saRNA在转录水平激活人膀胱癌细胞p21~（WAF1/CIP1）的表达研究

目的探讨小激活RNA-dsP21-322上调人膀胱癌细胞系T24中抑癌基因p21WAF1/CIP1（p21）表达的效应。进一步分析dsP21-322是否还可上调p21前体mRNA的表达,以及增强RNA聚合酶Ⅱ蛋白与dsP21-322靶向的p21启动子区的联系。方法合成靶向p21启动子区的小激活RNA序列dsP21-322及阴性对照（dsControl）,并分别转染至T24细胞,RT-qPCR和WesternBlot分别检测p21mRNA、前体mRNA和蛋白表达的变化。ChIP检测RNA聚合酶Ⅱ蛋白与dsP21-322靶向的p21启动子富集的改变。结果 RT-qPCR和WesternBlot结果显示,dsP21-322可以明显上调T24细胞系中p21成熟mRNA、前体mRNA及p21蛋白的表达,且与dsControl相比,差异均有统计学意义（P〈0.001）。此外,dsP21-322的转染可以明显增强RNA聚合酶Ⅱ蛋白与dsP21-322靶向的p21启动子区的联系。结论 dsP21-322上调抑癌基因p21表达是发生在转录水平的基因调控过程,这一特征的发现为后续RNA激活机制的研究提供了部分理论依据。     

小分子双链RNA对人类细胞中抑癌基因p21表达的上调作用

目的 筛选更多的对小分子双链RNA(dsP21-322)介导抑癌基因p21WAF1/CIP1激活起效应的人类细胞系,并初步研究该过程是否依赖p53的表达.方法 选择4种表达不同类型p53蛋白的人类细胞系,p53野生型(p53 wild type)的人骨肉瘤细胞系U2-OS、人肾上皮细胞系293T,p53突变型(p53 mutant type)的人宫颈癌细胞系HeLa及p53缺失(p53 null)的人肺腺癌细胞系NCI-H1299,转染dsControl(阴性对照)或dsP21-322至以上细胞,RT-qPCR和Western blot分别检测p21、p53 mRNA和蛋白表达的变化.结果 dsP21-322的转染未明显影响上述细胞系p53的表达;而在U2-OS、HeLa和293T细胞系中均能激活p21的表达,相比dsControl,分别上调p21 mRNA的表达3.97倍、4.94倍和4.64倍,Western blot进一步证明在这3种细胞系中p21蛋白表达水平的增加与p21 mRNA水平的上调相一致,且与dsControl组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).但是在p53缺失的NCI-H1299细胞系中,dsP21-322则不能上调p21的表达.结论 dsP21-322介导p21激活现象存在于人类细胞,而其未能上调p53缺失细胞系中p21的表达是否提示该过程可能依赖p53的表达尚有待进一步研究.     

广州白云国际机场急救中心应对重大突发公共事件的探讨

目的：探讨机场重大突发公共事件医学应急管理机制的建设和存在的问题。方法：对2008年抗冰雪保春运任务的组织、指挥和救治经验进行总结和分析。结果：白云国际机场急救中心接诊了2991例患者,杜绝了因医疗保障服务不到位而造成的伤亡事故。结论：完善机场应急管理机制和应急体系运行经费保障机制,进一步提高机场急救中心应对重大突发公共事件的管理水平。     

临床血脂检测新技术及其应用进展

垂直密度梯度离心、核磁共振波谱分析、电喷雾差分电迁移率分析、液相色谱串联质谱等临床血脂检测新技术、新方法日益成熟, 促进了低密度脂蛋白、高密度脂蛋白颗粒浓度及脂蛋白亚型相关参数等新项目在动脉粥样硬化性心血管疾病风险评估、调脂治疗疗效监测等方面的临床应用与推广。该文分析与总结了近年上述血脂检测新技术、新方法的研究进展, 希望能为临床个体化、精准化的血脂管理工作提供新思路。     

