腔内修复术治疗复杂型腹主动脉瘤的疗效观察

目的：分析腔内修复术在复杂型腹主动脉瘤患者临床治疗干预中的可行性。方法：选取2021年4月至2023年2月邵阳市中心医院收治的54例复杂型腹主动脉瘤患者作为研究对象,根据手术方式不同将患者分为对照组和观察组,各27例。对照组采用常规开腹手术治疗,观察组采用腔内修复术治疗。比较两组患者治疗效果、血清炎症因子水平、临床指标、术后并发症发生情况。结果：两组患者治疗总有效率比较,差异无统计学意义（P> 0.05）。术后3 d,观察组患者血清炎症因子水平低于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）。观察组患者术中出血量、输血量少于对照组,首次排气时间、开始下床活动时间与住院时间均短于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）。观察组患者术后并发症发生率低于对照组,差异具有统计学意义（P <0.05）。结论：在复杂型腹主动脉瘤患者临床治疗中,腔内修复术治疗方法可取得与开腹手术相同的治疗效果,改善患者临床指标,降低患者术后并发症发生率,缓解患者围术手期的血清炎症因子反应。     

组织工程骨表面微观形貌和生物矿化的实验研究

目的：用绿色荧光蛋白( GFP)标记结合扫描电镜和X射线能谱分析( SEM/EDS)技术对组织工程骨的表面微观形貌和生物矿化进行观测,以评价脱钙骨( DBM )支架体外构建组织工程骨的生物性能。方法用重组腺病毒介导GFP基因转染兔骨髓间充质干细胞( BMSCs)进行示踪标记,细胞与DBM复合经成骨诱导后,通过倒置荧光显微镜对细胞生长情况进行即时观察,结合SEM/EDS技术,观测组织工程骨的表面微观形貌和生物矿化。结果在倒置荧光显微镜下见细胞在DBM支架上能较好的黏附、重叠生长和增殖,体外培养至14 d 时,细胞内 GFP 有较高水平瞬时表达。SEM见DBM呈疏松多孔结构,孔隙直径为300~600μm,孔隙率达90%。 SEM下观察组织工程骨,见细胞在DBM网孔内表面贴壁生长,分泌基质旺盛,并可见粗糙的生物矿化物覆盖支架。 EDS显示其表面为钙、磷沉积物,其钙磷比( Ca/P)为1．46。结论 DBM体外构建组织工程骨有非常好的生物性能,GFP标记结合SEM/EDS技术可以作为DBM体外构建组织工程骨较好的评价手段。     

Ad-BMP-2/GFP转染兔骨髓间充质干细胞前后生物学特性的研究

目的：对Ad－BMP－2／GFP转染兔骨髓间充质干细胞（ BMSCs ）前后的生物学特性进行观察。方法采用密度梯度离心结合贴壁培养法分离获取第10代兔BMSCs,应用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD44、CD45、CD29的表达,用携带BMP2和GFP基因的腺病毒转染细胞。分别通过倒置荧光显微镜下观察转染前后细胞形态改变,MTT 法分析转染前后细胞增殖的情况,体外Ⅰ型胶原免疫组化染色和钙结节茜素红染色以观察转染前后细胞的成骨分化情况,Western Blot 检测转染前后细胞内目的蛋白表达。结果密度梯度离心结合贴壁培养法能获取高纯度第10代兔BMSCs ,流式细胞仪检测显示CD44、CD29阳性,CD45阴性。 Ad－BMP－2／GFP转染兔BMSCs后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,细胞形态向成骨方向分化,在短时间内能促进兔BMSCs 的增殖（P＜0．05）,Ⅰ型胶原免疫组化染色、茜素红染色均呈阳性,Western Blot显示细胞内稳定表达BMP－2目的蛋白。结论 Ad－BMP－2／GFP能成功转染兔骨髓间充质干细胞并能改变其生物学特性。     

