小剂量三氧化二砷对哮喘豚鼠气道嗜酸细胞凋亡和核因子κB表达作用的相关性研究

哮喘是一种慢性气道变应性炎症 ,嗜酸细胞 (ＥＯＳ)浸润是其主要的病理特征。核因子κＢ(ＮＦ κＢ)是一个具有广泛生物学活性的核转录因子 ,激活后可促进细胞因子、粘附分子和趋化因子等基因转录 ,与炎症性疾病密切相关[1] 。我们的研究观察小剂量三氧化二砷 (Ａｓ2 Ｏ3 )对哮喘豚鼠气道ＥＯＳ凋亡和ＮＦ κＢ表达的影响 ,探讨ＥＯＳ凋亡和ＮＦ κＢ表达之间的相关性。材料与方法　健康雄性豚鼠 30只 ,体重 (30 0± 5 0 )ｇ ,随机分为 3组 ,每组 10只。哮喘组 :第 1天和第 8天腹腔内注射 10 %卵白蛋白 (ＯＶＡ ,美国Ｓｉｇｍａ公司 ) 1ｍｌ…     

高迁移率族蛋白B1对人气道平滑肌细胞增殖和迁移及Akt磷酸化的影响

目的:探讨高迁移率族蛋白B1(high morbility group protein box 1,HMGB1)刺激对人气道平滑肌细胞(human airway smooth muscle cells,HASMC)增殖和迁移的影响及其机制?方法:体外培养HASMC,将纯化的第3~8代细胞随机分为对照组?HMGB1组(125?250?500和1 000 ng/mL)?TGF-β阳性对照组(1 ng/mL),CCK-8法测定HASMC增殖能力,Transwell小室观察HMGB1对 HASMC迁移的影响,Western blot检测HASMC的Akt磷酸化?结果:与对照组相比,HMGB1呈浓度依赖性刺激HASMC增殖(P < 0.05);HMGB1(500 ng/mL)刺激HASMC后,细胞迁移能力显著高于对照组(P < 0.01);HMGB1(500 ng/mL)组HASMC的Akt磷酸化水平较对照组显著增高(P < 0.05)?结论:HMGB1促进HASMC增殖和迁移,可能是通过调节PI3K/Akt通路参与气道重塑,为今后治疗哮喘提供了新思路?     

三氧化二砷对哮喘豚鼠肺内核因子-κB表达的影响

目的：研究Ａｓ２Ｏ３对哮喘豚鼠肺内核因子－κＢ（ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ－ｋａｐｐａＢ，ＮＦ－κＢ）表达的影响及其作用机制。方法：豚鼠３０只随机分为３组，即对照组、哮喘组和Ａｓ２Ｏ３（２ｍｇ／ｋｇ）治疗组。采用免疫组织化学染色技术，即小鼠抗大鼠ｐ６５单克隆抗体（Ｆ－６）、生物素化马抗小鼠ＩｇＧ、二氨基联苯胺（ＤＡＢ）显色检测豚鼠气道壁ＮＦ－κＢ；计算机图像分析技术对气道壁ＮＦ－κＢ表达进行定量检测。结果：对照组豚鼠整个肺组织包括气管、支气管、肺泡和脏层胸膜构成了一个ＮＦ－κＢ阳性（ＮＦ－κＢ＋）细胞网络，其中支气管壁胞核ＮＦ－κＢ＋细胞密度为（２２０±７２）／ｍｍ２上皮面积；与对照组相比，哮喘组豚鼠气道壁胞核ＮＦ－κＢ＋细胞密度显著增加（Ｐ＜０．０１）；哮喘豚鼠经Ａｓ２Ｏ３处理后，气道壁胞核ＮＦ－κＢ＋细胞密度显著下降（Ｐ＜０．０１），但与对照组相比仍较高（Ｐ０．０１８）。结论：ＮＦ－κＢ激活增加是支气管哮喘重要的发病机制之一；下调肺内ＮＦ－κＢ激活细胞数量可能是Ａｓ２Ｏ３治疗哮喘的一个重要机制。     

三氧化二砷对哮喘豚鼠肺内嗜酸性粒细胞凋亡的影响

目的：研究三氧化二砷（As2O3)对哮喘豚鼠肺内嗜酸性粒细胞（EOS）凋亡的影响及其作用机制。方法：豚鼠30只随机分为3组，即对照组、哮喘组和As2O3(2mg/kg)治疗组。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿嘧啶缺口末端标记（TdT-mediated dUTP nick end labelling,TUNEL)技术原位标记细胞凋亡；计算机图像分析技术对气道壁EOS浸润和EOS凋亡进行定量测定。结果：对照组豚鼠气道壁EOS计数（4．4±2．5）个／HP，EOS凋亡指数为（0．42±0．08）％；与对照组比较，哮喘组豚鼠气道壁EOS浸润显著增加（P＜0．01），EOS凋亡指数显著下降（P＜0．01）；As2O3治疗组，气道壁EOS浸润显著下降（P＜0．01），EOS凋亡指数显著增加（P＜0．01），EOS凋亡指数显著下降（P＜0．01）；As2O3治疗组，气道壁EOS浸润显著下降（P＜0．01），EOS凋亡指数明显增加（P＜0．01），并且气道壁EOS浸润数量与EOS凋亡指数之间呈显著性负相关（r=-0.949,P<0.01)。结论：EOS凋亡异常是支气管哮喘的一个重要的发病机制；As2O3通过促进肺内EOS凋亡，下调EOS浸润数量，从而减轻了哮喘气道炎症；小剂量As2O3治疗哮喘既有效又相对安全，具有潜在的应用价值。     

