H-2半相合小鼠非清髓性骨髓移植模型的建立

目的　建立H 2半相合小鼠非清髓性骨髓移植模型。方法　用氟达拉滨、阿糖胞苷、环磷酰胺联合60 Co 2Gy全身照射组成预处理方案 ,以C5 7BL/ 6J(H 2 b)为供鼠 ,以C5 7BL/ 6J×BALB/c杂交F1代小鼠为受鼠 ,进行H 2半相合骨髓移植 ,采用环孢素A联合甲氨蝶呤预防急性移植物抗宿主病 (aGVHD)。观察移植后小鼠造血恢复、aGVHD发生率及死亡率 ,5 0d内存活率。结果　移植小鼠平均在 (1 2 .0± 1 .6 )d造血恢复 ,仅接受预处理而不输注供鼠细胞的小鼠在 (1 3.5± 2 .0 )d恢复自身造血 ;移植小鼠移植后 7d到 45d内均可检测到供、受者混合造血细胞嵌合体 ;移植后 2 2d～ 2 5d小鼠出现典型的aGVHD症状。环孢素A联合甲氨蝶呤预防方案可有效降低aGVHD的发生率 ,并减轻其严重程度 ;aGVHD死亡率为 6 0 %,5 0d内存活率为 70 %。结论　以氟达拉滨、阿糖胞苷、环磷酰胺联合全身照射组成的非清髓性预处理方案 ,可在H 2半相合小鼠间进行成功的骨髓移植 ,并可产生稳定的供、受者混合造血细胞嵌合体。     

非清髓异基因外周造血干细胞移植治疗高龄血液病临床研究

目的 探讨非清髓异基因外周造血干细胞移植(NAST)在治疗高龄血液病中的作用。方法 采用NAST、治疗高龄血液病患者5例。5例患者平均年龄55岁(53～59岁)。预处理方案主要由环孢素、抗淋巴细胞球蛋白和环磷酰胺等组成。结果 5例患者均顺利度过移植后造血抑制期，3例供者细胞完全植入，2例为供受者混合嵌合体。2例出现移植物抗宿主病(GVHD)，治疗后好转。结论 NAST简便安全，并发症少，疗效好，为高龄血液病的治疗开辟了新途径。     

绩效管理在医院管理中的应用探讨

近年来,随着医疗卫生改革逐步推进,军队医院也进行了相应改革,医疗市场得到了全面开放,医院越来越受到医院管理者的重视。绩效管理不仅能够调动医护人员工作的主动性、积极性和创造性,还能够有效提高医院的核心竞争力,促进医院技术发展,从而逐渐成为医院有效管理的工具[1]。为了全面推动医院可持续发展,我院将医院绩效考核与管理机制及时引入,但其应用效果及方法需要在实践中不断进行探索,才能     

双侧肾上腺非霍奇金性淋巴瘤1例并文献复习

正淋巴瘤在病理学上分为霍奇金病(Hodgkin’s disease,HD)和非霍奇金性淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma,NHL)两类,其中NHL占淋巴瘤的90%左右,其发展迅速、易发生早期远处转移。肾上腺淋巴瘤有原发性和继发性之分,原发性肾上腺恶性淋巴瘤(primary adrenal lymphoma,PAL)非常罕见,仅占结外恶性淋巴瘤的3%~([1])。PLA是指淋巴瘤仅局限于肾上腺(单侧或双侧)而全身无其他部位的淋巴瘤病灶。因     

非清髓异基因外周造血干细胞移植治疗血液病三例

我们采用新的非清髓预处理方案对 3例 5 3～ 5 9岁的高龄血液病患者进行了非清髓异基因外周造血干细胞移植(NAST) ,获得成功 ,报告如下。3例患者 ,男 2例 ,女 1例 ,年龄分别为 5 9岁、5 3岁和 5 6岁 ,原发病为再生障碍性贫血 (简称“再障”) 2例、难治性急性髓系白血病 1例。 3例供、受者的HLA配型完全相合 ,均采用STR PCR定量方法检测供者细胞植入情况。2例再障的预处理方案为 :环孢素A(CsA) 5mg·kg-1·d-1,共 5d ,抗胸腺细胞球蛋白 (ATG ,武汉生物制品研究所 )15～ 2 0mg·kg-1·d-1,共 5d ,环磷酰胺 (CTX) 4 0～ 5 0mg·kg-1·…     

