人急性淋巴母细胞白血病细胞株Molt-4遗传学特性的研究

本研究探讨人急性淋巴母细胞白血病细胞株Molt-4的遗传学特性,评价其在Flow—FISH方法检测细胞端粒长度中的应用价值。悬浮培养Molt-4细胞并进行规律传代,选取8代不同代数、处于对数生长期的Molt-4细胞进行研究。应用细胞计数法描绘细胞生长曲线并计算细胞倍增时间,流式细胞术检测细胞DNA倍体指数,常规G显带进行染色体核型分析,Southernblot检测细胞端粒长度。结果显示：Molt-4细胞的倍增时间为（1．315±0．062）d、DNA倍体指数为（2．085±0．0093）、端粒长度为（32．05±5．27）kb,不同代数之间无显著性差异（P值分别为0．931、0．888和0．935）。染色体核型分析结果显示,Molt-4细胞染色体数量为91—99条,多数为超四倍体,并且具有稳定的、特征性染色体结构异常。结论：Molt-4细胞具有稳定的遗传特性和较长的端粒长度,可作为Flow—HSH的内对照细胞。     

危重患者血小板平均体积及其膜糖蛋白CD62p的临床研究

目的研究危重患者血小板计数、血小板平均体积（MPV）及血小板膜糖蛋白CD62p的关系。方法我院胸心血管外科监护室55例患者，男44例，女11例，按全身炎症反应综合征（SIRS）程度和多脏器功能不全综合征（MODS）分为SIRS2、SIRS3、SIRS4、MODS四组，分别应用HEMACELL Plus全自动二十二项五类血细胞分析仪，通过阻抗法来检测血小板计数、MPV，用流式细胞仪检测血小板糖蛋白CD62p。结果四组患者CD62p均增加，MODS组较SIRS组有增加趋势，但无统计学意义；四组患者MPV逐渐增大；血小板计数四组间比较差异无显著性，但MODS组再分成生存组和死亡组，血小板计数比较差异有显著性。死亡组明显减少。结论动态监测危重患者血小板计数、MPV、CD62p水平均可反映危重患者的病情变化。     

CIK细胞对慢性粒细胞白血病G0期CD34+白血病细胞的杀伤作用

目的研究细胞因子诱导杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)对慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)中G0期原始干细胞(CD34+)的杀伤作用。方法5例CML慢性期患者外周血标本在体外诱导培养CIK细胞,流式细胞仪(FCM)检测其表型。G带法检测CIK细胞核型。应用免疫磁珠技术分选CD34+CML白血病细胞,AO染色后利用FCM检测CIK细胞对G0期CD34+CML白血病细胞的杀伤作用。半固体培养法检测CIK细胞对正常骨髓CFU-GM、BFU-E集落的影响。结果CIK细胞在培养第3周时,CD3+细胞数量达(97.29±3.55)%,CD3+CD56+细胞绝对数量增加了356倍,染色体分析证实,CIK细胞为正常核型,流式细胞仪检测CIK细胞对G0期CD34+CML白血病细胞平均杀伤率为66.73%。对照组与加入CIK细胞组的CFU-GM集落数分别为150±16和145±20,差异无统计学意义,P=0.38;两组的BFU-E集落数分别为68±5和65±8,差异无统计学意义,P=0.23。集落类型、大小两组相似,差异无统计学意义,P=0.46。结论CIK细胞可从CML患者外周血中大量扩增,来源于正常淋巴细胞,对G0期CD34+CML白血病细胞有明显抑制作用,对正常造血前体细胞无抑制作用,可作为过继细胞免疫治疗的效应细胞治疗CML。     

流式细胞仪CD45/SSC设门在儿童急性白血病免疫分型中的应用

目的：探讨CD45／SSC设门方法在儿童急性白血病流式细胞仪免疫表型分析中的优越性。方法：采用CD45／SSC设门的方法确定原始细胞群,与异硫氰酸荧光素和藻红标记的系相关抗体联合进行三色白血病免疫表型分析,并与FSC／SSC设门方法进行比较。结果：CD45／SSC设门与FSC／SSC设门比较能将骨髓原始细胞与正常淋巴细胞、单核细胞及粒细胞明显分开,所得原始细胞比例与形态学分类明显相关,免疫表型分析假阳性发生率低。CD45与异氰酸荧光素和藻红蛋白标记的系相关抗体同时标记,能对白血病细胞群进行多参数分析,更好地反应白血病细胞抗原表达特性。结论：采用CD45／SSC设门,能将骨髓中原始细胞与正常的淋巴细胞和单核细胞明显分开,假阳性发生率低,免疫分型结果可靠。     

