造血干细胞移植治疗儿童白血病的临床研究

【目的】评价造血干细胞移植 (HSCT)治疗儿童白血病的疗效及合并症。【方法】非血缘相关脐血移植 (UD UCBT)治疗儿童白血病 5例 (AML 4例 ,HR ALL 1例 ) ;同胞外周血造血干细胞移植 (allo PBSCT)治疗CML及HR ALL各 1例 ;自体外周血造血干细胞移植 (auto PBSCT)治疗AML 2例。UD UCBT中 4例为HLA 5 / 6相合 ,1例为全相合。输入的脐血 (UCB)平均有核细胞数 (NC)为 6 2 9× 10 7/kg ,CFU GM为 0 17× 10 5/kg ,CD34+ 细胞数为 4 6× 10 5/kg。预处理主要以马利兰 (Bu)、环磷酰胺 (CY)、氟达拉宾 (Flu)和马法兰 (Mel)等组成的方案。【结果】 4例可评价的UD UCBT患儿中 3例完全植入 ,1例未植入者自体造血恢复 ,2例allo PBSCT患儿均完全植入。UCBT后外周血中性粒细胞绝对计数 (ANC)≥ 0 5× 10 9/L的中位时间为 +2 1d ,血小板 (PLT)≥ 2 0× 10 9/L的中位时间为 +40d。 2例allo PBSCT患儿外周血ANC≥ 0 5× 10 9/L的中位时间分别为 +10d和 +12d ,PLT≥ 2 0× 10 9/L的中位时间为 +11d和 +14d。 3例植入的UCBT者 2例分别发生Ⅰ度和Ⅲ度aGVHD。 2例allo PBSCT患儿分别发生Ⅱ度和Ⅲ度aGVHD。随访 2 5个月 ,2例auto PBSCT患儿均复发。allo HSCT 7例中 2例复发 ,2例死于移植合并症 ,3例无病存活至今。【结论】H     

CD40和CD40配体表达在异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病发生中的变化

目的 探讨在血缘相关人类白细胞抗原(HLA)全相合异基因造血干细胞移植(HSCT)中发生移植物抗宿主病(GVHD)患者CD40和CD40配体(CD40L)表达的变化及意义.方法 成功应用血缘相关HLA全相合异基因HSCT治疗19例重型珠蛋白生成障碍性贫血和1例遗传性溶血性贫血.其中脐血移植(UCBT)8例,异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)12例,移植前、后发生急、慢性GVHD时采用流式细胞仪检测和比较其外周血CD40和CD40L的表达.结果 UCBT 3例和allo-PBSCT 4例无急性GVHD,余13例均发生I-Ⅳ度急性GVHD.急性GVHD发生时CD4 CD40L 和CD8 CD40L T细胞表达明显升高,尤其在alloPBSCT者更明显.5例UCBT和12例allo-PBSCT发生慢性GVHD,慢性GVHD发生时患者的CD40L 、CD25 和CD69 在CD4 和CD8 T细胞上的表达增加.CD19 CD40 B细胞的表达在UCBT和allo-PBSCT后l a一直处于低水平.结论 HSCT移植后患者外周血CD40L T细胞的高表达可能与异基因HSCT GVHD的发生过程中的T细胞活化与增殖有关.     

致敏小鼠骨髓间充质干细胞体外培养及多向分化功能的测定

目的：评价异基因脾细胞输注致敏的小鼠骨髓源性间充质干细胞(MSCs)的体外培养生长能力及其多向分化功能。方法：应用贴壁培养法体外培养间充质干细胞,流式检测其表面标志以及检测其成骨、成脂和成肌多向分化状况;结果：致敏小鼠骨髓源性MSCs与非致敏小鼠骨髓源性MSCs比较,形态学无差异且均表达CD29+、CD105+、CD44+和Sca-1+ ;CD34-、CD11b-;同时在相应的诱导条件下具有向成骨、成脂、成肌多向分化的能力。结论：异基因脾细胞输注致敏的小鼠,其骨髓源性MSCs的形态学和功能与正常小鼠的MSCs比较评估未见异常。     

