趾部切口疼痛对大鼠中脑导水管周围灰质c-fos表达的影响

目的:研究趾部切口疼痛刺激对大鼠中脑导水管周围灰质c-fos表达的影响。方法:2004-02/07在华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学实验室完成。选择健康雄性SD大鼠12只,随机分为2组,每组6只:模型组大鼠在吸入异氟烷麻醉下按Brennan法建立大鼠趾部切口疼痛模型,对照组大鼠吸入相同时间的异氟烷,但不作手术切口。术后1h内观察动物累积疼痛评分的改变。术后2h,每组取大鼠3只麻醉,经左心室插管灌注固定后取中脑;另外3只大鼠快速断头处死,分离中脑,匀浆提取总蛋白。分别用免疫组化和免疫印迹法观察大鼠中脑导水管周围灰质内c-fos表达的变化。结果:12只大鼠均进入结果分析。①模型组大鼠的累积疼痛评分明显高于对照组大鼠的累积疼痛评分(19.6±2.3)分和(2.4±0.7)分(t=1.35,P<0.01)。②模型组大鼠中脑导水管周围灰质内可见c-fos的大量表达,Fos阳性神经元主要集中在大鼠中脑导水管周围灰质腹外侧区,其次为腹中间区、背外侧区和背中间区,各区与对照组相比差异显著(P<0.05或0.01)。③免疫印迹结果显示模型组大鼠中脑导水管周围灰质内Fos蛋白呈高表达。结论:采用免疫组化和免疫印迹两种方法,在翻译水平上检测c-fos基因的表达,证实大鼠趾部切口疼痛可引起中脑导水管周围灰质内Fos蛋白的表达,且大鼠在术后出现疼     

左肾黏液样小管状和梭形细胞癌1例并文献复习

目的:探讨肾黏液样小管状和梭形细胞癌患者的临床病理特征、治疗方法、疗效评价及预后。方法:回顾性分析我们收治的1例左肾黏液样小管状和梭形细胞癌患者的临床病理资料,并复习相关文献。患者女,54岁。因左侧腰部疼痛就诊,CT检查提示左肾下极见大小约44 mm×37 mm×31 mm团块样影。结果:行左肾部分切除术,术后病理诊断:左肾黏液样小管状和梭形细胞癌。免疫组化:肿瘤细胞P-CK（+）,EMA（+）,CD68（PGM1）（-）,CK7（+）,CAM5.2（-）,PAX-8（+）,CK20（-）,Inhibin-a（-）,RCC（-）,Vimentin（+）,CD10（-）。术后患者恢复良好,康复出院,随访至今未见复发及转移。结论:肾黏液样小管状和梭形细胞癌是一类罕见的肾细胞癌,恶性程度相对较低,预后相对较好,治疗方法目前主张手术治疗,但术后仍需注意规律随访。     

颈椎病前入路手术的麻醉处理

目的:探讨颈丛阻滞应用于颈椎病前入路手术的麻醉效果。方法:颈椎病病人50例随机分为二组:Ⅰ组罗哌卡因组(局麻药0.25％罗哌卡因+1％利多卡因混合液);Ⅱ组丁哌卡因组(局麻药0.2％布比卡因+1％利多卡因混合液);两组均行一点法颈丛阻滞,注药量:右侧颈4深丛5ml,浅丛5ml,左侧浅丛5ml～6ml。结果:两组起效时间、阻滞平面相似,Ⅰ组阻滞程度稍优于Ⅱ组(P>0.05)麻醉效果均良好。结论:一点法罗哌卡因或丁哌卡因颈丛阻滞简便、安全、效果肯定,可应用于颈椎病前入路手术的麻醉。     

脊髓神经元和胶质细胞激活在三种神经病理性疼痛大鼠模型脊髓水平致痛机制中的作用

目的比较脊髓神经元和胶质细胞(星形胶质细胞和小胶质细胞)激活在三种大鼠神经病理性疼痛模型脊髓水平致痛机制中的作用。方法 SD 大鼠24只,体重150g～200g,随机分为4 组,每组6只,分别为对照组、CCI 组、SNL 组和 SNI 组。对照组不实施手术；CCI、SNL、SNI 组分别于左侧制作慢性坐骨神经缩窄损伤模型(CCI)、脊神经结扎模型(SNL)和保留性脊神经损伤模型(SNI)。术前3d 至术后15d 隔日使用机械刺激测定术侧后爪50%缩爪阈值。术后15d 测痛后,用多聚甲醛灌注大鼠,取L_(5,6)脊髓,进行免疫组化实验；用抗原癌基因蛋白 c-Fos、星形胶质细胞标记蛋白(GFAP)和小胶质细胞标记蛋白(OX-42)抗体分别检测神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞的激活状况。结果术后7d CCI、SNL、SNI 组术侧50%缩爪阈值均达到最低值,并维持至术后15d；术后15d,对照组、CCI 组、SNL 组和 SNI 组50%缩爪阈值分别为14.1±1.5、2.6±0.5、1.5±0.6、(0.8±0.4)g,大小顺序依次为对照组、CCI 组、SNL 组、SNI 组(P＜0.05)。与对照组比较,CCI、SNL 和 SNI 组Ⅳ～Ⅵ层 c-Fos 阳性神经元数量增加,脊髓背角Ⅰ或Ⅱ层星形胶质细胞及Ⅰ～Ⅳ层小胶质细胞的激活状态升高(P＜0.05), 但 CCI、SNL 和 SNI 组间脊髓背有Ⅳ～Ⅵ层 c-Fos 阳性神经元数量、术侧脊髓背角Ⅰ或Ⅱ层星形胶质细胞的及Ⅰ～Ⅳ层小胶质细胞激活状态差异无统计学意义(P＞0.05)。结论三种神经病理性疼痛大鼠模型中脊髓背角神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞的激活状况一致,提示其在脊髓水平致痛机制相似。     

