siRNA阻断Stat3信号促进食管鳞癌细胞株凋亡

目的：研究RNA干扰技术沉默Stat3基因对食管鳞癌细胞（EC9706）中持续性激活Stat3信号的阻断作用及对细胞凋亡的影响。方法：将化学合成的100nM的Stat3 siRNA转染EC9706细胞,RT-PCR检测转染前后Stat3 mRNA的表达,Western blot检测转染前后细胞中Bcl-2、Stat3及磷酸化Stat3（p-Stat3）蛋白的表达,凝胶电泳迁移率（EMSA）检测转染前后活化Stat3蛋白的DNA结合活性,流式细胞术检测转染前后细胞凋亡的改变情况。结果：Stat3 siRNA转染细胞48h后细胞形态发生明显的改变,RT-PCR及Western blot结果显示Stat3 siRNA干扰后Stat3mRNA及蛋白表达均受到明显抑制, Stat3信号的激活被阻断,活化Stat3蛋白的核结合活性显著下降。转染后细胞中Bcl-2蛋白的表达明显减少。流式细胞术结果证明Stat3 siRNA可明显促进细胞凋亡。结论：Stat3 siRNA能够特异地阻断食管鳞癌细胞中Stat3 信号的持续性激活并促进肿瘤细胞凋亡。     

距骨骨折的手术治疗及疗效分析

目的 探讨距骨骨折手术治疗的方法及疗效.方法 本院手术治疗距骨骨折53例,其中45例获得随访.其中男39例,女6例;年龄7 ～53(38.71±10.16)岁.克氏针固定5例,空心螺钉固定23例,可吸收螺钉固定17例.距骨头骨折6例,距骨颈骨折28例,距骨体骨折11例.结果 45例患者随访时间12 ～51(21.65 ±8.37)个月,AOFAS评分56～99(85.69±17.34)分.优14例,良20例,可8例,差3例,优良率为75.6％.克氏针固定组优良率(40.0％)低于空心螺钉(78.3％)、可吸收螺钉固定组(82.4％),距骨头组优良率(100％)高于距骨颈(71.4％)、距骨体组(72.7％),但差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 距骨骨折选择合理的手术入路,认真评估软组织损伤情况,选择恰当的内固定方法,可以有效提高患者愈后功能,降低距骨术后坏死率.     

血清FS及CA125用于卵巢癌诊断的比较研究

目的比较卵泡抑素(Follistatin,FS)及CA125在卵巢癌患者血清中的水平变化及其临床意义。方法分别采用ELISA法和电化学发光法检测卵巢癌、卵巢囊肿患者及健康对照者血清FS及CA125水平,ROC曲线分析二者用于卵巢癌诊断的准确性。结果卵巢癌患者血清FS水平明显高于健康对照组,统计学比较差异显著,P<0.01。以健康对照组血清FS及CA125水平的95%可信区间判断卵巢癌患者血清FS水平,显示血清FS用于卵巢癌诊断时灵敏度为53.3%,特异性为97%;血清CA125的诊断灵敏度为77.8%,特异性为84%;血清FS用于卵巢癌诊断时ROC曲线下面积为0.902,略大于CA125的ROC曲线下面积(0.886)。结论卵巢癌患者血清FS水平升高,与血清CA125水平具有相关性,其用于卵巢癌诊断时准确性与CA125相近,特异性优于CA125。FS是一个很有应用前景的卵巢癌血清诊断标记物,与CA125联合应用有助于降低卵巢癌的误诊率。     

A／E大肠杆菌LEE致病鸟

致病岛 (ｐａｔｈｏｇｅｎｅｃｉｔｙｉｓｌａｎｄ)是细菌染色体上编码毒力相关基因的特殊区域 ,是在细菌学领域对致病性细菌致病机理的研究中出现的一个新概念 ,是某些致病性细菌在进化过程中适应环境的变化而获得的毒力基因。人们发现在许多病原性细菌中都存在着致病岛 ,致病岛通常具有以下特点〔1〕:(1)致病岛是一组编码细菌毒力因子的基因簇 ,是染色体上一个分子量较大的片段 ;(2 )致病岛两端通常具有重复序列 (ＲＳ)或插入元件 (ＩＳ) ;(3)Ｇ Ｃ含量与宿主菌染色体Ｇ Ｃ含量有明显差异 ;(4 )不稳定 ,含有潜在的可移动元件 ;(5 )通常…     

