应用酵母测试系统对83-1除草剂的遗传毒性检测

本文报道以多终点的酵母D61·M和D7测试系统对83-1除草剂(DCNPA)的遗传毒性检测。检测结果:经DCNPA处理的D61·M菌对放线菌酮的抗性频率明显高于阴性对照(P<0.01),在该菌有丝分裂交换的检测终点为阳性反应,其余检测终点为阴性反应。以上结果表明,DCNPA是一种对真核生物酵母DNA的损伤剂,提示应重视它在肿瘤发生中的作用。     

双甲脒对3,4—二氨基吡啶诱发去甲肾上腺素释放的影响

采用3,4-二氨基吡啶(DAP)诱发的体外大脑皮层~3H-去甲肾上腺素(NE)释放试验,研究双甲脒对脑组织NE释放的影响及其作用机理。在细胞外有钙或无钙时,双甲脒均能明显抑制DAP诱发的大脑皮层NE释放,其抑制程度与α_2-肾上腺素受体激动剂可乐定的抑制效应相当。钙离子重摄取阻断钌红能部分抵消细胞外无钙时双甲脒对NE释放的抑制作用。上述结果表明,双甲脒对脑组织NE释放的抑制作用可能是通过胞内钙离子平衡过程实现的,而与钙通道关系不大。     

围生期双酚A暴露对断乳期雄性子代脑芳香化酶表达的影响

目的：研究围生期双酚A暴露对断乳期雄性子代大鼠脑中芳香化酶P450（P450arom）表达的影响，探索双酚A影响脑发育的机制。方法：对母鼠从妊娠第11d直至产后断乳期（即出生后第21d，postnatal day 21，PND21）给予双酚A（Bisphenot A，BPA）2，20，100mg／kg。各组在断乳期PND21取雄性子代大鼠断头处死，迅速取脑组织进行免疫组织化学染色检测P450arom表达。结果：免疫组织化学染色结果显示，P450arom在大鼠海马和大脑皮层都有表达；对结果进行灰度值分析显示，高剂量组和中剂量组雄性子代大鼠断乳期P450arom在海马CA3区表达的灰度值分别为143．43和130．76，与对照组179．4612比较，有统计学意义；高剂量组雄性子代大脑皮层P450arom的灰度值为185．21，与对照组196．88比较，有统计学意义。结论：围生期暴露于BPA可使断乳期雄性子代脑中P450arom蛋白表达增加，这可能是影响发育机制的途径之一。     

氟对小鼠胚胎组织谷胱甘肽活性和卵黄囊细胞膜脂流动性的影响

目的探讨氟的发育毒性及其作用机理。方法8.5日龄的小鼠胚胎于体外培养系统中给予不同剂量的氟化钠,培养48 h后,观察胚胎生长发育和器官形态分化状况;并应用DTNB直接法测定胚胎组织谷胱甘肽(GSH)水平;以1,6鄄二苯己三烯为荧光探剂,用荧光偏振技术测定卵黄囊细胞膜脂质流动性。结果当培养液中氟浓度为10 mg/L时,卵黄囊直径未发生明显改变,胚胎生长发育和部分器官分化指标明显被抑制;15 mg/L时,畸形胚胎发生率明显升高,主要有前后神经管闭合不全、体翻转不全等(P< 0.05);氟浓度为10 mg/L时,胚胎组织GSH活性和卵黄囊细胞膜脂质流动性也显著降低(P< 0.05)。上述效应均呈现出一定的剂量-效应(反应)关系。结论氟有潜在的致畸性和胚胎毒性,胚胎组织GSH活性和卵黄囊细胞膜脂流动性降低可能在氟致胚胎发育毒性中起重要作用。     

甲状腺激素干扰物体内甄别实验初探

目的　研究二巯基敌枯双对甲状腺的生物作用 ,探讨二巯基敌枯双是否属甲状腺激素干扰物。方法Wistar大鼠 60只 ,随机分为正常对照组 ( n=3 0 )和实验组 ( n=3 0 )。正常对照组给予溶剂二甲基亚砜 ,实验组给予二巯基敌枯双二甲基亚砜溶液 ,剂量为 5 0 m g/kg。于给药第 5 d、第 10 d和第 2 0 d,动物称重后分别放血处死两组动物。测定血清中 T4和 TSH的浓度 ;取动物甲状腺称重测定甲状腺脏器系数 ;常规 HE染色 ,光镜下观察组织学变化 ;用免疫酶法测定核增殖抗原 ( PCNA)在甲状腺中的阳性表达 ;用酶组织化学方法观察甲状腺琥珀酸脱氢酶( SDH)、甲状腺过氧化物酶 ( TPO)活性的变化。结果　实验组各期甲状腺脏器系数显著高于同期对照组 ( P<0 .0 5 ) ;实验组各期甲状腺滤泡上皮增生 ;实验组各期 PCNA表达阳性细胞数明显高于同期对照组 ( P<0 .0 5 ) ;实验组各期甲状腺滤泡上皮内 SDH和 TPO酶活性也明显增高 ( P<0 .0 5 )。结论　初步确定二巯基敌枯双是甲状腺激素干扰物     