三氧化二砷治疗哮喘作用机制的实验研究

目的　研究三氧化二砷 (As2 O3 )对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞 (EOS)凋亡和核因子 κB(NF κB)表达的影响作用 ,探讨As2 O3 对哮喘可能的治疗机制。方法　豚鼠 2 0只建立哮喘模型后随机分为对照组和As2 O3 (2mg/kg)治疗组。每组 10只 ,采用TUNEL技术原位标记细胞凋亡 ;免疫组织化学染色技术检测豚鼠气道壁NF κB ;计算机图像分析技术对气道壁EOS凋亡和NF κB表达进行定量检测。结果　对照组豚鼠支气管壁EOS凋亡指数为 (0 2 3± 0 0 5 ) % ,整个肺组织包括气管、支气管、肺泡和脏层胸膜构成了一个NF κB+ 细胞网络 ,其中支气管壁胞核NF κB+ 细胞密度为 (12 6 1± 190 )个 /mm2 上皮面积 ;哮喘豚鼠经As2 O3 处理后 ,支气管壁EOS凋亡指数显著增加 (P <0 0 1) ,胞核NF κB+ 细胞密度显著下降 (P <0 0 1) ,并且气道壁EOS凋亡指数与胞核NF κB+ 细胞密度之间呈显著性负相关 (r =- 0 91,P <0 0 1)。结论　抑制气道NF κB激活 ,促进EOS凋亡 ,可能是As2 O3 治疗哮喘的重要机制之一。     

耐药鲍曼不动杆菌扩增片段长度多态性分析指纹图谱数据库的建立

目的:建立鲍曼不动杆菌扩增片段长度多态性分析(AFLP)指纹图谱数据库。方法:采用NCCLS 2004年版抗生素敏感性判断方法研究药物敏感性,采用AFLP技术研究鲍曼不动杆菌基因型,以AFLP结果建指纹图谱立数据库。结果:药敏结果和AFLP指纹图谱数据库进行的聚合分析结果具有一致性。结论:AFLP指纹图谱数据库具有实用价值。     

黄芪多糖和黄芪总甙调控LX-2细胞因子分泌

目的:用黄芪多糖和黄芪总甙对LX-2细胞分泌的与纤维化相关的主要细胞因子进行研究,以探讨黄芪抗纤维化的确切分子机制。方法:不同浓度的黄芪多糖和黄芪甙作用于LX-2细胞,以Real Time Cell Electronics Sensing技术实时检测细胞增殖状态;分别再以25μg/ml和300μg/ml的黄芪多糖和黄芪总甙作用LX-2细胞24 h,提取细胞mRNA,以荧光定量PCR测定转化生长因子1(TGF-β1)、肝细胞生长因子(HGF)、基质金属蛋白酶2(MMP2)及基质金属蛋白酶9(MMP9)mRNA的变化。结果:300μg/ml的黄芪多糖可抑制LX-2的增殖(P<0.05,94.7 h),但不同浓度的黄芪总甙对LX-2细胞均有促进增殖的作用(P<0.05);25μg/ml的黄芪多糖和黄芪总甙在TGF-β1促进分泌的同时,也上调其它抗纤维化因子,其中黄芪多糖对MMP2的上调(104.9倍)、黄芪总甙对IL-10的上调(550.65倍)最为显著;300μg/ml的黄芪多糖可抑制TGF-β1及HGF、MMP9、IL-10的表达,但仍然上调MMP2的表达,300μg/ml的黄芪总甙也可抑制TGF-β1的表达,但对抗纤维化因子MMP2、MMP9及IL-10仍有明显的上调作用。结论:低浓度(25μg/ml)和高浓度(300μg/ml)的黄芪多糖和黄芪总甙可通过不同的分子机制调控肝星状细胞因子的分泌而发挥抗纤维化作用;黄芪多糖主要以促进MMP2分泌为主,而黄芪总甙则主要通过上调MMP2、MMP9及IL-10的分泌而发挥作用。高剂量的黄芪多糖和总甙抗纤维化效果优于低剂量组。     

基因芯片技术在呼吸道病毒检测中的应用

目的建立一种直接检测呼吸道病毒及其相关亚型的方法.方法通过合成一系列呼吸道病毒相关序列的寡核苷酸序列,构建检测芯片.对待检样品进行随机逆转录和扩增,荧光标记,杂交,扫描分析.结果广谱地鉴定出流感病毒的相关亚型.结论此方法可以正确检测到细胞培养所获得的甲1型和乙型流感病毒.     

维生素D对支气管哮喘气道重塑的治疗作用及意义

气道重塑是哮喘病理生理的重要特征,也是哮喘难以根治的重要原因。研究表明维生素D水平与哮喘的发生发展相关,补充维生素D有益于哮喘症状的控制。维生素D有望成为治疗哮喘及重症哮喘的新选择。     

OX40/OX40L协同刺激通路在支气管哮喘中的作用

支气管哮喘（简称哮喘）是一种由T细胞介导的慢性气道炎症性疾病。T细胞活化需要两个不可或缺的刺激信号,即识别信号和协同刺激信号。OX40/OX40配体（OX40L）是T细胞激活通路中一对重要的协同刺激分子,参与T细胞的活化、增殖、迁移以及记忆性T细胞的形成,在哮喘的发生和发展过程中起重要作用。以OX40/OX40L信号通路作为靶点,有望为哮喘免疫治疗开辟新的途径。