建立兔单纯腹壁爆炸伤合并内脏器官外露的动物模型

目的建立可进行长期观察的单纯腹壁爆炸伤合并内脏器官外露的动物模型,观察此类创伤的致伤和转归规律。方法 8～10周龄生长期白家兔12只,随机分为2组,每组6只。全身麻醉条件下,标记致伤部位。A组采用自制腹腔防护装置埋入腹腔,然后采用0.125 g TNT当量炸药球贴于致伤部位致伤;B组不经防护处理直接采用同样爆源致伤。伤后观察各组大体形态,对活体动物每日取伤部组织常规HE染色,切片观察;死亡动物记录生存时间并行尸检。结果两组动物致伤部位腹壁呈全层开放性爆炸伤。A组实验动物创面面积(3.9±0.56)cm2;B组创伤面积(3.83±0.49)cm2,两组间无显著差异(P0.05)。A组实验动物存活时间为(141±87.78)h。B组实验动物平均存活时间为(3.67±2.25)h,两组实验动物存活时间存在明显差异(P0.05)。尸检和病理观察发现,对照组动物早期死亡原因为内脏损伤和腹腔内出血,实验组发生内脏纤维粘连未见明显创伤。腹壁各层组织受爆炸的创伤有差异,呈现"外轻内重"的病理变化,并呈进行性发展,尤以肌肉组织的变化最为典型。结论本实验模拟了腹部爆炸伤致伤机制。经有效防护,建立了可用于长期观察的单纯腹壁爆炸伤动物模型。     

不同剂量雌激素对裸鼠血管瘤模型的影响

目的：建立人毛细血管瘤裸鼠移植模型,探讨血管瘤裸鼠模型建立的最佳条件。方法：将手术切除的1例雌激素受体阳性的儿童增生期血管瘤组织制成组织块,植入20只裸鼠（BALB/cnudemice）皮下,每只4处,将20只裸鼠分为4个实验组。实验1组在移植后给予普通鼠食喂养;实验2组在1组基础上每周肌注雌二醇0.01mg;实验3组在1组基础上每周肌注雌二醇0.1mg;实验4组在1组基础上每周肌注雌二醇1mg,于移植后第30、60、90天切取移植瘤。移植瘤标本进行病理学光镜检查,用血管内皮细胞单克隆抗体CD31、CD34进行免疫组化染色。结果：移植后早期各组标本内皮细胞大量变性、坏死,30天后,单纯喂养的实验1组及实验2组部分移植瘤开始吸收或形成脓肿及纤维化。实验3、4组移植瘤开始缓慢生长。90天后实验1组、实验2组移植瘤均未成活,实验4组移植瘤部分成活,而实验3组移植瘤全部成活。光镜下成活的移植瘤与原血管瘤组织生物学特点相似。结论：不同剂量的雌激素对血管瘤裸鼠移植模型的建立有一定影响,适量的应用雌激素可建立稳定的人血管瘤裸鼠移植动物模型。该模型可以应用到基础和临床的血管瘤研究。     

C57BL/6-gfp与C57BL/6小鼠脂肪互换移植模型的建立

本实验旨在建立一种便于观察、易于检测、临床模拟性好的脂肪移植动物模型. 一、材料和方法 1.材料:实验选用清洁级近交系C57BL/6-gfp (GFP)和C57BL/6( B6)小鼠各16只,雄性,购于第四军医大学动物中心,动物满8周龄后即可用于实验.     

VEGF基因体外转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究

目的:探讨脂质体介导血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCS)应用于基因治疗的可行性、安全性。方法:体外分离、培养、鉴定MSCs,PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒转染MSCs,转染后用免疫荧光和ELISA检测MSCs表达VEGF蛋白的情况,MTT检测MSCs对VEGF质粒转染的敏感性。结果:骨髓中分离得到MSCs,流式细胞检测显示MSCs不表达CD34和CD45,但表达CD90。透射电镜观察可见细胞浆中含大量粗面内质网和分泌颗粒。VEGF基因转染MSCs后第5天抗VEGF免疫荧光染色约90%的MSCs呈阳性,ELISA检测结果显示PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒转染组细胞培养上清液中VEGF含量明显高于对照组,并于转染后第5天达到峰值。MTT检测结果显示VEGF质粒转染对MSCs增殖无影响。结论:MSC可作为VEGF基因转染的靶细胞用于基因治疗。     