CIK细胞对慢性粒细胞白血病G0期CD34+白血病细胞的杀伤作用

目的研究细胞因子诱导杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)对慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)中G0期原始干细胞(CD34+)的杀伤作用.方法5例CML慢性期患者外周血标本在体外诱导培养CIK细胞,流式细胞仪(FCM)检测其表型.G带法检测CIK细胞核型.应用免疫磁珠技术分选CD34+CML白血病细胞,AO染色后利用FCM检测CIK细胞对G0期CD34+CML白血病细胞的杀伤作用.半固体培养法检测CIK细胞对正常骨髓CFU-GM、BFU-E集落的影响.结果CIK细胞在培养第3周时,CD3+细胞数量达(97.29±3.55)%,CD3+CD56+细胞绝对数量增加了356倍,染色体分析证实,CIK细胞为正常核型,流式细胞仪检测CIK细胞对G0期CD34+CML白血病细胞平均杀伤率为66.73%.对照组与加入CIK细胞组的CFU-GM集落数分别为150±16和145±20,差异无统计学意义,P=0.38;两组的BFU-E集落数分别为68±5和65±8,差异无统计学意义,P=0.23.集落类型、大小两组相似,差异无统计学意义,P=0.46.结论CIK细胞可从CML患者外周血中大量扩增,来源于正常淋巴细胞,对G0期CD34+CML白血病细胞有明显抑制作用,对正常造血前体细胞无抑制作用,可作为过继细胞免疫治疗的效应细胞治疗CML.     

重组人粒细胞集落刺激因子对健康供者脾脏大小的影响及其相关因素研究

目的：观察重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）对健康造血干细胞捐献者脾脏大小的影响及其相关因素。方法：28例健康供者皮下注射rhG-CSF5μg/（kg.d）,连续5d动员造血干细胞。在注射前和最后一次注射后第1、7及30天对健康供者进行脾脏超声检查,测量脾脏大小（长径×厚度）;同时计数外周血中性粒细胞数量并检测细胞表面CD11b表达的相对平均荧光强度（MFI）。结果：供者脾脏的大小在注射前为（40.3±3.4）cm2,最后一次注射后第1、7和30天分别为（48.2±6.1）、（47.8±6.6）和（39.2±5.0）cm2,最后一次注射后第1、7天与注射前相比差异均有统计学意义（均P〈0.013）;供者外周血中性粒细胞数量在注射前为（3.4±1.0）×109/L,最后一次注射后第1和7天分别为（29.3±6.9）×109/L和（3.2±0.7）×109/L,最后一次注射后第1天与注射前相比差异有统计学意义（P〈0.017）;中性粒细胞表面CD11b表达的相对MFI在注射前为（57.1±43.5）,最后一次注射后第1和7天分别为（96.8±51.3）和（66.9±30.4）,最后一次注射后第1天与注射前相比差异有统计学意义（P〈0.017）。线性回归分析结果显示,最后一次注射后第1天脾脏的增大与外周血中性粒细胞数量及细胞表面CD11b的表达均具有相关性（r=0.603,P=0.000;r=0.436,P=0.023）。结论：rhG-CSF可使健康供者脾脏在短期内明显增大,这与中性粒细胞数量以及细胞表面CD11b的表达相关。     

α-干扰素联合羟基脲治疗慢性粒细胞白血病的疗效观察

目的探讨ＩＮＦ－α联合羟基脲（ＨＵ）治疗慢性粒细胞白血病的效果。方法对１２例Ｐｈ１阳性和ｂｃｒ／ａｂｌ基因阳性的ＣＭＬ患者进行治疗并定期观察治疗前后血象、骨髓象、染色体和ｂｃｒ／ａｂｌ基因的变化。结果全部病例均达血液学缓解,其中１例达细胞遗传学部分缓解,另１例患者不仅达细胞遗传学完全缓解,而且在治疗１６个月后ｂｃｒ／ａｂｌ基因消失。结论ＩＮＦ－α联合ＨＵ是治疗ＣＭＬ的有效方法,而且能达到分子生物学缓解的效果,早期治疗,ＩＮＦ－α剂量充足和持续的治疗是达到ＣＭＬ长期彻底缓解的重要因素。     

