热诱导凋亡胶质瘤细胞致敏树突状细胞疫苗的制备与鉴定

目的 制备热诱导凋亡胶质瘤细胞致敏树突状细胞疫苗,探讨其增强树突状细胞抗原递呈、诱导细胞毒性T淋巴细胞产生更强肿瘤细胞杀伤作用的机制.方法 采用改良Inaba法,在重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)作用下,体外诱导扩增小鼠骨髓来源的树突状细胞,电子显微镜和流式细胞术检测其生物学特征;分别以不同加热温度处理U251细胞,制备凋亡U251细胞致敏树突状细胞疫苗,3H-TdR掺入法和MTT法检测T淋巴细胞增殖能力和活化细胞毒性T淋巴细胞杀伤率.结果 在rmGM-CSF和rmIL-4作用下,小鼠骨髓来源细胞体外培养6～7 d即可诱导出树突状细胞,经倒置相差显微镜和电子显微镜证实细胞表面呈典型树突状结构;流式细胞术检测证实其表达特异性表面标记物CD11c,同时表达功能相关性抗原CD80、CD86和MHCⅡ.倒置相差显微镜和流式细胞术确定热诱导U251细胞凋亡的最佳条件为:44℃处理3 h再常规培养12 h,凋亡U251细胞可更好地负载树突状细胞,负载的树突状细胞可以激发T淋巴细胞增殖,诱导活化细胞毒性T淋巴细胞具有更强的杀伤肿瘤细胞的能力.结论 在rmGM-CSF和rmIL-4作用下,经体外成功制备的小鼠骨髓来源的树突状细胞,可热诱导凋亡胶质瘤细胞敏敏树突状细胞疫苗于体外有效激发T淋巴细胞增殖,诱导细胞毒性T淋巴细胞产生较强的杀伤肿瘤细胞能力.     

42例脑干占位性病变的诊断及显微手术治疗

目的探讨脑干占位性病变的临床表现、影像学检查、病理类型、显微手术治疗及术后并发症的防治。方法对我院2002年1月至2010年1月显微手术治疗的42例脑干占位性病变的临床表现、影像学特点及手术治疗进行回顾性分析。42例脑干占位性病变均行显微手术,采取颞下入路8例,枕下幕上入路8例,乙状窦后入路11例,后正中入路15例。全切除28例,次全切除10例,部分切除4例。结果术后症状明显改善者27例,变化不明显者9例,加重5例,1例桥-延髓血管网状细胞瘤患者术后呼吸衰竭,自动出院后死亡。结论应用显微神经外科技术治疗脑干占位性病变,手术适应症选择正确,采取不同的手术入路,术后积极预防和治疗并发症,可以取得良好的治疗效果。     

NF—κB和uPA在人脑胶质瘤中的表达

目的 究人脑胶质瘤中核转录因子-κB（NF—κB）和尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）的表达，探讨二者在胶质瘤侵袭性生长和恶性进展中的作用。方法 用免疫组化SP法检测52例脑胶质瘤和5例正常脑组织中NF—κB和uPA的表达和分布情况.结果 NF-κB及uPA在正常脑组织中均未见表达；在52例脑胶质瘤中NF-κB有41例表达，其在高级别胶质瘤中的阳性表达率高于低级别胶质瘤（P〈0．01）。uPA在52例胶质瘤中则全部表达，其在高级别胶质瘤中的表达强度明显高于低级别胶质瘤（P〈0．01）。NF-κB和uPA在胶质瘤中的表达呈正相关（r=0.542，P〈0．01）。结论 脑胶质瘤中，活化的NF-κB可促进uPA表达．从而促进胶质瘤的侵袭性和恶性进展。     

三维稳态进动快速成像序列结合三维时间飞跃法血管造影在颅神经微血管减压术前的应用价值

目的探讨三维稳态进动快速成像序列（3D—FIESTA）结合三维时间飞跃法血管造影（3D．TOFMRA）在颅神经微血管减压术前评估中的应用价值。方法回顾性分析我院26例行微血管减压术手术治疗的原发性三叉神经痛或面肌痉挛患者临床资料,所有患者术前均接受MRI检查（包括3D．FIESTA和3D．TOFMRA）,寻找判定责任血管,以指导手术治疗。结果本组26例患者中术前检查均认定有责任血管,单纯性动脉23例,其中4例发自小脑上动脉,13例发自小脑前下动脉,6例发自小脑后下动脉,动静脉混合2例,单纯静脉1例。术中证实都存在相应的责任血管压迫颅神经,但1例原发性三叉神经痛患者,术前责任血管认定为小脑前下动脉压迫,术中发现同时有静脉血管接触。所有患者术后均恢复良好。结论联合使用3D—TOFMRA和3D—FIESTA扫描序列可明显提高责任血管的判定率,尤其有利于动静脉血管的鉴别,同时能够显示神经血管的局部解剖关系,利于指导手术设计。     

Skp2、PTEN和p27在胶质瘤中的表达及其意义

目的探讨Skp2、PTEN和p27在胶质瘤中的表达及其意义，及其相互关系。方法用免疫组织化学方法检测33例胶质瘤和6例正常脑组织标本中Skp2、PTEN和p27蛋白的表达。结果Skp2在正常脑组织中表达不明显，在低级别胶质瘤中表达较少，在高级别胶质瘤中表达较多，两两比较差别有统计学意义（P〈0．01）。PTEN和p27在正常脑组织中表达明显，在低级别胶质瘤中表达较少，在高级别胶质瘤中表达不明显，两两比较差异有统计学意义（P〈0．01）。胶质瘤中Skp2蛋白表达与p27蛋白表达呈负相关（r=-0．809，P〈0．01），PTEN蛋白和p27蛋白的表达呈正相关（r=0．865，P〈0．01）。Skp2蛋白和PTEN蛋白的表达呈负相关（r=-0．814，P〈0．01）。结论在胶质瘤中PTEN的缺失突变导致Skp2在胶质瘤中表达升高，进一步促进p27的泛素化降解，使p27表达降低，失去对细胞周期的调控，从而促进胶质瘤的恶性进展和增殖。     