HLA-A*0201-BSP融合基因的构建与原核表达

克隆表达可生物素化的HLA-A＊0201的重链胞外区是制备HLA-A＊0201-肽四聚体的先决条件。本研究构建重组HLA-A＊0201-BSP融合基因的表达载体，以制备HLA—A2四聚体。根据已报道的序列设计特异引物，利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法从已鉴定为HLA—A＊0201基因型的健康人白细胞中克隆HLA—A＊0201重链胞外区的基因．拼接上依赖生物素-蛋白连接酶（biotin-protein ligase，BirA）的可生物素化序列（BirA substrate peptide．BSP），构建HLA—A＊0201-BSP的原核表达载体，在大肠杆菌DH50t中进行表达。结果表明：成功扩增出HLA—A＊0201-BSP融合基因并测序证实，构建的pBV220-HLA—A＊0201-BSP可在大肠杆菌DH50t中高效表达HLA—A＊0201-BSP融合蛋白．表达量占菌体总蛋白的28％，以包涵体的形式表达，经洗涤、变性后，以Sepharcyl S-300HR（S-300）柱层析纯化，纯度可达90％以上。结论：获得了高效表达HLA—A＊0201-BSP的大肠杆菌工程菌株，建立了简便有效的包涵体纯化方法，为制备HLA-A＊0201-肽四聚体奠定了基础。     

非清髓异基因造血干细胞移植治疗重症再生障碍性贫血4例

为探讨非清髓性异基因外周血造血干细胞移植（NAPBSCT）在治疗重症再生障碍性贫血（SAA）中的作用。4例HLA完全相合的重症再生障碍贫血病人（2例肝炎相关性重症再生障碍性贫血,2例重症再生障碍性贫血）接受了NAPBSCT,结果4例均顺利度过造血抑制期并移植成功（完全性植入3例,嵌和性植入1例）,外周血象及骨髓造血功能快速恢复正常。4例均无急性移植物抗宿主病和间质性肺炎等并发症。本结果初步表明：NAPBSCT简单、安全、并发症轻、造血功能重建快,为SAA的治疗开辟了一条新途径。     

供者同后造血干细胞输注在非清髓异基因造血干细胞移植中的应用

为探讨供者造血干细胞输注 (DSI)在非清髓异基因外周血干细胞移植 (NAPBSCT)中的作用 ,6例NAPBSCT患者分别在移植后 +7～ +90天进行DSI治疗 ,共输注单个核细胞 (MNC) (0 .6～ 7.6 )× 10 8/kg ,CD34 + 细胞 (0 .3～ 3.4)× 10 6/kg ,CD3+ 细胞 (0 .3～ 5 .1)× 10 8/kg。 6例中 5例有明显促进植入的作用 ,其中 3例由嵌合体转为完全性植入。 4例有较明确的移植物抗白血病效应 (GVL) ,均未见造血抑制等并发症。初步结果表明 ,DSI能促进NAPBSCT后供者嵌合体的增加 ,有利于NAPBSCT后供者细胞植入并具较好的GVL效应 ,而且并发症少 ,在NAPBSCT中具有较好的应用前景。     

IL—2单独或联合IL—12增强G—CSF动员的人外周血单个核细胞抗肿瘤活性的研究

为了探讨IL-2单独或联合IL-12体外处理后,G-CSF动员的人外周血单个核细胞（G-PBMC）抗肿瘤活性的变化,以NK细胞敏感的K562细胞和NK细胞抵抗的Raji细胞为靶细胞,采用乳酸脱氢酶（LDH）释放法测定IL-2单独或联合IL-12诱导后G-PBMC的抗肿瘤活性,同时采用流式细胞术分析诱导前后G-PBMC的细胞表型,研究结果表明：（1）未经处理的G-PBMC的抗肿瘤活性很低;单独应用IL-2诱导24小时即可以增强G-PBMC的抗肿瘤活性,当诱导72小时后G-PBMC的抗肿瘤活性进一步增强;（2）IL-2联合IL-12诱导后的G-PBMC抗肿瘤活性显高于单用IL-2诱导后;（3）IL-2单独或联合IL-12诱导后G-PBMC中CD3,CD8抗原表达增加,而CD56抗原表达仅在IL-2联合IL-12诱导7天后增加,结论提示：IL-2激活的G-PBMC具有显的抗肿瘤活性,联合IL——12诱导后其抗肿瘤活性进一步增强。     

人β2-微球蛋白基因的克隆与原核中的表达

本研究获取主要组织相容性复合体（MHC）Ⅰ类分子的轻链部分,即β2-微球蛋白（β2m）以制备MHC Ⅰ类分子-肽四聚体.根据已报道的序列设计特异引物,利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法从人白细胞中克隆β2m的基因,并构建β2m的原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达.结果显示：构建的编码成熟β2m的pET-β2m可在大肠杆菌BL21（DE3）中高效表达β2m,表达量占菌体总蛋白的32%,β2m以包涵体的形式表达,经洗涤、变性后,以Sephacryl S-200HR（S-200）柱层析纯化,纯度可达95%以上,纯化产物采用稀释法复性.Western blot分析表明,该蛋白具有与抗人天然β2m抗体反应的特性.结论：获得了高效表达人β2m的大肠杆菌工程菌株,建立了简便有效的β2m包涵体纯化、复性方法,为制备MHC Ⅰ类分子-肽四聚体奠定了基础.