SARS患者在疾病早期CD4+T细胞减少及其临床意义

目的：观察SARS患者在疾病早期CD4^ 细胞的改变及其在疾病的发展及治疗选择中的临床意义。方法：流式细胞仪方法对52例发病10天内确诊为SARS患者的外周血标本进行T细胞亚群的绝对计数检测并动态观察胸部X光病变的变化及疾病转归。结果：在52例患者中，有34例CD4^ 细胞绝对数在正常范围内的患者，病变范围小、病情呈稳定状态，病变吸收快，不需要肾上腺糖皮质激素治疗；另有18例患者出现CD4^ 细胞的绝对值低于正常，其中有13例患者病情呈进展状态，加用肾上腺糖皮质激素治疗，有5例CD4^ 细胞绝对数轻度减低患者，病情处于稳定状态，未加用肾上腺糖皮质激素治疗。两组CD4^ 细胞数经统计学分析P=O．000；CD4^ 细胞数与肺内病变程度的Pearson相关性检验结果为r=-0．737；P=O．000；与糖皮质激素应用的Pearson相关性检验结果为r=-0．573；P=0．000。结论：①SARS患者发病早期外周血CD4^ 细胞绝对计数与肺内病变的程度呈良好的负相关；②CD4^ 细胞绝对数下降明显者需糖皮质激素治疗。     

流式细胞术在非霍奇金淋巴瘤诊断与分型中的应用

 目的　探讨流式细胞术对非霍奇金淋巴瘤（NHL）诊断与分型的临床应用价值。方法　收集临床怀疑淋巴瘤的患者手术切除的新鲜淋巴结59例,流式细胞术（FCM）检测异常单克隆淋巴细胞数量及其免疫表型,分析FCM诊断及分型的结果与病理组织学诊断的符合率。结果　28例病理确诊NHL的淋巴结标本中,FCM检测到有异常克隆性淋巴细胞的24例,异常淋巴细胞的比例为4.28 %～89.10 %,其中确诊B-NHL 23例,T-NHL 1例。FCM对NHL的诊断与病理组织学诊断的符合率为85.71 %;FCM对B-NHL诊断的特异度为100 %,敏感度为92 %。在FCM确诊的24例NHL中,根据异常细胞表型进一步分型,与病理诊断均相符。结论　FCM能准确确定克隆性淋巴细胞,协助诊断NHL,并在B-NHL的分型和鉴别诊断中起重要作用。     

急性髓系白血病细胞免疫表型与疾病复发的关系

  目的　探讨急性髓系白血病（AML）细胞免疫表型与疾病复发的关系。方法　采用回顾性方法,对54例经标准化疗至少2个疗程达完全缓解的AML（非M3）患者的四色流式细胞术细胞免疫表型结果进行分析,评估22例复发AML患者发病时白血病细胞CD7、CD19、CD56、CD34、CD117、HLA-DR、CD11b、CD14、CD15、CD33、CD13的表达,同时与32例非复发AML患者的免疫表型进行对比。结果　22例复发患者AML抗原表达情况：CD7 27.3 %,CD19 28.6 %,CD56 81.8 %,CD34 68.2 %,CD117 90.0 %,HLA-DR 85.7 %,CD11b 27.3 %,CD14 14.3 %,CD15 16.7 %,CD33 95.5 %,CD13 90.9 %;32例非复发AML患者抗原表达情况：CD7 32.0 %,CD19 8.0 %,CD56 35.7 %,CD34 64.0 %,CD117 81.0 %,HLA-DR 91.3 %,CD11b 43.5 %,CD14 20.8 %,CD15 28.6 %,CD33 91.3 %,CD13 92.0 %;CD56表达与复发相关（RR＝8.1,95 % CI＝1.2～53.2,P＝0.021）,其余各抗原与复发无相关性（P＞0.05）。结论　AML发病时白血病细胞CD56表达与疾病复发密切相关。