TRIzol（或TriPure）试剂结合QIAamp Viral RNA Mini试剂盒用于血标本中病毒RNA提取的研究

目的 建立一种安全、简便、可靠的适用于血标本中有包膜RNA病毒核酸提取的方法,保证埃博拉病毒核酸筛查的实验室安全,提高标本的核酸检测效率.方法 根据已发表可完全灭活埃博拉病毒的方法,通过实时荧光逆转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）方法,比较分析QIAamp Viral RNA Mini试剂盒、TRIzol（或TriPure）试剂裂解样本并用或不用氯仿萃取后结合QIAamp Viral RNA Mini试剂盒等3种方法提取核酸的效率,优化反应步骤,建立一种安全、简便的血标本中病毒RNA提取方法.结果 血标本经TRIzol（或TriPure）试剂处理后,不经氯仿萃取,与QIAamp Viral RNA Mini试剂盒结合,提取病毒RNA,RNA提取效率优于QIAamp Viral RNA Mini试剂盒和美国CDC推荐的方法.结论 采用TRIzol（或TriPure）试剂裂解病毒,结合QIAamp Viral RNAMini试剂盒提取病毒RNA的方法简便、可靠,可用于埃博拉出血热相关标本的核酸检测.     

SFTS病毒、登革病毒、汉滩病毒快速荧光定量RT-PCR检测方法的建立及评价

目的:建立针对发热伴血小板减少综合征病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)、登革病毒(dengue virus, DENV)、汉滩病毒(hantaan virus,HTNV)三种常见病毒性出血热病毒的现场应急快速检测方法。方法:基于传统的T...     

重症肺炎并发横纹肌溶解症与急性肾衰竭的诊断治疗并文献复习

目的探讨肺炎并发横纹肌溶解症、急性肾衰竭的诊断和治疗,改善患者预后。方法分析两例重症肺炎患者的临床表现和诊治过程,并检索2004-2013年共10年的文献进行复习。结果两例重症肺炎患者均为男性,分别为40、62岁,血清肌酸激酶(CK)升高分别达10 109、8 406U/L,伴肌红蛋白尿、血肌酐升高分别达242、721μmol/L;病例1因严重低氧血症给予机械通气治疗,病例2因严重肾衰竭接受血液透析,治疗后二者呼吸和肾功能均完全恢复;文献检索到肺炎并发横纹肌溶解症、急性肾衰竭病例20例,年龄24~85岁,男性16例占80.0%;病原体主要为军团菌7株、甲型流感病毒5株和葡萄球菌属5株(耐甲氧西林菌株4株);8例接受机械通气治疗,11例接受血液净化治疗,6例患者同时接受机械通气和血液净化治疗,其中死亡3例、存活17例,其中16例肾功能完全恢复。结论肺炎并发横纹肌溶解症、急性肾衰竭临床少见,病情严重需同时接受机械通气和血液净化治疗者死亡风险高,而存活患者的肾功能几乎均能恢复正常。     

内皮祖细胞在缺血性疾病治疗中的临床应用

内皮祖细胞（endothelail progenitor cells, EPCs）是 Asahara 在1997年首次从成人外周血中分离得到的具有分化为内皮细胞潜能并参与新血管形成的祖细胞［1］。传统意义上来讲,出生后的新血管形成指原位内皮细胞的增殖和迁移,进而形成新的血管网。而 EPCs 能够归巢到新血管形成部位并分化为内皮细胞,在出生后新血管形成中发挥重要作用［2］。因此,EPCs 的发现彻底改变了人们对出生后血管形成的理解,为缺血性疾病临床治疗提供了新的策略。目前,有关 EPCs 在人体缺血性疾病治疗中安全性和有效性的研究也已经开展。现就EPCs 移植在缺血性疾病治疗中存在的问题以及应用前景综述如下。     

两种碘化丙啶染色 DNA 定量方法检测 HL-60细胞凋亡结果的比较

碘化丙啶(propidium iodide,PI)是插入性核酸染料,直接插入双链核酸的2个碱基对之间,每5个碱基插入1个荧光分子,与核酸的结合均匀、稳定。细胞经过 RNA 酶处理后,PI 可以与细胞内 DNA 特异性结合,在流式细胞仪上经488 nm 激光激发,发出峰值610~620 nm 的荧光,可以准确的反映细胞群体中DNA 含量的分布情况,适用于 DNA 定量检测。根据细胞周期中不同时项 DNA 的变化来检测细胞周期中DNA 合成前期( G0/ G1期)、 DNA 合成期( S 期)与DNA 合成后期(G2期)各时项的细胞比例。因为 PI是适用于所有流式细胞仪的染料,这一染色技术在临床肿瘤诊断和医学科研中被普遍的采用,常规使用的染色方法是包括固定、RNA 酶处理、PI 饱和染色3个关键步骤的3步法 PI 染色技术[1]。在一些研究中,当细胞在生理或病理条件下发生了凋亡,DNA 损伤,细胞内 DNA 降低,也可以采用3步法 PI 染色检测亚 G1峰(也称作凋亡峰),用于凋亡细胞比例和特征的分析[2]。但是在实际应用中,由于凋亡时相的不同,当凋亡细胞中 DNA 损伤部分没有完全脱出细胞时,往往检测不到明确可辨的亚 G1峰,敏感度较低。作为细胞凋亡检测的经典方法之一的彗星检测[3],以细胞在电泳移动中 DNA 的迁移形态作为凋亡的特征指标,此技术中比较关键的一步即采用碱性高渗试剂使凋亡细胞中断裂的 DNA 碎片脱出细胞,从而在电泳迁移中呈现出彗星尾样的拖痕,本课题组利用类似方法,用高渗缓冲液作用于固定后的悬浮细胞,使凋亡细胞内断裂 DNA 较彻底的脱出细胞外,再进行 DNA定量检测,提高对细胞凋亡的识别度和敏感性[4]。     

