人腺样囊性癌细胞系体外NT-3分泌水平的测定

目的研究体外培养的ACC细胞系中神经营养素-3（neurotrophin-3,NT-3）的分泌情况。方法应用酶联免疫吸附测定法检测NT-3在ACC细胞系体外的分泌水平。收集ACC-M、ACC-2、M3SP4、L929 4个细胞系无血清培养的上清液,用ELISA法检测上清液中NT-3的含量。将各组细胞培养上清液中NT-3的分泌水平采用SNK-q检验进行实验组之间、实验组与对照组之间的多重比较。结果阴性对照组未检测到NT-3的表达;ACC-M、ACC-2细胞培养上清液中NT-3的分泌水平与阴性对照组比较有显著统计学意义（P〈0.01）;M3SP4,及L929细胞培养上清液中NT-3的分泌水平与阴性对照组比较无显著统计学意义（P〉0.05）。ACC的两个细胞系ACC-M、ACC-2细胞分别与其他细胞系（人粘液表皮样癌高转移M3SP4细胞系、小鼠肺纤维瘤L929细胞系）NT-3的分泌水平两两比较均存在显著性差异（P〈0.01）。ACC-M细胞培养上清液中NT-3的含量与ACC-2细胞比较无显著性差异（P〉0.05）。结论体外培养的ACC细胞能分泌一定浓度的NT-3,NT-3可能在ACC的嗜神经侵袭中发挥重要作用。     

CDK2AP1基因的激光捕获显微切割应用研究

目的探索联合激光捕获显微切割(lacer capture microdissection,LCM)与RT-PCR在人口腔鳞癌CDK2AP1基因表达研究中的可行性。方法采用LCM技术从人口腔鳞癌组织冰冻切片中获取肿瘤细胞,提取RNA,并对微量RNA进行纯化。然后用RT-PCR验证总RNA中β-actin及CDK2AP1基因表达水平。结果经LCM后总RNA保持较好完整性;RT-PCR验证β-actin及CDK2AP1基因表达完整。结论通过有效的RNA保护方法,使用LCM技术能成功地获取较为均一的研究目的细胞,RNA完整性较好,能用于人口腔鳞癌CDK2AP1基因研究。     

rhBMP-2复合制剂用于犬牙根尖诱导成形术的实验研究

目的观察使用基因重组人骨形成蛋白-2、Ⅰ型胶原和羟基磷灰石（rhBMP-2/Co/HA）的复合制剂作为根尖诱导剂,用于犬牙牙根未发育完成的年轻恒牙的慢性根尖周炎的根管充填,观察其根尖诱导效果。方法制备杂种家犬牙根未发育完成的年轻恒牙慢性根尖周炎的动物实验模型。用rhBMP-2/Co/HA复合制剂作为根尖诱导剂充填到犬牙的根管内,对照组用氢氧化钙糊剂。12周后用X线片及组织学方法观察2种不同的根尖诱导剂根管充填后牙根延长、根尖封闭的效果。结果实验组全部牙根延长,根尖形成并闭合,闭合率100%;对照组45个牙根延长,根尖形成并闭合,闭合率93.75%;实验组和对照组的根尖闭合率无显著差异（P〉0.05）,且根尖均有不同程度的硬组织形成。结论 rhBMP-2/Co/HA复合制剂具有良好的生物活性和根尖诱导作用。     

神经营养素-3对腺样囊性癌细胞体外迁移能力的影响

目的研究神经营养素-3对人涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M体外迁移能力的影响.方法应用Transwell培养小室测定不同浓度NT-3对ACC-M细胞的体外迁移能力的影响.结果 ACC-M细胞与2.5,5,10 ng/ml的NT-3共培养10 h后迁移细胞数均明显多于未加NT-3组;而与浓度为100 ng/ml的NT-3共培养10 h后迁移细胞数却明显少于未加NT-3组.结论 NT-3对ACC-M细胞体外迁移能力的影响存在浓度依赖性.一定浓度的NT-3能够增强ACC-M细胞的体外迁移能力.     

由异种骨制备的多相钙磷陶瓷肌内降解性能的研究

目的：观察两种不同比例羟基磷灰石(HAP)／β-TCP／NaCaPO4的多相钙磷陶瓷降解情况。方法：通过物理、化学方法将煅烧的鸵鸟松质骨转化为HAP／β-TCP／NaCaPO4多相钙磷陶瓷。通过不同剂量焦磷酸钠处理得到不同比例的HAP／β-TCP／NaCaPO4陶瓷，然后将陶瓷材料植入兔背部肌袋内，未处理的煅烧骨植入作为对照。于4、12、24周取材，测定材料降解率(失重率)，从大体、组织学观察以了解材料降解情况。结果：随着β-TCP和NaCaPO4比例的增加，材料降解率提高。植入后4周材料轻度降解，12、24周降解加快，24周的组织学切片观察显示HAP／β-TCP／NaCaPO4陶瓷崩解。崩解后的材料碎片散在于新生纤维组织间隙内。部分区域材料几乎全部吸收，并被纤维组织所取代。结论：制备的鸵鸟多相钙磷陶瓷在肌肉内有部分降解性能，通过控制HAP／β-TCP／NaCaPO4的比例可获得不同降解速率的陶瓷材料。     