强力霉素调控表达脑啡肽的永生化大鼠星形胶质细胞株的构建

目的构建受强力霉素（Dox）调控表达脑啡肽的永生化大鼠星形胶质细胞株（IAST）。方法采用脂质体介导法将重组质粒pRevTREhPPE和调节质粒pRevTet-On分别转染逆转录病毒包装细胞PT67；将含有RevTet—On和RevTRE／hPPE病毒上清感染IAST，得到稳定表达脑啡肽的IAST／Tet-On／hPPE细胞株，实时定量PCR检测Dox定量调控该细胞株前脑啡肽原（hPPE）基因的表达，免疫细胞化学及放射免疫分析法检测Dox定量调控该细胞株中脑啡肽的表达。结果IAST／Tet-On／hPPE细胞株中，hPPE基因的表达和脑啡肽的分泌受Dox调控，Dox浓度为100～5000nedml时，随着Dox浓度增高，hPPE基因的表达和脑啡肽的分泌增加，Dox浓度为5000ng／ml时达峰值。结论成功构建了受四环素及其衍生物强力霉素定量调控表达脑啡肽的IAST。     

大鼠脑室膜管下区神经干细胞的贴壁培养及其分化特征

目的：探索大鼠脑室管膜下区神经干细胞的贴壁培养方法及其体外分化特性。方法：实验于2004—10／12在华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科实验室进行。取出生24h内的SD大鼠，分离其室管膜下区神经干细胞，应用无血清Neurobasal培养基（含20g／L B27，20μg/L碱性成纤维生长因子、20μg／L表皮生长因子）进行贴壁培养。采用巢蛋白抗体鉴定培养细胞，以5-溴脱氧尿嘧啶核苷掺入法检测细胞增殖能力。体积分数为0．05胎牛血清诱导神经干细胞分化后，用神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞标志物微管相关蛋白、胶质纤维酸性蛋白和2，3-环核苷酸磷酸二酯酶相应抗体检测神经干细胞分化情况。结果：①在细胞培养第4，5天即可见培养基中出现大量的由几十个细胞构成的结构紧密、大小不等的悬浮细胞球，即神经球。②神经球贴壁培养24-48h后形成片状细胞克隆，细胞呈梭形或多角形。③细胞一般七八天传代一次，经七八次传代，培养2个月左右，细胞进入生长停滞状态。④贴壁培养的细胞巢蛋白染色及5-溴脱氧尿嘧啶核苷染色均为阳性。在培养基中加入血清后，免疫细胞化学检测分化后细胞包括微管相关蛋白阳性、胶质纤维酸性蛋白阳性和2，3-环核苷酸磷酸二酯酶阳性细胞，巢蛋白表达均为阴性。结论：贴壁培养的神经干细胞在体外经多次传代培养后仍可保持较强的增殖能力，仍保持了其本身的特性，同时具有多分化潜能的特性，因此可以认为贴壁培养法可作为一种理想的神经干细胞的培养方法。     

经阴道子宫疤痕切开取胚并子宫缺陷修补术在治疗剖宫产疤痕妊娠中的研究

选取2009年1月~2013年4月我院确诊治疗的剖宫产疤痕妊娠患者94例,依据随机分配原则分为栓塞清宫组和取胚修补组,栓塞清宫组患者给予常规经皮动脉化疗灌注与栓塞介入治疗配合清宫术治疗,取胚修补组患者给予经阴道子宫疤痕切开取胚配合子宫缺陷修补术治疗,统计分析所有患者术中出血量、住院时间、阴道流血时间、血HCG恢复正常时间、月经复潮时间和不良反应发生情况。取胚修补组患者术中出血量、住院、阴道流血时间明显低于栓塞清宫组,差异有统计学意义(P0.05);取胚修补组患者血HCG恢复正常、月经复潮时间明显短于栓塞清宫组,差异有统计学意义(P0.05);取胚修补组患者不良反应发生率明显低于栓塞清宫组,差异有统计学意义(P0.05)。经阴道子宫疤痕切开取胚并子宫缺陷修补术可有效降低剖宫产疤痕妊娠患者术中出血量,缩短患者住院、阴道流血时间,加快患者的康复,降低不良反应的发生,值得临床作进一步推广。     

