全自动核酸提纯及实时荧光PCR系统的性能验证与评价

目的 评估全自动核酸提取纯化及实时荧光PCR分析系统检测新型冠状病毒核酸的性能。方法 根据新型冠状病毒感染防控方案,研究购自上海生工的全自动核酸提取纯化及实时荧光PCR分析系统、2019-nCoV试剂盒、不同浓度的新型冠状病毒核酸检测标准品,对样品的阴阳性符合率、精密性、变异系数、最低检出限、重复性、检测时长等指标进行检测,并根据检测结果验证、评估自动核酸提取纯化及实时荧光PCR分析系统性能。结果 样本的阴、阳性符合率均为100.00%,精密性阳性符合率均为100.00%,变异系数(coefficient of variation,CV)为≤5.00%,最低检出限循环阈值(cycle threshold, Ct)<43.00,阳性检出率为100.00%,重复性阴、阳性符合率均为100.00%,设备检测时长2h以内。结论 根据本研究结果,该系统特异性强、重复性好,同时最低检出限和精密性均符合现场使用要求,可有效降低操作风险,且检测时长较传统PCR短,可大规模适用于口岸一线。     

芹菜素对哮喘小鼠转录激活蛋白3及Th_2型细胞因子抑制作用的实验研究

目的研究芹菜素对哮喘小鼠2型辅助性T细胞(Th2)优势应答的抑制作用及其机制。方法选择32只6周龄SPF级BALB/c小鼠,随机分为4组,每组8只:正常组(A组)、哮喘组(B组)、芹菜素高剂量治疗组〔C组,20 mg/(kg.d)〕、芹菜素低剂量治疗组〔D组,2 mg/(kg.d)〕。卵白蛋白(OVA)致敏和激发制作哮喘模型。药物治疗组以芹菜素溶于1%二甲基亚砜(DMSO)腹腔注射。小鼠末次雾化吸入24 h后,用小鼠肺功能仪检测气道对乙酰胆碱(Ach)阻力;苏木精-伊红(HE)染色观察气道炎症浸润情况;支气管肺泡灌洗液(BALF)瑞氏染色计数嗜酸性粒细胞百分比;酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清总IgE、BALF液中Th2型细胞因子〔白细胞介素(IL)4、IL-13〕;免疫印迹(Western blot)测定肺组织中信号转导和转录激活蛋白3(GATA-3)表达水平。结果与正常组比较,哮喘组Ach气道阻力、气道炎症、BALF细胞计数和嗜酸性粒细胞分类计数、血清总IgE、BALF中IL-4、IL-13以及肺组织GATA-3蛋白表达明显增高(P0.05)。与哮喘组比较,芹菜素治疗组各项指标均明显降低(P0.05),而且高、低剂量组之间差异有统计学意义(P0.05)。结论芹菜素通过降低肺组织GATA-3和Th2细胞因子的表达而降低哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性,具有潜在的临床应用前景。     

新IκBα突变体基因转染对人外周血来源的树突状细胞的作用

哮喘是T细胞介导的嗜酸细胞性气道变应性炎症。作为功能最强的抗原递呈细胞，树突状细胞（DC）在T细胞免疫偏移中起关键作用。核因子κB（NF-κB）系p50／p65异源二聚体，IκBα为NF-κB抑制剂（IκB）家族中最重要的成员，两者结合以三聚体形式位于静止的细胞质中。IκBαN端丝氨酸（Ser）32／36位点发生磷酸化和降解作用，是NF-κB激活的共同途径。研究表明，NF-κB过度激活是哮喘慢性气道炎症持续和扩大的重要基础。最近，     

结合肽抑制鸭乙型肝炎病毒复制作用的研究

目的:探讨与鸭乙型肝炎病毒多聚酶(DHBVP)特异结合的结合肽,对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染的原代鸭肝细胞中DHBV复制的抑制作用.方法:应用噬菌体表面展示技术(PDT)筛选出与DHBVP特异结合的结合肽,经测序得知其核苷酸序列,推论出其氨基酸序列,据此合成结合肽,将其作用于体外感染DHBV的鸭肝原代培养细胞,分时段检测细胞核、细胞浆及培养上清中的DHBV-DNA.结果:应用噬菌体展示技术筛选3轮后共筛到7条结合肽,根据推论出的氨基酸序列合成结合肽,作用于体外感染DHBV的鸭肝原代培养细胞,其中3号肽、6号肽的培养上清及胞浆中的DHBV-DNA含量低于对照组(P<0.05).结论:与DHBVP特异结合的结合肽对DHBV的复制有抑制作用.     

转化生长因子β1单核苷酸多态性与支气管哮喘的关系及与CD_(14)的作用

转化生长因子β1(TGFβ1)由于其独有的促炎和抗炎双重作用以及促纤维化作用,在支气管哮喘(以下简称哮喘)气道重塑中具有中心地位~[1].本研究观察哮喘患者TGFβ1单核苷酸多态性与哮喘相关表型的关系,探索TGFβ1与CD14间的交互作用.     

六字诀治疗慢性阻塞性肺疾病的价值及其应用

慢性阻塞性肺疾病（COPD）是一种异质性慢性疾病,发病率和死亡率呈逐年上升趋势。药物治疗COPD虽然有一定作用,但不能有效逆转肺功能下降或疾病进展。肺康复是COPD患者的治疗手段之一,六字诀兼具预防和治疗双重作用,可有效改善COPD患者的临床症状、运动能力和生活质量。     

乙型肝炎病毒血清标志物的再认识

临床上,抗原抗体的检测一直是病毒性肝炎病原学诊断的常用方法,但也存在着许多难以解释的临床现象.随着分子生物学的飞速发展,特别是PCR技术的广泛应用,对这种临床现象的认识逐步清晰起来.     

Toll样受体在哮喘中的作用

Toll样受体(Toll—like receptors，TLR)是一个新发现的序列高度保守而古老的天然免疫受体家族，广泛存在于植物、昆虫、哺乳动物和人类。在研究果蝇胚胎背腹侧极化的发育过程中，首次发现了果蝇蛋白Toll(d Toll)。继Medzhitov于1997年成功报道第一个与d Toll同源的人类Toll即TLR4以来，迄今在人类已至少克隆10种TLR，命名为TLR1-10，其中对TLR2和TLR4研究最为深入。