HLAR粪肠球菌和屎肠球菌医院感染分布特征及耐药性分析

目的了解氨基糖甙类高水平耐药（HLAR）粪肠球菌和屎肠球菌在医院感染中分布特征及耐药现状。方法常规方法对本院2004年1月至2007年12月住院患者的各种临床标本进行培养分离，采用全自动微生物鉴定仪VITEK2对细菌进行鉴定及药敏检测。结果265株中引起医院感染的HLAR主要分布在ICU占26．8％（71／265），其次肾内科17．0％（45／265）及神经内科8．3％（22／265），感染以泌尿系统感染为主占30．2％（80／265），其中粪肠球菌占54．3％（144／265），屎肠球菌占45．7％（121／265），屎肠球菌对B-内酰胺类抗生素的耐药率明显高于粪肠球菌，但粪肠球菌对喹奴普汀／达福普汀的耐药率明显高于屎肠球菌（P〈0．05），粪肠球菌及屎肠球菌对万古霉素、替考拉宁均敏感，对力奈唑烷耐药率为0及4．1％。结论HLAR粪肠球菌及屎肠菌对临床常用的抗生素耐药性有较大的差异，临床治疗时要合理选择抗生素，万古霉素、替考拉宁对其均有较好的体外抗菌活性。     

恩再适治疗神经病理性疼痛的临床应用

目的 评价恩再适治疗神经病理性疼痛的疗效.方法 选择25例神经病理性疼痛的患者,每个患者给予恩再适9ml加入0.9%生理盐水250ml中静脉滴注,1次/日,连续14天,在用药前,用药后第1天、第7天和第14天用VAS10分法检测神经病理性疼痛的缓解程度.结果 用药后第1天,疼痛改善不明显;第7天开始,恩再适明显缓解神经病理性疼痛;本次观察显效率68.85%,总有效率92.5%.有1例患者出现皮疹,停药后皮疹逐渐消失.结论 恩再适治疗神经病理性疼痛有效率较高,安全性较好.     

广州市4家医院铜绿假单胞菌的血清学分型及耐药性分析

目的:了解广州市4家医院铜绿假单胞菌(PA)各血清型分布情况及耐药性.方法:按常规方法对各院各种临床标本进行细菌的培养、分离,用VITEK2全自动微生物鉴定仪对750株PA进行鉴定,K-B法进行药物敏感性检测,采用日本生研株氏会社分型血清用玻片凝集法对PA进行血清分型.结果:750株PA分型率为93.7%(703/750);以G、B、L、F、E型为主,其中G型197株占26.3%,B型90株占12.0%,L型78株占10.4%,F型77株占10.2%,E型72株占9.6%;5种主要血清型PA对临床常用的1 1种抗菌药物的耐药率分别是哌拉西林(PIP)14.3%～66.2%、替卡西林/克拉维酸(TIM)28.9%～68.8%、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)13.3%～62.3%、氨曲南(ATM)30.8%～42.8%、头孢他啶(CAZ)7.8%～22.9%、头孢吡肟(FEP)10.3%～18.3%、亚胺培南(IMP)7.8%～21.1%、庆大霉素(GEN)20.0%～66.2%、阿米卡星(AMK)10.0%～17.8%、环丙沙星(CIP)14.3%～59.7%、复方新诺明(SXT)90.0%～98.6%,经x2检验,各主要血清型对ATM、FEP、AMK、SXT的耐药性无统计学差异(P>0.05),而对PIP、TIM、TZP、GEN、CAZ、IMP、CIP的耐药性有统计学差异(P<0.01).结论:广州市4家医院的PA血清型以G、B、L、F、E为主,CAZ、FEP、IMP对各主要血清型PA的体外抗菌活性较强.     