甲状腺功能减退和亚临床甲状腺功能减退患者血浆抵抗素的检测

目的探讨甲状腺功能减退(简称甲减)和亚临床甲状腺功能减退症(简称亚甲减)患者血浆抵抗素水平及其与血浆促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT_3)、游离甲状腺素(FT_4)的关系。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测32例甲减和30例亚甲减患者的血浆抵抗素水平,并与健康对照组20例进行比较。结果与健康对照组比较,甲减组FT_3、FT_4和抵抗素明显降低(P<0.01),TSH明显升高(P<0.01);亚甲减组FT_3、FT_4和抵抗素无明显变化(P>0.05),TSH升高(P<0.05)。甲减组的抵抗素与FT_3和FT_4呈正相关(r=0.8660,r=0.8383,P均≤0.01),与TSH呈负相关(r=-0.7648,P<0.01);亚甲减组的抵抗素与FT_3和FT_4无明显相关性(P>0.05),与TSH呈负相关(r=-0.6564,P<0.05)。结论抵抗素与TSH、FT_3及FT_4存在相关性,可为研究甲减及亚甲减的发病机制提供依据。     

蒲公英根多糖的分离、纯化及结构的初步分析

目的 提取蒲公英根多糖,并对该多糖进行分离、纯化和结构的初步分析。方法 采用超声波协同酶法进行提取多糖,分离纯化后,经Sephadex G-75柱分成A,B,C,D4级,采用优化的PMP柱前衍生HPLC分析单糖组成。采用紫外、红外等方法进行结构的初步分析。结果 4种多糖均含有D-鼠李糖、葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖和D-阿拉伯糖;它们的单糖的摩尔比依次为,A：0.098∶2.88∶0.125∶0.01∶0.33;B：0.113∶0.68∶0.13∶ 0.011∶0.19;C：0.139∶2.46∶0.36∶0.13∶0.086;D：0.028∶0.36∶0.031∶0.012∶0.94。结论 4种多糖在结构上有明显的不同。     

艾滋病的相关羞辱和歧视研究进展

自1981年世界上报告发现首例艾滋病(acquired immune deficiency syndrome,AIDS)以来,AIDS在全球迅速蔓延,目前已成为严重危害人类健康和生存的社会问题。截至2009年底,中国现存活艾滋病毒感染者/艾滋病患者(PLWHA,peopleliving with HIV/AIDS)74万(56万～92万),仍存在数量较大的感染者未被发现。艾滋病高危人群的特殊性、感染人群的隐匿性以及他们所遭受的社会歧视是导致目前PLWHA病例报告数和实际感染数差距较大的主要原因。其中艾滋病相关羞辱和歧视是艾滋病病毒感染者艾滋病病人生活的一个重大     

芜湖市2008～2012年法定传染病流行特点分析

2004年我国建立覆盖全国的传染病监测报告网络,传染病全面实行网络直报,传染病报告方式和流程发生重大改变。2006年《传染病信息报告管理规范》和《国家突发公共卫生事件相关信息报告管理工作规范》实施,传染病报告管理工作更加规范。传染性非典型肺炎、人感染高致病性禽流感、甲型H1N1流感等新发传染病不断出现,手足口病纳入法定传染病报告管理,报告的病种也随之增加,所有这些的变化,对芜湖市法定传染病发病水平有什么影响,传染病发病有何特征,如何更好防控,均需要全面了解传染病发病规律和特征,为制定防控策略及措施提高科学依据,现对芜湖市2008～2012年法定传染病发病情况,进行分析如下。     

毛细管区带电泳法测定麻黄中麻黄碱和伪麻黄碱的含量

目的建立测定麻黄中麻黄碱和伪麻黄碱含量的毛细管区带电泳（CZE）法。方法以200 mmol.L-1硼砂-500 mmol.L-1硼酸溶液（1∶1,v/v）含2 mg.mL-1庚烷磺酸钠和0.4%（v/v）乙腈为背景电解质（BGE）,石英毛细管（75 cm×75μm）,有效分离长度60 cm,运行电压15 kV,紫外检测波长210 nm,重力进样20 s（高度10 cm）,以苯甲醇作内标,对麻黄中的麻黄碱和伪麻黄碱进行定量分析,以两者含量为参量对10批麻黄进行系统聚类分析并进行质量评价。结果麻黄碱和伪麻黄碱的相对峰面积（Ai/Ar）与各自的质量浓度C（mg.mL-1）呈良好的线性关系,两者的平均回收率分别为100.4%和100.9%。结论该法准确可靠,操作便捷,可用于麻黄中麻黄碱和伪麻黄碱的含量测定。