四川资阳地区猪链球菌2型检测及其特性比较研究

目的对从四川省资阳及附近猪链球菌2型感染疫区采集的病料进行病原菌分离和特性比较研究。方法首先利用病原菌分离技术、多重定性PCR检测和荧光定量PCR检测技术进行病原菌的分离和鉴定;然后选取5株主要疫点代表菌株与1株国外参考菌株进行细菌药敏试验和实验动物腹腔接种感染试验;此外还对猪链球菌2型分离株基因组中的溶原性噬菌体进行了初步研究。结果(1)从采集的病料中分离到11株猪链球菌2型菌,都具有胞外因子(EF)和溶菌酶释放蛋白(MRP)两个特征性毒力因子;(2)6株试验菌株对氨苄青霉素、先锋必素、头胞克肟、乙酰螺旋霉素、万古霉素、复方新诺明和利福平等7种抗生素高度敏感。与国外参考菌株相比,资阳分离株具有链霉素抗性;(3)试验菌株对BALB/c鼠均具有一定的毒力,但毒力程度上有差异。资阳分离株449-1和国外参考株6#对鼠具有相同的强致死性(3/3死亡),资阳458分离株致死性较弱(0/3死亡),其它菌株具有中等强度的致死性。利用449-1、458和6#分离株进行家兔感染实验,各菌株均可引起家兔感染发病,死亡率分别是1/2、2/2和2/2;(4)国内首次获得了猪链球菌2型流行菌株匿藏着溶原性噬菌体的证据,该噬菌体与细菌毒力和适应性的关系有待深入研究。结论通过对资阳及附近地区猪链球菌2型分离株与国外分离株特性的比较研究,明确了流行菌株间在毒力和药物敏感性上存在着差异,细菌毒力差异表现为对动物种属的嗜性,并筛选出了猪链球菌病防治的可选择性药物。为进一步研究猪链球菌2型菌株的致病机理以及猪链球菌病的防治奠定了基础。     

叶酸修饰麦角甾酮脂质体的制备及体外评价和药动学研究

 目的 研究叶酸修饰的麦角甾-4, 6, 8, 22-四烯-3-酮脂质体的制备工艺,考察其体外释放行为、对肿瘤细胞的毒性和靶向性,并进行体内药动学研究。方法 采用薄膜分散-超声法制备了叶酸偶联麦角甾酮脂质体;用透射电镜、粒径分析仪和高效液相色谱法(HPLC)对其进行表征;以动态透析法测定其体外释药特性及血浆对释放行为的影响;四甲基偶氮唑盐（MTT）法考察叶酸偶联麦角甾酮脂质体对宫颈癌细胞（HeLa）的体外毒性作用,并结合肿瘤细胞摄取实验考察其经叶酸受体介导的靶向性;HPLC测定灌胃后大鼠血药浓度,采用DAS2.0软件计算药动学参数,并进行统计分析。结果 叶酸偶联麦角甾酮脂质体形态呈球形,粒径分布窄,均匀圆整,平均粒径为112 nm,药物包封率达73%;体外释放介质中,药物释放曲线符合Higuchi方程,具有长效缓释性能;在与HeLa的相互作用中,麦角甾-4, 6, 8, 22-四烯-3-酮、麦角甾酮脂质体、叶酸偶联麦角甾酮脂质体的IC₅₀值分别为10,14,5 μg·mL^-1;脂质体剂型显著增加了麦角甾-4, 6, 8, 22-四烯-3-酮的AUC,延长了其在血液循环中的时间。结论 叶酸作为导向分子提高了叶酸偶联麦角甾酮脂质体的靶向性,使叶酸偶联麦角甾酮脂质体主动靶向作用于宫颈癌细胞（HeLa）,降低了给药浓度,制成叶酸偶联麦角甾酮脂质体显著提高了麦角甾-4, 6, 8, 22-四烯-3-酮的生物利用度,可望用于肿瘤的靶向治疗。     