大鼠脊髓损伤后Wnt信号分子的表达变化

目的:探讨大鼠脊髓损伤后不同时期Wnt信号分子Wnt-1、β-连锁蛋白(β-catenin)及糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)在脊髓损伤局部的表达情况.方法:50只成年雌性SD大鼠随机均分为对照组和实验组,麻醉下手术显露T9～T11椎板,切除T10全椎板,实验组大鼠用NYU打击器以10g×5cm的打击能量致伤T10脊髓,对照组只行全椎板切除,不致伤脊髓.分别于术后1d、3d、5d、7d、14d每组各取5只大鼠,取以损伤区为中心共15mm范围内(对照组取相应部位)脊髓组织,提取总RNA,采用半定量RT-PCR的方法检测脊髓组织中Wnt-1、β-catenin及GSK-3β的mRNA表达量.结果:脊髓损伤后1d和3d时Wnt-1和β-catenin出现高表达,5d后其表达逐渐减弱,14d左右其表达基本恢复到正常水平,而在脊髓损伤后1d和3d时GSK-3β呈低表达,5d后其表达逐渐增强,各时间点之间差异有显著性(P<0.05).对照组中Wnt-1和β-catenin及GSK-3β均呈低表达,各时间点表达无显著差异(P<0.05).结论:大鼠脊髓损伤后损伤局部脊髓组织中Wnt-1,β-catenin及GSK-3β的表达发生变化,提示Wnt信号在脊髓损伤后的早期被激活,其可能与脊髓损伤后的修复再生有关.     

嗅鞘细胞移植后在脊髓中迁移特性的研究

目的: 观察移植的嗅鞘细胞 (OECs) 在损伤脊髓中的迁移特性。方法: 将OECs用双苯亚甲胺染色, 植入 12只SD大鼠半横断脊髓的头端 (A组 ), 植入 12只大鼠半横断脊髓的尾端 (B组 ), 对照组(C组) 12只植入没有损伤的脊髓内。术后 1、2、4、6周观察脊髓中OECs的分布。结果: A组和B组OECs分别在白质中向头端和尾端迁移, 但越过断端的数量少, C组不迁移。结论: OECs的迁移主要沿着轴突进行, 向头端和尾端迁移的数量和速度都没有明显区别, 但 6周时只有少量OECs能越过损伤区。OECs在没有损伤的脊髓白质中不进行迁移。     

联合低温保护剂对脐血造血干细胞长期低温保存的作用

目的 观察联合低温保护剂对脐血造血干细胞长期低温保存的作用。方法 60份由联合低温保护剂（5％DMSO＋6％HES＋5％人体白蛋白）保存在岭南脐血库的脐血,按时间分为1,2,3,4年等4组,复温后观察其细胞活力、总有核细胞数（TNC）、CD34^ ,CD34^ CD38^-,CFU-GMey BFU-E的回收率。结果 60例脐血冻存后的细胞活力为96．39％,TNC,CD34^ ,CD34^ CD38^-,CFU-GM及BFU－E的回收率分别是95．89％,94．45％,88．88％,87．77%及83．18％,不同时间组的上述指标之间差异无显著性（P＞0．05）。结论 联合低温保护剂具有效果可靠、操作简单等优点,适用于脐血造血干细胞的长期低温保存。     

鼠尾胶原三维诱导E14小鼠胚胎干细胞分化为甲状腺类似细胞的初步研究

目的 在体外贴壁诱导E14小鼠胚胎干细胞分化为甲状腺细胞的基础上,不改变诱导因子,探索鼠尾胶原三维结构体外诱导胚胎干细胞分化为甲状腺细胞的可行性。方法 E14小鼠胚胎干细胞半固体培养基悬浮培养6d生成拟胚体,随后在鼠尾胶原三维结构中继续诱导分化11d,全程添加诱导因子促甲状腺素及胰岛素,第14天时开始添加碘化钾。结果 拟胚体在鼠尾胶原上生长状态良好,分化细胞贴壁后逐渐陷入鼠尾胶原;电镜下诱导细胞高尔基体、内质网丰富,部分诱导细胞胞质内见不典型分泌颗粒,与人成体甲状腺细胞超微结构类似。结论 胚胎干细胞在鼠尾胶原三维结构中可以分化为甲状腺类似细胞,并具备合成、分泌的功能;三维结构为体外诱导胚胎干细胞分化为甲状腺细胞提供了新的方法。 [关键词] 胶原; 胚胎; 干细胞 ;细胞分化; 甲状腺