纳米磁粒子复合物标记对内皮祖细胞生物学特性影响的实验研究

目的 探讨超顺磁性纳米磁粒子复合物Fe2O3-多聚赖氨酸(PLL)标记外周血内皮祖细胞(EPCs)后对细胞生物学特性的影响,为标记细胞的体内外MRI提供实验基础.方法 合成Fe2O3-PLL复合物.分离兔外周血单个核细胞,贴壁法筛选出EPCs,25 mg/L的Fe2O3-PLL标记EPCs,普鲁士蓝染色、电子显微镜观察细胞内铁,四氮噻唑蓝(MTT)比色试验比较未标记、标记细胞间生长曲线的差异,流式细胞分析检测标记、未标记细胞的细胞周期变化、细胞凋亡、表面标记物表达情况,实时定量聚合酶链反应(PCR)检测标记、未标记细胞的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、KDR、血管性假血友病因子(vWF)基因在mRNA水平上的差异,激光共聚焦显微镜下观察并分析标记、未标记细胞的Ca2+浓度、膜流动性变化.实验所得数据,计量资料多组比较采用方差分析,两组间比较采用两样本t检验.结果 Fe2O3-PLL对细胞的标记率接近100%,铁颗粒位于细胞质内.25 mg/LFe2O3-PLL标记细胞,其生长曲线、细胞周期[G0-G1期为(93.74±3.52)%]、细胞凋亡[早期凋亡率为(12.89±1.81)%]与未标记细胞[细胞周期为(94.57±3.66)%,细胞凋亡率(11.67±1.18)%]相比,差异无统计学意义(t值分别为0.283、0.977、P值均>0.05);eNOS、KDR、vWF基因的相对表达量及CD34、CD106、CD146、KDR等细胞表面标记物的表达水平相比差异也无统计学意义(P值均>0.05);对Ca2+通道影响小,细胞膜流动性无明显变化.结论 25 mg/L的Fe2O3-PLL对兔外周血EPCs的标记率接近100%,并且对细胞的生物学特性无明显影响,可用于进一步MRl的研究.     

兔外周血内皮祖细胞的分离培养及鉴定

内皮细胞(EC)构成正常的血管壁,内皮祖细胞(EPCs)是EC的前体细胞,可在体内、外分化为成熟EC。本研究以新西兰兔外周血为研究对象,探索分离、培养、扩增EPCs的方法,以期为细胞治疗为主的血管性疾病治疗提供实验基础。     

寰枢关节旋转脱位的影像学表现

寰枢关节旋转脱位比较常见，由于对本病的影像学认识尚不足，有可能漏诊而造成严重后果。复习近期献，对其解剖学基础、发病机制、临床表现、影像学表现和治疗概况进行综述。     

经颈静脉肝内门体分流术治疗门静脉血栓形成伴急性消化道大出血效果评价北大核心CSCD

目的 评价经颈静脉肝内门体分流术(TIPS)治疗门静脉血栓形成(PVT)伴消化道大出血的可行性及临床效果。方法 回顾性分析2015年3月至2017年3月采用TIPS术治疗的18例PVT伴消化道大出血患者临床资料,观察围手术期并发症发生率、再出血率、血栓开通情况、肝性脑病发生率、支架中远期通畅率。结果 所有患者均在消化道大出血72 h内成功完成TIPS术,手术成功率100%。围手术期死亡率5.5%(1/18),术后发生Ⅰ~Ⅱ级肝性脑病5例(27.8%,5/18)。术后随访6~24个月,平均12.4个月,PVT完全消失6例,明显减少7例,无明显进展4例;所有患者支架均通畅,2例出现支架内狭窄,其中1例无出血,未予处理,1例术后8个月再出血,予球囊扩张修复术后出血停止。结论 TIPS术治疗PVT伴急性消化道大出血安全、有效,值得推广。     

超顺磁性氧化铁MR成像检测兔动脉粥样硬化斑块的实验研究

目的探讨超顺磁性氧化铁(SPIO)作为磁共振成像(MRI)示踪剂使动脉粥样斑块成像的可行性。方法采用高脂饲养结合球囊损伤颈动脉血管内皮的方法,建立兔颈动脉粥样硬化模型。10只动脉粥样硬化模型兔分为2组,实验组(A)5只,经外周静脉注射SPIO(1 mmol/kg);对照组(B)5只,经外周静脉注射等量生理盐水。分别于24 h、48 h及72 h后行MRI扫描检查,然后行损伤颈动脉的病理组织学检查。结果在外周静脉注射超顺磁性氧化铁24 h后,A组中3只兔的T2*WI显示损伤的血管壁呈明显低信号区,血管腔明显呈"管腔扩大样"改变;B组则无明显异常信号改变;病理学检测显示A组5只MR信号改变实验兔的损伤血管内膜及斑块组织中有Perl’s蓝染色阳性颗粒;B组粥样斑块组织中则无该染色阳性颗粒,2组间Perl’s蓝染色阳性颗粒差异有统计学意义(P<0.05)。结论超顺磁性氧化铁可以靶向动脉粥样硬化斑块中的巨噬细胞,可作为MRI示踪剂使活体兔的动脉粥样硬化斑块成像,为动脉粥样硬化斑块的临床分子成像提供了实验依据。     

