肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对骨髓基质细胞的毒性作用

背景:已证实肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)能选择性诱导白血病细胞凋亡,并且不影响正常造血干/祖细胞的功能。但TRAIL对作为造血微环境核心的骨髓基质细胞的毒性作用如何,据作者查新检索目前尚未见系统报道。目的:通过观察TRAIL对骨髓基质细胞的凋亡诱导效应及其造血支持功能的影响,继而评价TRAIL对骨髓基质细胞的毒性作用。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2006-03/10在解放军沈阳军区总医院中心实验室完成。材料:血常规、骨髓涂片细胞检查正常的骨髓标本11份,取自解放军沈阳军区总医院血液科。化疗药物柔红霉素为浙江海正药业股份有限公司产品,国药准字H33020925。方法:Percoll 贴壁法体外分离培养骨髓基质细胞,达80%融合时胰蛋白酶消化扩增,取处于对数生长期的细胞,分为4组,空白对照组不进行任何干预,柔红霉素组加入0.5μmol/L柔红霉素作用24h,TRAIL组加入200μg/L TRAIL作用18h,联合组加入0.5μmoL/L柔红霉素作用6h后再以200μg/L TRAIL作用18h。取第2代骨髓基质细胞,60Co射线照射消除内源性造血集落,接种后去除悬浮细胞,TRAIL组以200μg/L TRAIL作用基质细胞层18h,按1×105/孔将骨髓单个核细胞接种于基质细胞层,扩增5d后加入甲基纤维素培养体系,于37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度条件下培养10d。主要观察指标:荧光显微镜观察诱骗受体在骨髓基质细胞的表达及定位,流式细胞仪检测柔红霉素对骨髓基质细胞诱骗受体表达的影响,AnnexinⅤ/PI标记TRAIL对骨髓基质细胞的凋亡诱导作用及对其造血支持功能的影响。结果:诱骗受体DcR1和DcR2在骨髓基质细胞中均有表达,主要定位于胞膜及胞浆。0.5μmol/L柔红霉素作用24h后,基本不影响诱骗受体DcR1和DcR2的表达水平。与空白对照组细胞凋亡率比较,TRAIL组无明显变化(t=0.973,P>0.05);柔红霉素组、联合组均显著升高(t=5.141,P=0.001;t=4.187,P=0.002),此两组间比较差异无显著性意义(t=1.222,P>0.05)。与空白对照组比较,TRAIL组骨髓单个核细胞数、粒-巨噬集落形成单位均无明显变化(t=1.313,P>0.05;t=1.172,P>0.05)结论:TRAIL的诱骗受体DcR1及DcR2在骨髓基质细胞均有表达,使骨髓基质细胞免于TRAIL的凋亡诱导效应,且TRAIL不增强柔红霉素对骨髓基质细胞的细胞毒性作用。     

脑出血患者内源性β内啡肽对免疫系统功能的影响

背景：脑出血是中枢神经系统非病原微生物感染机制致病的极严重的损伤事件，神经-内分泌-免疫系统调节网络的功能活动必然十分明显，内啡肽是调节网络中重要的系统间调节信号，通过探讨疾病过程中内源性β内啡肽水平的变化与免疫系统功能的关系，以及外源性β内啡肽对体外培养的免疫活性细胞功能的影响，能够进-步了解神经内分泌免疫调节网络的作用机制，为可能进行的临床干预治疗及康复措施介入提供实验依据。目的：探讨脑出血患者免疫系统功能的变化及内源性β内啡肽与疾病的关系。设计：病例-对照研究。单位：首都医科大学附属复兴医院神经内科，北京市红十字会急救中心，中国协和医科大学的基础医学研究所免疫室。对象：2001-12／2002-06北京复兴医院和红十字急救中心就诊的部分脑出血患者28例(脑出血组)。2002-02／06北京复兴医院住院的部分恢复期脑缺血患者28例(脑缺血对照组)。2002-02／06北京协和医院正常体检人群28例(正常对照组)。方法：应用放射免疫分析法检测外周血β内啡肽含量；用RT-PCR半定量分析方法检测了外周血单个核细胞白细胞介素(IL)-1β，IL-2，IL-8和一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达；β内啡肽对体外培养的脑出血患者外周血单个核细胞的IL-1β，IL-2，IL-8和iNOS表达的影响。主要观察指标：①外周血β内啡肽含量。②外周血单个核细胞的细胞因子IL-1β，IL-2，IL-8和iNOS表达。③体外观察β内啡肽(或β内啡肽受体拮抗剂)对外周血单个核细胞的细胞因子IL-1β，IL-2，IL-8和iNOS表达的影响。结果：脑出血急性期β内啡肽含量为(115&;#177;68)ng／L，恢复期为(160&;#177;72)ng／L，正常对照组为(321&;#177;62)ng／L，脑缺血对照组为(264&;#177;163)ng／L。正常对照组和脑缺血对照组与急性期比较，差异有显著性意义(t=11．84，t=4．46，P&;lt;0．01)；脑出血恢复期与脑缺血对照组和正常对照组比较，差异有显著性意义(t=3．09，P&;lt;0．05；t=8．96，P&;lt;0．01)。脑出血患者恢复期β内啡肽含量与急性期比较呈上升趋势，但无统计学意义。β内啡肽作用峰值的浓度为1&;#215;10^-10～1&;#215;10^-8L。脑出血急性期和恢复期患者IL-1β，IL-2表达均显著低于脑缺血对照组和正常对照组(P&;lt;0．01)；急性期与恢复期比较，IL-1β呈上升趋势，但无统计学意义，IL-2升高明显；脑缺血对照组与正常对照组比较，呈显著下降(P&;lt;0．01)。脑出血患者IL-8，iNOS的表达均呈现急性期增高，恢复期下降的结果，与脑缺血对照组和正常对照组比较差异有显著性意义(P&;lt;0．01)；急性期与恢复期比较差异有显著性意义(P&;lt;0．01)；脑缺血对照组与正常对照组比较，IL-8呈显著下降(P&;lt;0．05)，iNOS无统计学意义(P&;gt;0．05)。结论：脑出血患者内源性β内啡肽水平呈持续低下状态；免疫系统功能变化为先升后降，功能低下呈持续状态；外源性β内啡肽可增强脑出血患者外周血单个核细胞IL-1β，IL-2，IL-8和iNOS的表达，β内啡肽受体拮抗剂纳络酮可阻断β内啡肽的正向免疫调节作用。     