NF-κBp65对食管鳞癌细胞上皮间质转化的影响*

目的:探讨NF-κ Bp65对食管鳞癌细胞EC9706上皮间质转化的影响。方法:NF-κ Bp65反义寡核苷酸（NF-κBp65-ASODN ）转染食管鳞癌细胞EC9706,采用RT-PCR、免疫细胞化学及流式细胞术检测NF-κ Bp65-ASODN 转染前后EC9706细胞中NF-κ Bp65、上皮性标志物E-cadherin 及间质性标志物Vimentin mRNA 及蛋白表达的变化,观察转染前后细胞形态学的改变,细胞划痕实验检测转染前后细胞运动能力的变化。结果:转染NF-κ Bp65-ASODN 的EC9706细胞,其NF-κ Bp65mRNA（0.14±0.06）及蛋白（免疫细胞化学:11.33± 1.40% ,流式细胞术:11.78%）的表达低于转染前（mRNA :0.45± 0.05;蛋白:免疫细胞化学:17.17± 1.66% ,流式细胞术:15.76%）（P<0.05）,上皮性标志物E-cadherin mRNA（0.36± 0.08）及蛋白（免疫细胞化学:17.58± 1.86% ,流式细胞术:14.98%）的表达高于转染前（mRNA :0.22± 0.06;蛋白:免疫细胞化学:14.42± 1.63% ,流式细胞术:12.22%）（P<0.05）,间质性标志物Vimentin mRNA（0.75± 0.07）及蛋白（免疫细胞化学:16.00± 1.41% ,流式细胞术:12.90%）的表达低于转染前（mRNA :0.89± 0.09;蛋白:免疫细胞化学:19.50± 0.89% ,流式细胞术:17.76%）（P<0.05）。 转染NF-κ Bp65-ASODN 后,EC9706细胞形态发生改变,细胞迁移距离（0.45± 0.08）较转染前（0.81± 0.11）明显缩短（P<0.05）。 结论:NF-κ Bp65可能参与食管鳞状细胞癌的上皮转化。NF-κ Bp65-ASODN 转染可抑制食管鳞癌细胞上皮间质转化,上皮性标志物E-Cadherin 表达上调、间质性标志物Vimentin 表达下调,且细胞形态发生改变、细胞运动能力降低。      

胰岛素泵联合个性化饮食方案治疗妊娠期糖尿病对母婴结局的影响

目的探讨胰岛素泵联合个性化饮食方案治疗妊娠期糖尿病(GDM)对母婴结局的影响。方法收集该院2012年1月-2014年7月收治的GDM患者220例,随机分为试验组和对照组各110例。对所有患者进行常规治疗和护理,并使用胰岛素泵进行治疗,试验组患者在此基础上联合个性化饮食治疗,治疗后密切随访观察,比较2组患者血糖水平及不良分娩结局发生情况。结果治疗后试验组孕妇空腹血糖和餐后2h血糖水平控制更好,低于对照组,血糖控制时间短于对照组,酮症酸中毒和妊娠高血压综合征的发生率均低于对照组,试验组妊娠孕周长于对照组,胎盘早剥、巨大儿的发生率低于对照组,围生儿出生体质量低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论GDM患者在治疗时使用胰岛素泵联合个性化饮食的方法,可更有效地控制血糖,并减少不良结局的发生,具有良好的应用价值。     

从药对的角度考察复方配伍规律

复方的配伍规律是中药方剂理论的核心问题，也是国家自然科学基金近年连续资助的重点方向之一。本文从复方中特定的两味药的配伍形式——药对出发，阐述药对的概念、特点及其在复方配伍规律研究中的作用、优势和意义。作者认为：药对配伍的研究是复方配伍规律研究的基础和重要切入点之一。     

肺结核治疗现状及展望

众所周知,肺结核是因感染结核分枝杆菌而引起的一种呼吸道慢性传染病.据世界卫生组织2010年报告,全球约有20亿人曾感染结核分枝杆菌,约有2 000万人为活动性肺结核患者.我国是肺结核病高发地区之一,且具有高感染率、高耐药率、低递减率、中青年患病多及地区患病差异大的特点.