SD大鼠骨肉瘤坏死区DWI的实验研究初探

目的:建立SD大鼠骨肉瘤模型,初步探讨DWI显示肿瘤坏死的价值。方法:将UMR-106细胞悬液接种于Sprague Dawley大鼠背部皮下,其中4周龄者16只,6周龄和8周龄者各4只。对所形成的肿瘤行MRI常规扫描、增强扫描及EPI-DWI成像并做病理对照。比较活肿瘤细胞区和坏死区的T1信号强度、T2信号强度、T1信号增加值、T1信号增强率及ADCm。结果:16只4周龄者均有肿瘤形成,6周龄者和8周龄者没有可用于实验的肿瘤形成。16只肿瘤形成者的MR扫描显示,活肿瘤细胞区和坏死区的T1、T2信号强度值之间差异无显著性意义(P>0.05)。两种组织的T1信号增加值、T1信号增强率之间差异有显著性意义(P<0.05)。两种参数确定肿瘤坏死区的敏感度为86.7%(13/15),特异度为38.5%(15/39),诊断符合率为51.9%(28/54)。活肿瘤细胞区与坏死区的ADCm之间差异有显著性意义(P<0.05),ADC值确定肿瘤坏死区的敏感度为93.3%(14/15),特异度为94.9%(37/39),诊断符合率为94.4%(51/54)。结论:EPI-DWI较传统MRI序列及增强扫描能更准确早期分辨SD大鼠骨肉瘤坏死区。     

经脾移植SPIO-PLL标记的诱导后大鼠胰岛素分泌细胞及MR示踪研究

目的 超顺磁性氧化铁颗粒及多聚左旋赖氨酸复合体(SPIO-PLL)标记诱导后的大鼠胰岛素分泌细胞,移植入正常大鼠脾,应用1.5 T MR仪进行活体成像,为胰岛素分泌细咆移植后的活体示踪提供依据.材料与方法将大鼠骨髓间质干细胞(BMSCs)体外诱导成胰岛素分泌细胞,SPIO-PLL标记细胞.10只受体大鼠分二组,每组5只.将标记后的胰岛素分泌细胞(标记组)和未标记的胰岛素分泌细胞(未标记组)分别移植入脾.各组分别于移植前、移植后5天、10天、14天及21天对脾进行T1WI、T2WI、T2*WI三个序列MR扫描,观察脾信号改变情况,在T2*WI序列测量移植部位脾信噪比(SNR),与各时间点脾组织切片普鲁士蓝染色对照.结果 与移植前相比,标记组脾移植部位SNR值明显降低,差异有统计学意义(F=182.92,P<0.05),但移植后各时间点SNR值差异无统计学意义(Bonferroni法,P>0.05).未标记组脾移植前后SNR值差异无统计学意义(F=0.98,P>0.05).脾组织切片普鲁士蓝染色显示标记组染色阳性部位沿注射针道分布,与MRI信号降低区域基本一致.结论 SPIO-PLL可以有效标记诱导后大鼠胰岛素分泌细胞.临床应用型1.5 T MR仪可对经脾移植的标记细胞进行活体示踪.     

香港肝癌分期对TACE联合索拉非尼治疗中国人群的预后预测作用

【摘要】 目的 评估和比较香港肝癌分期（HKLC）和巴塞罗那肝癌（BCLC）分期对TACE联合索拉非尼治疗中国肝细胞癌（HCC）人群的预后预测作用和适用性。方法 纳入2014年1月至2018年12月430例初发行TACE联合索拉非尼治疗的HCC患者，基于总体生存时间计算并比较HKLC和BCLC分期的生存鉴别能力［Harrell C值和赤池信息量准则（AIC）］、单调性（线性卡方检验）、一致性（似然比卡方检验）、校准能力［验证队列与原始预测的校正图（R2）］。结果 入组人群的生存时间为13.8（12.4，15.2）个月，基于5亚组分类的HKLC-5、基于9亚组分类的HKLC-9及BCLC分期各自亚组间的生存时间差异有统计学意义（P＜0.01）。HKLC-9在生存鉴别能力（HKLC-5:C=0.662， AIC=2 906.350； HKLC-9: C=0.682， AIC=2 904.269； BCLC:C=0.682， AIC=2 911.836）和一致性（HKLC-5、HKLC-9、BCLC的似然比卡方检验值分别为67.389、69.325、63.980）方面表现最佳，BCLC在单调性方面表现最佳（HKLC-5、HKLC-9、BCLC的线性卡方检验值分别为15.975、17.550、26.549），3个分期均显示较高的校准能力。结论 相比于BCLC分期，HKLC分期更适合预测接受TACE联合索拉非尼的中国HCC人群的预后。     

肝干细胞分子免疫学若干研究进展

肝干细胞是一种具有双向分化能力和自我更新能力的细胞。肝干细胞分化过程和机理较为复杂,肝干细胞分子免疫学的研究成为肝干细胞研究的重要方面。现对近年来相关文献作一回顾,重点阐述肝干细胞分子机制研究进展。     

CT导引纳米刀消融猪肝脏可行性实验研究

目的 评估CT导引经皮纳米刀消融猪肝组织的可行性及安全性.方法 10头成年巴马小型猪随机分为实验组(n=7)和对照组(n=3),全身麻醉下将NanoKnife纳米刀双针电极经CT导引穿刺至肝脏肝门区及肝脏近胆囊处,依标准参数进行消融.术后2h、2d、7d、14 d取材作生化、病理学检查.结果 所有实验过程均顺利,未出现出血、感染、气胸、死亡等严重并发症,所有实验猪均存活至实验终点.生化指标检测提示肝功能及心肌酶谱指标出现一过性升高,消融后14 d逐渐恢复正常;病理学检查提示消融后2d内消融区细胞完全死亡,血管内皮轻度损伤,2d后产生再次内皮化,14 d后平滑肌细胞重新长入.结论 纳米刀消融邻近肝门大血管、胆管、胆囊的猪肝脏组织是安全可行的,为纳米刀技术临床应用提供了大动物实验依据.