稳定表达人VEGF165的NIH/3T3细胞株的筛选与鉴定

 目的 培养NIH/3T3细胞,并进行慢病毒载体介导的VEGF165基因转染,为建立转基因小鼠血管瘤模型奠定基础.方法 采取贴壁培养法分离培养NIH/3T3细胞,细胞随机分为3组,分别为Lenti-VEGF165-EGFP 重组慢病毒载体转染组、Lenti-EGFP慢病毒转染组和未转染组,转染后72 h荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪分选后用ELISA方法检测VEGF165外分泌.结果 ELISA 检测转染后小鼠NIH/3T3细胞,Lenti-VEGF165-EGFP 重组慢病毒载体感染组、Lenti-EGFP慢病毒转染组和未转染组培养上清中VEGF165浓度分别为(205±15)、0、0 ng/L(P<0.05) 结论 NIH/3T3细胞获得慢病毒载体介导的VEGF165表达基因修饰且稳定传代,为下一步血管瘤动物模型研究奠定了基础.     

P-selectin糖蛋白配体-1的基因克隆及其Ig融合蛋白的表达和纯化

目的:克隆P-selectin糖蛋白配体-1的基因,表达和纯化其Ig融合蛋白。方法:RT-PCR法克隆出P-选择素糖蛋白配体-1(CD162)cDNA,构建真核表达载体,DEAD-Dextran法转染COS7细胞,上清经纯化后,分别使用WesternBlot和流式细胞仪鉴定CD162-hIgFc融合蛋白的性质和活性。结果:RT-PCR克隆出801bp的CD-162cDNA片段,插入载体构建出pIg-CD162,将其转染COS7细胞后获得CD162-hIgFc融合蛋白,分子量为74KD。WesternBlot证实其为CD162-hIgFc融合蛋白,流式细胞仪证明获得的CD162-hIgFc融合蛋白能够识别血小板表面的CD62P。结论:本研究成功制备了CD162-hIgFc融合蛋白,为进一步探讨P选择素与其配体CD162之间的作用打下坚实的基础。     

肉毒素的新面孔

“听说注射‘毒针’能除皱，而且非常有效！”这是在很多爱美者之间流传的消息。[编者按]     

异体复合组织移植皮肤淋巴引流隔绝动物模型的建立

目的:通过SD大鼠下腹部游离皮瓣及皮管的移植,建立大鼠异体复合组织移植皮肤淋巴引流隔绝模型。方法:7～8周龄雄性SD大鼠切取下腹部皮瓣并游离行同种异体移植,皮肤隔离组(A组):将供体皮瓣边缘对合、缝合成管状,底边留血管蒂出口用隔离器隔离皮肤,显微外科吻合血管,皮管缝合于隔离器,隔离器固定于受体;皮肤未隔离组(B组):将供体游离皮瓣卷制成管状,显微外科吻合血管并将供受体皮肤对位缝合;空白对照组(C组):行下腹部游离皮瓣异体移植。大体观察每组皮瓣或皮管存活时间,于术后3、5、7、14、28、35d取移植物皮肤组织行HE染色,观察病理学变化。结果:A组:皮管存活时间为32(34,32)天;B组:皮管存活时间为15(16,15)天;C组:皮瓣存活时间为6(7,6)天。A组与C组、B组与C组、A组与B组存活率差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:本实验成功建立了大鼠的异体复合组织移植淋巴引流隔绝模型,并证实了隔绝皮肤淋巴引流能有效延长移植物的存活时间。     

快速ELISA检测诊断儿童结核性脑膜炎

等,糖、氯化物降低,白细胞数量增多等;（４）结核病接触史。根据上述临床表现和检测结果结合临床抗痨治疗有显著疗效等综合判断确诊。二、方法：结核抗体酶联免疫诊断试剂系郑州博赛生物技术研究所产品,该试剂以ＰＰＤ为包被抗原,检测抗ＰＰＤ－ＩｇＧ抗体。严格按照试剂盒说明书进行。结果在酶标仪上波长４５０处测定ＯＤ值,以测定样品孔与阴性对照孔的比值等于或大于２．２５为阳性,小于２．２５为阴性。结　　果两组脑脊液结核抗体检测结果：结脑组阳性２８例（５２．８３％）,阴性２５例;对照组阳性２例（６．４５％）,阴性３…