腺病毒介导hBMP-2转染BMSCs复合DBM修复兔缺血性股骨头坏死的实验研究

摘要： 目的 评价人骨形态发生蛋白（hBMP） -2/骨髓间充质干细胞（BMSCs）/脱钙松质骨（DBM）对兔股骨头坏 死的修复作用, 探索临床治疗股骨头坏死的新途径。方法 髓芯减压联合液氮冰冻法制备兔股骨头坏死模型。将 造模成功兔随机分为 A、 B、 C、 D 4 组(n=12), A 组不植入材料, 为对照组, B、 C、 D 分别植入 DBM、 DBM/BMSCs、 hBMP- 2/BMSCs/DBM。术后 4、 8 及 12 周各组分别处死 4 只, 运用 X 线技术、 大体标本观察、 HE 染色技术评判股骨头坏死 修复情况。结果 X 线示 A 组股骨头塌陷, 无明显成骨; B、 C、 D 组股骨头缺损区有骨再生现象, 但 D 组再生情况明 显优于 B、 C 组。Lane-Sandhu X 线评分 A 组B、 C 组>D 组 （P < 0.05), B 和 C 组差异无统计学意义。结论 hBMP-2/BMSCs/DBM 植入体内后能 够诱导 BMSCs 向成骨方向分化, 对兔股骨头坏死具有较好的修复效果。     

BMP2重组慢病毒转染兔BMSCs后细胞矿化的实验研究

目的 探讨骨形态发生蛋白2(BMP2)重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化后细胞矿化的能力。方法 密度梯度离心及贴壁培养法获取第5代兔BMSCs，流式细胞仪检测细胞表面标记。将BMSCs分为空白对照组(未转染)、Lv-EGFP组[转染仅携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒]和Lv-BMP2/EGFP组(转染携带BMP2和EGFP基因的慢病毒)。免疫组织化学染色、RT-PCR、Western blot检测BMP2蛋白和基因表达情况；SP法检测Ⅰ型胶原蛋白表达；茜素红染色法检测矿化结节形成；于转染第7、14、21天检测细胞碱性磷酸酶(ALP)水平；通过扫描电镜和能谱分析进一步观测矿化结节表面微观形貌及其主要元素构成。结果 流式细胞仪检测显示第5代BMSCs的细胞表面CD44、CD29表达呈阳性，CD45表达呈阴性；免疫组织化学染色、RT-PCR、Western blot显示Lv-BMP2/EGFP组较Lv-EGFP组及空白对照组能高效表达BMP2目的蛋白和基因，转染第7、14、21天ALP水平较其余2组升高，Ⅰ型胶原染色及茜素红染色均呈阳性，扫描电镜下见矿化结节散...     

BMP2重组慢病毒转染兔BMSCs黏附DBM支架的生物矿化研究

目的 探究BMP2重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)黏附脱钙骨(DBM)支架体外构建转基因组织工程骨的生物矿化能力。方法 密度梯度离心及贴壁培养法获取第5代兔BMSCs,用BMP2重组慢病毒转染细胞，通过RT-PCR检测目的基因的表达，利用倒置荧光显微镜观察细胞在DBM支架上的生长情况，借助扫描电镜和能谱分析观测细胞在DBM支架上的表面微观形貌及生物矿化能力。结果 BMP2重组慢病毒成功转染兔BMSCs, RT-PCR显示转染后细胞能高效表达BMP2目的基因，在倒置荧光显微镜下观察见转染后细胞黏附在DBM支架上呈满天星样，并沿DBM支架孔隙内壁贴壁叠加生长、分裂增殖，扫描电镜下见细胞填满整个DBM支架孔隙，分泌大量细胞外基质，并在DBM支架表面形成凹凸不平的光泽结晶矿化物，能谱分析显示其钙磷比(Ca/P)为1.89±0.31,与正常骨组织成分相近(P>0.05)。结论 BMP2重组慢病毒转染兔BMSCs黏附DBM支架构建的转基因组织工程骨成功完成了生物矿化过程，体现出较好的生物矿化能力。