早发冠心病相关脂质代谢基因变异的研究进展

早发冠心病(pCHD)是冠心病的一种特殊临床类型.最新的研究表明,pCHD具有很强的遗传基础,遗传因素约占pCHD发病的50％～60％,其中以脂质代谢基因最为重要.脂质代谢基因变异可导致脂质合成及代谢障碍,并出现以动脉粥样硬化(As)及pCHD为临床特征的一系列疾病.该文旨在对脂质代谢基因变异与pCHD之间的关系进行综...     

PCSK9 siRNA对THP-1源性巨噬细胞CD36?SR-A1及SR-B1表达的影响

目的:研究前蛋白转换酶枯草溶菌素9(PCSK9) siRNA对THP-1源性巨噬细胞CD36?SR-A1及SR-B1表达的影响?方法:以THP-1源性巨噬细胞为研究对象,应用Lipofectamine 2000转染不同浓度PCSK9 siRNA进THP-1源性巨噬细胞中,RT-PCR及Western blot筛选出最有效的siRNA,再转染入THP-1源性巨噬细胞,24 h后加入ox-LDL处理24 h,采用油红O染色检测细胞内脂质蓄积情况,RT-PCR分析细胞CD36?SR-A1及SR-B1表达?结果:浓度为80 nmol/L的PCSK9 siRNA基因沉默效应最佳;油红O染色结果表明ox-LDL组细胞内脂质蓄积情况最为明显,PCSK9 siRNA转染组次之;PCSK9 siRNA转染组CD36 mRNA表达水平相对于ox-LDL组降低(P < 0.05),而ox-LDL组和PCSK9 siRNA转染组SR-A1及SR-B1 mRNA表达无明显差异?结论:PCSK9可能通过影响摄取脂质的细胞膜表面受体CD36表达,参与动脉粥样硬化的发生发展?     

微量内毒素促平滑肌细胞增殖作用的实验观察

本文观察了微量内毒素对动脉壁平滑肌细胞的促增殖作用及硝苯吡啶对这一作用的影响。结果发现：在一定范围内，内毒素具浓度依赖性促平滑肌细胞增殖作用，且以培养液中浓度为１０－７ｇ／ｍｌ作用最强。硝苯吡啶可显著抑制内毒素的这一作用。提示（１）内毒素通过促进平滑肌细胞的增殖而与动脉粥样硬化的形成密切相关；（２）内毒素的促平滑肌细胞增殖作用与细胞内外Ｃａ２＋的跨膜运转有关。     

Coq4基因全敲除小鼠胚胎发育的表型分析

目的：通过分析辅酶Q生物合成蛋白4同系物（coenzyme Q biosynthesis protein 4 homolog ,COQ4）的编码基因Coq4 敲除（Coq4^-/- ）小鼠表型,探讨Coq4在小鼠胚胎发育中的作用。方法：引进Coq4基因全身杂合（Coq4^+/- ）小鼠模型,利用基因组 PCR鉴定小鼠基因型。观察并记录Coq4^+/-小鼠后代出生情况;通过解剖、组织学和免疫荧光法,观察野生型（wild type,WT）和 Coq4^-/- 胚胎和胎盘组织的形态结构。结果：Coq4^-/- 小鼠在胚胎日（embryonic day,E）7.5 d（E7.5）出现原肠胚形成障碍,于E10.5死亡。组织形态分析显示,与WT相比,Coq4^-/-小鼠胚胎发育严重迟缓,胎盘结构缺陷。免疫荧光染色分析发现,Coq4^-/-小鼠胎盘滋养层细胞侵袭能力减弱。结论：Coq4基因敲除导致小鼠发生胎盘缺陷和原肠胚形成障碍,Coq4为小鼠胚胎发育所必需的基因。     

大鼠主动脉合成与释放肾上腺髓质素的影响因素

目的：探讨影响主动脉合成与分泌肾上腺髓质素（adrenomedullin,AM)的因素,方法：在不同条件下孵育大鼠主动脉,测定孵育液和孵育组织中AM含量。结果：缺氧、酸中毒和脂多糖能刺激动脉释放AM。结论：缺氧、酸中毒和细菌感染可能参与了某些疾病条件下AM的合成与释放机制。     