成人急性双表型白血病1例

1病例报告女,36岁。以腰痛1个月余,头晕、心慌1d于2004-12-14入院。查体:t37.3℃,P124次/min,BP96/60mmHg。重度贫血貌,双侧颈部可触及3个花生米大小淋巴结,表面光滑,质中,活动度好,无压痛。实验室检查:WBC13.1×109/L,Hb68g/L,PLT8×109/L。外周血分类:原始淋巴细胞0.05,幼稚淋巴细胞0.56,成熟淋巴细胞0.38,中性分叶核细胞0.01。肝肾功能正常。ECG示窦性心动过速。骨髓检查:骨髓增生极度活跃,红系、巨核系明显受抑,原始淋巴细胞占0.025,幼稚淋巴细胞占0.945,该细胞胞体约10～12nm,核染色质细微,核仁隐约可见,胞浆量少。组织化学染色…     

中医治疗抑郁症的治则

抑郁症是一种常见的精神障碍,由于中医辨证思路的不同形成了多种治疗思路,大致分为从调神论治、从调和脏腑论治、从调整经络论治、从六经辨证论治、从营卫论治5种,此5种思路虽然不同,但是总体离不开脏腑、经络、营卫。只有脏腑经络功能正常,营卫调和,最终才可以达到阴平阳秘、精神乃治的目的。     

白血病骨髓基质细胞黏附培养对Jurkat细胞IAP家族主要成员表达的影响

目的:观察白血病骨髓基质细胞黏附培养对Jurkat细胞化疗敏感性及IAP家族主要成员表达的影响。方法:Jurkat细胞与60Co照射的基质细胞层黏附培养构建共培养模型,扫描电镜观察,0.5μmol/L DNR作用24h后FITC-Annexin V/PI标记流式细胞仪定量Jurkat细胞的凋亡率。Western blot检测黏附培养4、24及48h时Jurkat细胞总蛋白中XIAP和survivin的表达变化,流式细胞仪检测Jurkat细胞周期分布。结果:白血病基质细胞黏附培养组、正常基质细胞黏附培养组Jurkat细胞凋亡率分别为(6.05±0.54)%、(8.48±0.86)%,与悬浮对照组(25.74±6.15)%比较差异均有显著性(P<0.01),且白血病基质细胞黏附培养组与正常基质细胞黏附培养组间差异也有显著性(P<0.05)。Western blot检测结果示,与白血病基质细胞黏附培养4h即观察到XIAP表达的上调,24h和48h尤为明显,但survivin表达的变化呈现相反趋势。与Western blot结果相一致,Jurkat细胞周期阻滞于G0-G1期。结论:白血病骨髓基质细胞黏附培养能介导Jurkat细胞耐药,其机制可能与Jurkat细胞XIAP表达上调和survivin表达下调有关。     

应用上臂内侧远位真皮下血管网皮瓣修复头皮撕脱并颅骨缺损

目的介绍上臂内侧远位真皮下血管网皮瓣修复头皮撕脱并颅骨缺损的手术方法。方法自2003-05~2005-01,对7例患者应用上臂内侧远位真皮下血管网皮瓣修复头皮撕脱并颅骨缺损,皮瓣设计以尺侧上副动脉为轴型中心,按需设计皮瓣,本组皮瓣切取面积最大为20 cm×10 cm,最小为14 cm×8 cm。结果7例皮瓣全部成活,无颅内感染等并发症,其中2例颅骨缺损者后期做颅骨修补术,1例患者于伤后1 a行头皮扩张术。结论上臂内侧远位真皮下血管网皮瓣有血供可靠、蒂窄、瓣宽、长宽可超比例、于受区建立血运快、可早期断蒂等优点,是修复头皮撕脱并颅骨缺损的好方法。     