人脑胶质瘤中STAT3和VEGF表达的相关性

目的分析胶质瘤中信号传导和转录活化因子3(STAT 3)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达与脑胶质瘤恶性程度的关系。方法采用免疫组织化学方法检测70例人脑胶质瘤和11例正常脑组织中STAT 3和VEGF的表达。结果胶质瘤中STAT 3和VEGF的表达水平在高级别(Ⅲ,Ⅳ级)组明显高于低级别(Ⅰ,Ⅱ级)组,两组间有显著性差异(P＜0．01),STAT 3的表达和VEGF的表达呈显著正相关(P＜0．01)。结论STAT 3和VEGF的表达与胶质瘤的恶性程度有密切关系,且两者协同在胶质瘤发生、发展过程中起重要作用。两者的相关性则提示VEGF基因由STAT 3蛋白调节。抑制STAT 3蛋白通路可能有望成为一条治疗胶质瘤的新途径。     

颅内后循环动脉瘤的显微手术治疗

目的总结分析颅内后循环动脉瘤的临床特征、手术入路及手术技巧。方法回顾性分析我院19例经显微手术治疗的后循环动脉瘤患者的临床资料。此19例中,6例手术经颞下入路,7例经翼点或扩大翼点入路,3例经枕下乙状窦后入路,2例经枕下旁正中入路,1例经扩大颞瓣入路。结果9例患者动脉瘤成功夹闭,5例患者动脉瘤成功夹闭后行瘤体切除,5例患者动脉瘤被成功包裹。术后5例出现一过性动眼神经麻痹,3例出现同向偏盲,3例出现偏瘫,1例死亡。3例患者术后因脑积水同时行脑室-腹腔分流术。随访3月～6年,3例行瘤颈夹闭者见动脉瘤消失,载瘤动脉通畅,1例包裹者动脉瘤瘤体增大,1例患者在术后2年因动脉瘤突发破裂导致死亡。结论对于后循环动脉瘤患者需选择合适的手术入路,充分地显露动脉瘤和载瘤动脉。术中注意对神经及穿支血管的保护,可明显减少术后并发症。     

脑干肿瘤的诊断及手术干预策略

目的探讨脑干肿瘤的诊断和显微手术适应证、方法、技巧和疗效。方法回顾性分析2002年1月至2007年12月收治的32例脑于肿瘤诊断和显微手术治疗的资料。结果32例脑干肿瘤患者均行显微手术,术后患者颅神经症状明显好转22例．变化不明显7例,加重2例,死于呼吸循环衰竭1例。结论MRI为脑干肿瘤诊断的首选检查方法。手术适应证和手术入路的正确选择,精细的术中操作,积极预防和处理术后并发症是提高脑干肿瘤治疗效果的关键。     

3D—CTA在颅内动脉瘤诊断中的临床应用价值

目的探讨64排三维CT血管造影（3D—CTA）在以蛛网膜下腔出血（SAH）为主要表现的颅内动脉瘤（ICAs）诊断中的临床应用价值。方法回顾性分析181例SAH患者资料,其中3D—CTA及DSA影像学资料由一位神经外科医师和一位放射或介入科医师按双盲原则分析。最终以DSA及手术资料对3D—CTA在ICAs诊断中的临床应用价值进行评价。结果181例蛾H患者,3D—CTA共发现143例共166个动脉瘤,DSA及手术证实动脉瘤144例共170个。3D—CTA对SAH患者中动脉瘤的检出率为97．6％,对直径小于2mm的动脉瘤检出率为66．7％,对直径大于2mm的动脉瘤检出率接近100％。此外,3D—CTA还可清晰确切显示瘤体、瘤颈、载瘤动脉与周围组织的关系。结论64排3D—CTA对SAH患者动脉瘤的诊断具有敏感、快捷、无创、经济等优点,与DSA有机结合有助于指导ICAs的诊断及治疗。     

携带hIFN-β的骨髓间充质干细胞体外抑制C6胶质瘤细胞

目的研究携带人β干扰素基因（hIFN-β）的重组腺病毒转染骨髓间充质干细胞（MSCs-hIFN-β）以及其在体外抑制大鼠C6胶质瘤细胞。方法转染的MSCs行PT-PCR检测细胞内hIFN-βmRNA的表达;ELISA法检测培养液上清hIFN-β的分泌情况;MTT法检测细胞活力并绘制转染后MSCs生长曲线,MSCs-hIFN-β和C6胶质瘤细胞体外共培养,检测C6胶质瘤细胞活力和共培养液上清hIFN-β含量。结果 Ad-hIFN-β转染的MSCs分化后有绿色荧光蛋白表达,RT-PCR证实MSCs中有hIFN-βmRNA表达,ELISA测定显示MSCs分泌hIFN-β,而且转染MSCs的增殖能力无改变。体外共培养发现C6胶质瘤细胞的生长被不同程度的抑制,C6胶质瘤细胞培养上清hIFN-β的含量随着MSCs-hIFN-β的密度增加而增加。结论在体外MSCs-hIFN-β能抑制大鼠C6胶质瘤细胞的增殖。