微量内毒素促平滑肌细胞增殖作用的实验观察

本文观察了微量内毒素对动脉壁平滑肌细胞的促增殖作用及硝苯吡啶对这一作用的影响。结果发明：在一定范围内，内毒具有浓度依赖性促平滑肌细胞增殖作用，且以培养液中浓度为１０＾－７ｇ／ｍｌ作用最强。硝苯吡啶可显著抑制内毒素的定作用。提示（１）内毒素通过促进平滑肌细胞的增殖而与动脉粥样硬化的形成密切相关；（２）内毒素的促平滑肌细胞增殖作用与细胞内外Ｃａ＾２＋的跨膜运转有关。     

oxHDL3、oxLDL诱导THP-1单核源性巨噬细胞表达IL-1β、IL-6、HLA-DR、CD86

目的动脉粥样硬化是一种慢性免疫炎症性疾病,其脆性斑块的两个主要特征是含有大量的炎症免疫介质和巨噬细胞.oxHDL和 oxLDL被发现存在于粥样斑块内,探索、比较其对炎症免疫介质产生的影响有助于进一步阐明As发生发展的机制.方法用RT-PCR和流式细胞术等方法观察oxHDL3和oxLDL对THP-1单核源性巨噬细胞表达4种动脉粥样硬化相关基因(炎症免疫反应相关)IL-1β、IL-6、CD86、HLA-DR的影响.结果THP-1单核源性巨噬细胞经oxHDL3和oxLDL处理后,IL-1β、IL-6的mRNA水平明显上调,CD86、HLA-DR的表面表达增强,CD86 、HLA-DR 细胞的百分比显著提高.而天然HDL3和LDL不具有上述效应.结论oxHDL3和oxLDL经诱导或增强巨噬细胞表达IL-1β、IL-6、CD86和HLA-DR,可能参与动脉粥样硬化病变的形成与发展.     

一氧化氮及一氧化碳对碱性成纤维细胞生长因子促血管平滑肌 …

目的;研究一氧化氮（ＮＯ）及一氧化碳（ＣＯ）对碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）促平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌｓ,ＶＳＭＣ）增殖作用的影响及其机制。方法：以＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定平滑肌细胞增殖程度,放射活性法测定ＶＳＭＣ内蛋白磷酸化程度,蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ Ｃ,ＰＫＣ）及丝裂     

一氧化氮及一氧化碳对碱性成纤维细胞生长因子促血管平滑肌细胞增殖作用的影响

目的：研究一氧化氮（ＮＯ） 及一氧化碳（ＣＯ） 对碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ） 促平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌｓ, ＶＳＭＣ）增殖作用的影响及其机制。方法：以３ＨＴｄＲ参入法测定平滑肌细胞增殖程度,放射活性法测定ＶＳＭＣ内蛋白磷酸化程度、蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ Ｃ,ＰＫＣ） 及丝裂素活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ, ＭＡＰＫ）活性。结果：孵育２４ ｈ 后,ｂＦＧＦ刺激的ＶＳＭＣ增殖较对照组增加１．１ 倍（Ｐ＜ ０．０１）,细胞内蛋白磷酸化程度增加３８．２％ （Ｐ＜ ０．０１）,ＰＫＣ 及ＭＡＰＫ 活性分别增加１．５ 和２ ．５倍（ Ｐ＜ ０．０１）;ＣＯ 前体ｈｅｍｅＬｌｙｓｉｎａｔｅ（ＨＬＬｙｓ） 及ＮＯ 前体ＬＡｒｇｉｎｉｎｅ（ ＬＡｒｇ） 对静止期ＶＳＭＣ 生长无显著影响,亦未引起细胞内蛋白磷酸化、ＰＫＣ及ＭＡＰＫ 活性发生显著改变;５、１０ 、２０ μｍｏｌ·Ｌ－１ ＨＬＬｙｓ 使ｂＦＧＦ刺激的ＶＳＭＣ增殖分别减少４３．４ ％ 、４６．６％ 和４７ ．６％