GST-P12融合蛋白的抗体制备、鉴定及免疫组化分析

目的：为了进一步研究p12DOC-1基因及其蛋白在口腔癌发生中的作用与调控机制,将已表达纯化好的GST-p12融合蛋白进行多克隆抗体的制备及鉴定.方法：将构建好的融合表达载体pGEX-4T-1-DOC-1转化BL21（DE3）型大肠杆菌,用IPTG诱导表达,得到GST-p12融合蛋白,经亲和层析柱纯化后电泳,再割胶研磨作为抗原直接免疫家兔,经Western blot及ELISA检测抗体效价及特异性并做免疫组化分析.结果：得到较高纯度的GST-p12融合蛋白,获得了兔来源的抗p12DOC-1血清,经蛋白免疫印迹杂交反应及免疫组化分析证实所得的抗体具有较高的特异性和效价.结论：成功制备了兔抗人的p12DOC-1抗血清,为进一步研究p12DOC-1在口腔癌中发生缺失的机理打下基础.     

两种人源性doc1基因真核表达重组质粒的构建及表达

目的:构建p12蛋白真核表达重组载体,为基因治疗口腔癌提供基础研究。方法:反转录-聚合酶链式反应克隆出doc1基因ORF读框,两端连入酶切位点,导入真核表达载体pT7-FLAG-4及pEGFP-N1。结果:重组子pT7-FLAG-4-doc1及pEGFP-N1-doc1经限制性酶切分析,PCR鉴定和序列测定为正确重组质粒。结论:成功构建p12蛋白真核表达重组质粒pT7-FLAG-4-doc1及pEGFP-N1-doc1,为今后瞬时和稳定转染细胞提供基础。     

腺样囊性癌细胞SACC-83细胞对雪旺氏细胞趋化移动的影响

目的：观察腺样囊性癌细胞在雪旺氏趋化移动中的作用,并探讨腺样囊性癌的嗜神经侵袭机制。方法：将雪旺氏细胞接种于Transwell小室上室,下室分别加入腺样囊性癌细胞、人舌癌细胞及成纤维细胞条件培养液,空白对照组下室中DMEM培养液无细胞条件培养液,于孵箱中孵育10h后计数移动到下室的雪旺氏细胞数。结果：与人舌癌细胞组、成纤维细胞组及空白对照组相比,腺样囊性癌细胞组中移动到下室的雪旺氏细胞数显著增加,而人舌癌细胞组、成纤维细胞组及空白对照组间移动到下室的雪旺氏细胞数无显著差别。结论：腺样囊性癌细胞产生的某种物质可促进雪旺氏细胞趋化移动,可能参与腺样囊性癌嗜神经侵袭机制。     

口腔颌面部恶性肿瘤治疗指南

口腔颌面部恶性肿瘤约占全身恶性肿瘤的3%～5%,其组织病理学类型多样,以鳞状细胞癌最多见,约占90%以上。由于解剖部位特殊,口腔颌面部恶性肿瘤不仅影响外观,而且造成咀嚼、吞咽、呼吸和语音等功能障碍,严重降低患者的生存质量,并危及生命。手术、放疗和化疗是治疗口腔颌面部恶性肿瘤的3大治疗手段,免疫治疗、生物治疗对某些类型的肿瘤和晚期患者是必要的补充和辅助措施。早期患者以手术治疗为主,晚期患者则提倡综合序列治疗,并鼓励患者参加临床试验。口腔颌面部恶性肿瘤患者的5年总生存率在65%左右,晚期患者的5年生存率不足30%。为了规范口腔颌面部恶性肿瘤的治疗,进一步提高患者的远期生存率,中华口腔医学会口腔颌面外科专业委员会肿瘤学组牵头,组织国内从事口腔颌面部恶性肿瘤治疗的知名专家,参考国内外文献,尤其是2009年美国NCCN指南中的相关内容,撰写了《口腔颌面部恶性肿瘤治疗指南》,希望对口腔颌面部恶性肿瘤的规范治疗起到指导作用。随着医学科学技术的发展,新的技术、方法、药物会不断出现,本指南将及时予以更新,以反映和纳入最新的研究成果,为广大患者提供最新的治疗方案。     

同种异体骨基质明胶治疗鞍鼻畸形的疗效观察

目的：研究同种异体骨基质明胶治疗鞍鼻畸形的可行性。方法：无菌下取人体四肢长骨骨皮质，液氮冷冻10min。骨皮质经氯仿、甲醇脱脂，盐酸脱矿，氯化钙、乙二胺四乙酸、氯化锂处理制备成骨基质明胶。23例患者接受了骨基质明胶植入鼻成形术，其中先天性鞍鼻畸形16例，外伤性鞍鼻畸形7例。结果：经0．5-6年的随访，骨基质明胶植入物无变形或免疫排斥反应，虽有轻微吸收，但外形满意。结论：骨基质明胶植入治疗鞍鼻畸形有临床应用价值。