内切酶位点连接反应，将PDX-1 cDNA定向插入pEGFP-C1的多克隆位点中，构建重组表达质粒pEGFP-C1-PDX-1，并对重组子进行SmaⅠ单个限制性内切酶酶切鉴定。结果：构建了含有PDX-1 cDNA的真核表达载体pEGFP-PDX-1。结论：将PDX-1插入pEGFP-C1的C-末端，提高PDX-1在真核细胞中的表达，而且不影响其目的蛋白的结构和功能，对研究PDX-1调控肝干细胞的定向分化机制具有重要的意义。     

在知识的传授中要注重培养学生的自学能力和学习的迁移能力

21世纪将是高度科学化、专业化、技术化、信息化的时代。人们将面临“知识爆炸”的挑战 ,知识陈旧周期缩短 ,新学科不断涌现。这些特点在未来社会会更为突出。人生有限知识无涯 ,更何况医学知识浩瀚如烟 ,学生要想在学校有限的几年中把所有的知识都学会和掌握 ,既不切实际 ,也不符合客观的认识规律。科学家达尔文曾经说过“我认为我们学到的任何有价值的知识都是从自学中得到的”。进学校靠教师传授知识的时间 ,毕竟是短暂的 ,绝大部分的知识要靠自己坚持不懈 ,刻苦努力的自学 ,不断积累才能获得 ,教书育人是教师义不容辞的责任 ,我们每位教…     

体内原位电穿孔致雄性SPE KM小鼠睾丸损伤的实验研究

目的利用电穿孔仪对成年雄性SPFKM小鼠睾丸进行电穿孔实验,以观察电穿孔对成年雄性SPFKM小鼠睾丸的损伤,为体内精子介导基因转移提供依据。方法设置高压和低压两组不同的体内电穿孔参数,将SPFKM小鼠睾丸置于电穿孔仪上的钳型电极的两侧进行体内电穿孔,2周后处死动物,分离睾丸和附睾,将睾丸称重后用4%多聚甲醛固定,常规组织切片和HE染色,显微镜下观察;将附睾置于M16培养基中分离其中精子,稀释后置显微镜下观察。结果(1)高压电穿孔2周后,附睾精子活力检查和睾丸组织切片镜下观察显示:高压电穿孔可造成睾丸的不可逆损伤;其睾丸质量也显著低于对照组睾丸质量(P<0.01)。(2)低压电穿孔2周后,附睾精子活力检查和睾丸组织切片镜下观察显示:低压电穿孔虽可造成睾丸一定的损伤,但这种损伤是可逆的,经过一段时间的恢复后雄鼠仍具有生殖能力。并且电穿孔后的睾丸质量与对照组睾丸质量不存在显著差异(P>0.05)。结论合理地设计体内电穿孔参数,一方面不会对SPFKM雄鼠睾丸的生殖能力造成严重影响,另一方面它还可为外源基因导入到生殖细胞提供了一种可能。     

小鼠和人胚胎鼻咽发育解剖形态学比较研究

目的　比较人与小鼠胚胎鼻咽部的解剖学和组织学差异,为研究一些鼻咽部疾病发病机制提供参考资料。 方法　用组织学方法观察E9-28周人胚胎及E9.5~19.5 d C57BL/6J小鼠胚胎鼻咽结构及粘膜形态。 结果　 人胚胎鼻咽部呈不规则的立方形,顶后壁呈约120°的弧形;鼻咽部富含皱襞、隐窝及淋巴组织。小鼠鼻咽部是一个接近直线的弧形管腔,无淋巴组织及隐窝等结构。人胚胎鼻咽粘膜早、中期主要是假复层纤毛柱状上皮被覆,只有少量过渡上皮及复层鳞状上皮存在。小鼠胚胎鼻咽粘膜全部为假复层纤毛柱状上皮。 结论　人与小鼠胚胎鼻咽解剖学和组织学差异,可能导致他们对某些疾病易感性不同。     

云南省人类免疫缺陷病毒感染者抗反转录病毒治疗期间脱失找回再入组情况及其影响因素的分析

目的:了解云南省人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者抗反转录病毒治疗(anti-retroviral therapy,ART)期间脱失找回再入组情况及其影响因素。方法:纳入截至2018年12月31日随访状态为失访和停药的云南省接受ART的HIV感染者,通过问卷调查和...     

实验性大鼠动脉粥样硬化内皮铺片标本的制备

我们参照Joris的方法,采用顺行血管灌注法固定取材,制备主动脉内皮铺片标本,现报告如下。材料和方法成年雄性Wistar大鼠10只,5只喂致粥样硬化饲料两个月,5只喂基础饲料以作对照。     

介绍一种培养细胞简易的HE染色法

<正>在现代医学和生物学研究中培养细胞是非常好的实验对象。固定,染色是细胞培养中常用显示细胞形态的一种有效方法。它能使我们直接观察细胞的生长情况和形态结构,制做好的标本即能长期保存又便于日后观察、分析。我们经过反复的实践和摸索得出一种染色时间短,效果好,步骤简便的培养细胞HE染色示。     

单核细胞增殖特性的实验研究

<正>单核细胞参与机体许多正常生理及病理过程.在动脉粥样硬化(AS)的发生过程中,单核细胞可转变成泡沫细胞,分泌细胞因子,并出现增殖细胞所具有的特性.本实验在行外周血体外培养及单核细胞与血管内皮细胞联合培养的基础上,采用免疫组织化学碱性磷酸酶标记ABC(ABC—AP)法,观察了IL-1、TNF和IFN