NMDA受体2B亚基模拟表位对慢性神经病理性痛大鼠的镇痛效应

目的 评价N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)模拟表位对慢性神经病理性痛大鼠的镇痛效应.方法 成年雄性SD大鼠25只,体重200-250 g,随机分为5组(n=5),C组不进行任何处理;神经损伤(SNI)组行左后肢保留性SNI术;NR2B单纯免疫组(pNR2B组)于皮下两点注射携带NR2B模拟表位的特异性噬菌体(pNR2B)4×1012 pfμ/ml,每点100 μl,间隔1周后重复注射,共重复2次;无关噬菌体+SNI组(pSNI组)和pNR2B+SNI组(pNR2B/SNI组)于相应时点分别注射无关噬菌体或携带NR2B模拟表位的pNB2B,于首次注射后1周时行左后肢SNI术.持续观察大鼠痛行为学,分别于SNI术前1 d、术后1 d、1、2和3周测定左后爪机械刺激缩足反应阈值(MWT).首次注射后4周,采用间接ELISA法测定血清NR2B抗体和噬菌体抗体水平.结果 与C组和pNR2B组比较,SNI组和pSNI组术后1 d出现痛行为学症状,MWT降低,并持续至术后3周;pNR2B/SNI组术后1 d、1、2周痛行为学症状无明显缓解,术后3周痛行为学症状明显缓解,MWT差异无统计学意义(P＞0.05).与SNI组和pSNI组比较,pNR2B/SNI组术后1周痛行为学症状明显缓解,MWT升高,持续至术后3周.pNR2B组、pSNI组和pNR2B/SNI组血清噬菌体抗体水平高于C组和SNI组(P＜0.05),pNR2B组和pNR2B/SNI组血清NR2B抗体水平明显高于其他3组(P＜0.05).结论 NR2B模拟表位通过诱导SNI致慢性神经病理性痛大鼠产生NR2B抗体,产生明显的镇痛效应.     

穴位贴敷治疗老慢支213例疗效观察

老年慢性支气管炎是一种顽固性老年常见病 ,部分病人合并肺气肿、肺心病 ,治疗更为棘手 ,目前尚无特效治疗方法。 1 994～ 1 997年三伏天 ,我们用穴位贴敷方法治疗 2 1 3例取得较好效果 ,并对其中 1 34例治疗前后分别观察了免疫系统的淋巴细胞绝对值、大颗粒淋巴细胞计数和淋巴细胞酯酶染色阳性率检测 ,1 2 1例作了ＳＯＤ检测 ,均有显著意义 ,现报告如下 :1　一般资料本组病例均按 1 979年 1 1月广州全国慢性支气管炎临床会议修订诊断标准选择 ,其中男 1 0 3例 ,女 1 1 0例 ;年龄最小 43岁 ,最大 79岁 ,平均 62岁 ;病程最短 2年 ,最长 36年 …     

鞘内移植hPPE修饰INPC对大鼠慢性神经病理性疼痛的镇痛效应

目的评价人前脑啡肽原基因(hPPE)修饰永生化大鼠神经前体细胞(INPC)对大鼠慢性神经病理性疼痛的镇痛效应。方法成年雌性Wistar大鼠40只,随机分为5组,Naive组大鼠不进行任何处理;Sham组大鼠仅暴露右侧坐骨神经分支;SNI组大鼠右侧后肢行保留性神经损伤(SNI)手术; INPC组和INPC/hPPE组大鼠分别于SNI术后1周鞘内移植5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-BrdU)标记的INPC或INPC/hPPE细胞。持续观察大鼠疼痛行为学,分别于SNI术前,SNI术后1周～细胞移植后8周内每周测定大鼠50%机械缩爪阈值(MWT)和热缩爪潜伏期(TWL)。于细胞移植后8周,取大鼠L_(4～6)脊髓组织,测定移植细胞5-BrdU、亮氨酸脑啡肽的表达,测定hPPE mRNA表达和亮氨酸脑啡肽的分泌。结果与Naive组比较,SNI组、INPC组SNI术后1周大鼠出现疼痛行为学改变,MWT和TWL降低,并持续到细胞移植后8周;细胞移植后1周,INPC/hPPE组大鼠痛觉异常症状明显减轻,MWT和TWL升高,到细胞移植后2周已基本恢复至正常水平。INPC组和INPC/hPPE组脊髓背角软脑膜和浅层中均可检测到5-BrdU免疫染色阳性细胞;INPC/hPPE组hPPE mRNA表达和亮氨酸脑啡肽的水平高于其它4组(P<0.05)。结论SNI诱导的慢性神经病理性疼痛大鼠鞘内移植hPPE修饰INPC后,可持续分泌高水平的亮氨酸脑啡肽,产生明显的镇痛效应。