p21saRNA真核表达质粒的构建及其在泌尿系肿瘤细胞中的功能

目的 构建可表达具有RNA激活功能的小分子双链RNA(dsRNA)真核表达质粒,并探讨其调控前列腺癌细胞株PC-3和膀胱癌细胞株T-24中抑癌基因p21 WAF1/CIP1表达的功能.方法 构建真核表达质粒dsRNAP21-pGenesil-1,并分别转染至PC-3和T-24细胞株,通过实时定量聚合酶链反应( Real-time qPCR)和Western blot检测p21mRNA转录水平和蛋白表达的变化.结果 测序结果证实目的表达质粒dsRNAP21-pGenesil-1构建成功,将其转染入PC-3细胞和T-24细胞中,Real-time qPCR检测p21基因分别被上调4.35倍和2.83倍,Western blot进一步证明在两种细胞株中p21蛋白表达水平的增加与p21mRNA水平的上调一致,且与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 构建的dsRNAP21-pGenesil-1质粒具备在泌尿系肿瘤中上调抑癌基因p21表达的能力.     

冠心病患者血清游离脂肪酸、氧化脂蛋白(a)与冠状动脉病变程度的关系

目的分析冠心病(CAD)患者血清游离脂肪酸(NEFA)和氧化脂蛋白(a)[ox-Lp(a)]水平,探讨CAD患者该两种指标的关系,并评估其与冠状动脉病变狭窄程度的关系。方法选取急性冠状动脉综合征(ACS)患者56例、稳定性冠心病(SCAD)患者62例和健康对照者71例;测定血清NEFA和ox-Lp(a)水平,同时分析血脂水平、冠状动脉病变支数和Gensini积分。结果与健康人对照组相比,血清ox-Lp(a)(t=4.91,P0.01)和NEFA(t=7.77,P0.01)水平在CAD患者中均升高,且ACS患者ox-Lp(a)(t=2.84,P0.01)、NEFA(t=4.22,P0.01)水平高于SCAD患者。CAD患者中,冠状动脉多支病变组血清ox-Lp(a)(t=2.52,P=0.014)、NEFA(t=3.21,P0.01)水平高于单支病变组。CAD患者血清ox-Lp(a)(r=0.193,P0.05)和NEFA(r=0.322,P0.01)水平均与Gensini积分呈正相关。多元线性回归分析显示,冠状动脉病变支数和血清NEFA水平共同决定了Gensini积分34.6%的变化(β分别为0.497和0.225,P均0.01)。多因素Logistic回归分析显示,在校正了年龄、性别和其他血脂水平的影响后,血清高NEFA、ox-Lp(a)水平与ACS[ox-Lp(a),OR=1.159,95%CI=1.075~1.250,P0.01;NEFA,OR=1 118.185,95%CI=78.979~15 831.200,P0.01]、SCAD[ox-Lp(a),OR=1.082,95%CI=1.010~1.158,P0.05;NEFA,OR=65.007,95%CI=5.628~750.837,P0.01]的发生密切相关,且对ACS、SCAD的鉴别具有显著意义[ox-Lp(a),OR=1.072,95%CI=1.013~1.134,P0.05;NEFA,OR=17.201,95%CI=3.741~79.091,P0.01]。结论 CAD患者血清NEFA、ox-Lp(a)水平升高,且ACS患者NEFA、ox-Lp(a)水平高于SCAD患者;血清NEFA、ox-Lp(a)水平与冠状动脉病变狭窄程度密切相关。     

四面六边透水框架群护岸机理分析

本文针对架空率、框架尺寸和框架群总长度对水流减速效果的影响问题,对相关数据进行处理,运用相关分析、数理统计等方法,分别建立了非线性拟合、多元线性回归、代数方程等模型,利用Excel、Matlab软件得到了架空率、框架尺寸、框架群总长度分别对四面六边透水框架群减速效果的影响以及3种参数综合后对水流减速的影响,并得到3种参数对水流减速影响的精确经验公式。     

心中有数，安全使用消渴丸

居委会老李去年年底查出了糖尿病．医生让他服用消渴丸治疗。通过逐步调整消渴丸用量．结合饮食控制和运动治疗，只用了2个月时间，老李的血糖就控制达标了．而且三多一少的症状也大大改善。     

选购血糖仪8问

要想成功控制好血糖，对自己的血糖情况有个准确的了解是首要的前提条件。便携式血糖仪（即家用血糖仪）的出现，让问题变得容易了许多。糖尿病患者不必天天跑医院，在家自己就能检测血糖水平。