异黄酮类化合物对前列腺癌细胞PC-3增殖的抑制

[目的 ]通过观察金雀异黄素 (genistein ,GS)、大豆苷元 (daidzein ,DA)和大豆黄素 (glycitein ,GL)对前列腺癌细胞 (PC 3 )增殖的影响 ,探讨通过膳食干预途径预防前列腺癌发病的可行性。 [方法 ]将PC 3在PRMI 164 0培养液 (含10 %小牛血清 )中采用开放式单层贴壁培养。实验设溶剂对照组、顺铂阳性对照组及三种受试物各三个剂量组 (5× 10 -6mol/L ,2 5× 10 -6mol/L ,75× 10 -6mol/L) ,采用MTT法、3 H TdR掺入法及流式细胞术对PC 3的增殖情况进行分析。 [结果 ]与溶剂对照组相比 ,2 5 μmol/LGS、75 μmol/LDA和 75 μmol/LGL对PC 3处理 72h可抑制PC 3增殖 ,抑制率分别为42 %、5 0 %及 3 9%。三种受试物均可抑制细胞DNA合成并推进G0 /G1期细胞进入S期 ,降低细胞增殖指数。 [结论 ]大豆异黄酮类化合物GS、DA和GL均具有明显抑制前列腺癌细胞PC 3增殖效应 ,并呈现剂量 效应和时间 效应关系 ,提示通过膳食干预方式可预防前列腺癌的发生     

AS-PCR在ADH2、ALDH2基因多态型分析中的应用

[目的]为获得更为简便经济同时精确度足够高的酒精脱氢酶2(ADH2)和乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因多态型测定的新方法。[方法]建立并优化等位基因特异性PCR(alle lespecific-PCR，AS-PCR)方法，通过与经典HCR-RFIP方法的分型结果相比较考察其可行性。[结果]AS-PCR方法对60例DNA样本的ADH2、ALDH2基因的分型结果与PCR-RFLP法完全一致，且简便快速，成本低，特异性和准确度也足够高。[结论]AS-PCR方法分析ADH2、ALDH2基因多态型优点明显，尤其适于基层以及大规模调查应用。     

三聚氰胺与三聚氰酸对雄性大鼠的肾脏损伤及预后

目的研究三聚氰胺与三聚氰酸联合染毒后大鼠的肾脏损伤及预后。方法 80只成年雄性SD大鼠经口暴露于三聚氰胺和三聚氰酸,设1个对照组和3个实验组,每组20大鼠,每天对动物经口灌胃染毒1次,连续28d,停止染毒后继续观察14d,实验结束时收集大鼠血液、肾脏进行检测。结果三聚氰胺与三聚氰酸联合染毒会造成雄性SD大鼠体重增加受到抑制,肾脏脏器系数与血液生化指标改变,肾脏发生结晶现象,部分肾小管与肾小球结构破坏,肾脏病理损伤在停止染毒14d后并无缓解。结论三聚氰胺与三聚氰酸联合经口28d染毒引起雄性SD大鼠肾脏的病理损伤,在停止染毒后14d并无明显改善。     

长期低剂量甲醛染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE部分癌症相关基因启动子区甲基化的影响

目的探讨低剂量甲醛长期染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE癌症相关基因启动子区甲基化水平的影响。方法 16HBE细胞每周染毒甲醛10μmol·L-1 24h,连续24周,分别于染毒3,6,9,12,15,18,21和24周提取RNA或DNA,应用DNA甲基化相关酶消化结合荧光定量PCR的方法观察24个癌症相关基因启动子区甲基化水平的变化;应用荧光定量PCR的方法观察染毒对亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)和成对盒基因(PAX5)基因表达的时间-效应关系。结果与正常对照组16HBE细胞相比,甲醛染毒细胞4个基因甲基化水平显著改变,2个基因甲基化程度升高,2个基因甲基化程度降低;而在阳性对照人非小细胞癌上皮细胞A549细胞中有9个基因甲基化水平发生显著变化,其中3个基因甲基化水平升高,6个基因甲基化水平降低;甲醛染毒16HBE细胞和A549细胞MTHFR基因均发生高甲基化改变,PAX5基因均出现低甲基化改变。与正常对照组相比,甲醛染毒24周的细胞中,MTHFR基因启动子区甲基化水平升高,非甲基化DNA含量降低58.2%,而PAX5基因启动子区甲基化水平降低,非甲基化DNA含量升高27.1%;随着甲醛染毒时间延长,MTHFR基因表达逐渐降低,而PAX5基因表达逐渐升高。结论低剂量甲醛长期染毒可以使MTHFR基因和PAX5基因启动子区甲基化水平异常,进而引起基因表达水平改变。