双头螺纹空心钉治疗非老年Garden Ⅲ-Ⅳ型股骨颈骨折

[目的]探讨成人股骨颈不稳定型骨折,应用双头螺纹加压空心钉手术治疗疗效。[方法]分析2013年1月~2016年7月,年龄65岁以下的GardenⅢ-Ⅳ型股骨颈骨折有完整随访资料者32例。采用双头螺纹空心钉(QWIX 7.5 mm)内固定治疗。骨折按Garden分型:GardenⅢ型27例、GardenⅣ型5例;右侧19例,左侧13例。记录手术时间、骨折愈合时间、术后股骨颈长度、颈干角、股骨头形态、内固定退钉以及术后并发症发生率,术后髋关节功能优良率等。[结果]所有患者均顺利手术,手术时间50~80 min,平均(65.25±21.33)min,失血量50~90 ml,平均(65.51±15.36)ml,住院时间5~13 d,平均住院日(7.35±1.25)d。完整资料32例,随访6~24个月,平均(11.36±4.81)个月。其中1例出现骨折不愈合,发生率3.12%(1/32);3例股骨头坏死,发生率9.37%(3/32)。无内固定退钉、无明显股骨颈短缩者。术后1年股骨颈的水平缩短(5.80±2.51)mm、垂直缩短(7.53±2.14)mm与术后2年股骨颈的水平缩短(5.22±2.83)mm、垂直缩短(7.35±2.95)mm,差异无统计学意义(t=-1.723,P=0.389;t=-1.502,P=0.780)。髋关节Harris术后评分66~92分,平均(85.92±3.65)分,其中优19例,良8例,中3例,差2例,优良率达84.37%(27/32)。[结论]双头螺纹加压空心钉治疗不稳定型股骨颈骨折,固定牢靠,避免退钉及股骨颈短缩的发生,并发症发生率低,骨折愈合率高,临床效果满意。     

成人朗格罕斯组织细胞增生症1例

患者男 ,31岁。因多饮、多尿 7年余 ,发热、全身骨骼疼痛 2月余 ,拟垂体功能减退于 2 0 0 0年 11月 2日入我院内分泌科。入院时不规则发热 ,(体温 38～39℃ ) ,应用抗生素治疗无效 ,长效尿崩停6 0Ｕ肌注 ,隔日 1次 ,每日饮水量在 10 0 0 0ｍｌ以上 ,尿量达 80 0 0～ 10 0 0 0ｍ     

慢性胃炎脾气虚证患者胃窦黏膜内表皮生长因子和三叶因子表达的意义

[目的] 探讨慢性胃炎脾气虚证患者胃窦黏膜内表皮生长因子(EGF)和三叶因子(TFF1)表达的意义。[方法] 采用免疫细胞化学染色的方法。检测慢性胃炎脾气虚和脾胃湿热患者及胃窦黏膜内EGF和TFF1 的表达,并与正常对照者比较。[结果] 脾气虚组和脾胃湿热组患者EGF和TFF1 的表达与正常对照组比较差异有显著性意义(P<0 .05,P<0. 01)。两组间EGF比较差异也有统计学意义(P<0. 01),在两组间TFF1(++)比较差异无统计学意义,但脾气虚组TFF1的阳性率高于脾胃湿热组。脾胃湿热组Hp的感染率高于脾气虚组(P<0 .01)。[结论] 脾气虚组EGF的表达高于脾胃湿热组,可能与后者Hp感染率较高有关;脾气虚组TFF1的表达高于脾胃湿热组,可能与胃黏膜严重损伤有关。     

南水北调东线江都泵站钉螺扩散情况现场观察

目的了解南水北调东线取水口抽调江水时钉螺能否进入输水河道孳生扩散。方法对泵站前水源河道、泵站拦污栅、泵站消力池滩地和渠首输水河道进行钉螺分布调查,采用打捞的方法检测水源河道漂浮物携带钉螺情况,结合水工建筑功能、调水量及有关河道水位资料,对钉螺通过泵站扩散可能性进行分析研究。结果江都泵站前水源河道查出钉螺面积185.28hm2,水源河道漂浮物调查发现钉螺主要在汛期吸附于漂浮物漂流扩散;泵站前拦污栅及泵站出水口消力池滩地及泵站后渠首输水河道均未发现钉螺。结论南水北调东线调水泵站水闸、拦污栅、水泵、消力池等水工建筑物具有阻挡、沉淀钉螺的作用,泵站消力池及输水河道因水体大,常年保持高水位运行,不适宜钉螺孳生。