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91.
基因治疗在神经外科疾病的研究应用及其前景 总被引:1,自引:1,他引:0
基因治疗是指以临床治疗和基础研究为目的、通过载体介导方法将外源性遗传物质转移到人体靶细胞,并使其表达的一系列细胞与分子生物学技术和方法[1]. 相似文献
92.
目的总结多处软膜下横纤维切断术(MST)联合其他术式治疗顽固性癫疒间的手术经验。方法回顾性分析163例顽固性癫疒间病人的临床资料。根据术前脑电图、单光子发射断层扫描(SPECT)、正电子发射断层扫描(PET)、CT及MRI检查,结合术中皮质电极脑电图探测结果,标出致疒间灶地域图。在显微镜下先行脑结构性病灶切除。反复复查皮质脑电图,对周围和广泛性棘波发放区施行MST,直至皮质脑电图结果正常。结果术后疗效优(癫疒间发作完全消失)52例(31.9%),良(偶有发作)83例(50.9%),中(发作频率减少50%)10例(6.1%),差15例(9.2%),无改善3例(1.9%);手术总有效率88.9%。结论采用MST联合其他术式治疗癫疒间疗效较好,可提高病人的生活质量。 相似文献
93.
94.
pSiRNA-Shh逆转录病毒载体的构建及对恶性脑胶质瘤细胞作用的离体实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立逆转录病毒介导的人Shh基因RNA干扰体外表达体系并观察对恶性脑胶质瘤细胞的作用。方法将人Shh基因RNA干扰双链转录DNA片段重组到逆转录病毒质粒Psilencer 5.1-H1 Retro中,构建成携带人Shh基因RNA干扰逆转录病毒载体pSiRNA-Shh,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染恶性脑胶质瘤细胞株U251和CHG-5细胞,用WST-8、RT-PCR和Western Blotting分别检测对转染细胞活性、人Shh mRNA和蛋白表达的影响。结果重组pSiRNA-Shh质粒经测序鉴定正确。重组逆转录病毒滴度可达210×104CFU/ml,感染U251和CHG-5恶性脑胶质瘤细胞株后3 d能明显抑制细胞生长,RT-PCR和Western Blotting检测人Shh mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组。结论携带人Shh基因RNA干扰双链转录DNA片段的逆转录病毒体现出明显的抑制恶性脑胶质瘤细胞生长作用,为下一步开展基因治疗恶性脑胶质瘤奠定了基础。 相似文献
95.
目的从多形性胶质母细胞瘤组织标本中分离、培养、鉴定胶质瘤干细胞,并检测其所处的细胞周期。方法采用逐步递减培养基中血清含量的方式从多形性胶质母细胞瘤组织标本中获得悬浮生长的肿瘤球,应用免疫荧光染色检测胶质瘤干细胞及其分化细胞表面标志物的表达,免疫组化检测裸鼠颅内移植瘤表型。免疫磁珠分选多形性胶质母细胞瘤组织标本中的CD133阳性细胞后立即检测细胞周期。结果在多形性胶质母细胞瘤组织标本中成功分离出胶质瘤干细胞,在无血清培养液中呈悬浮生长,具有很强的自我更新与繁殖能力,免疫荧光染色显示该细胞表达CD133和巢蛋白,诱导分化后可分化成为神经元、星形胶质细胞与少突胶质细胞,裸鼠颅内移植后可重现亲本肿瘤表型。位于其中的胶质瘤干细胞大多处于G0~G1期。结论多形性胶质母细胞瘤组织中存在胶质瘤干细胞,相对处于静止状态。 相似文献
96.
目的探讨脑胶质瘤中异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenases 1,IDH1)突变和O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)基因启动子甲基化状态及二者之间的关联性。方法收集手术切除并经病理证实的脑胶质瘤组织133例,采用巢式甲基化特异性PCR(nested methylation-specific PCR,n MSP)法和甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法联合变性高效液相色谱分析(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)法检测脑胶质瘤中的MGMT基因启动子甲基化情况,直接测序法检测脑胶质瘤中IDH1基因的突变情况。采用χ2检验进行IDH1突变和MGMT基因启动子甲基化关联度的统计分析。结果 133例脑胶质瘤患者中MGMT基因启动子甲基化88例(66.17%),IDH1突变62例(46.62%)。IDH1突变和MGMT基因启动子甲基化存在关联(P=0.01)。结论脑胶质瘤中IDH1突变和MGMT基因启动子甲基化之间关联显著,提示两者在脑胶质瘤的发生发展中可能存在相互调节的作用;IDH1突变和MGMT基因启动子甲基化是脑胶质瘤的重要疾病相关因素。 相似文献
97.
98.
目的 建立逆转录病毒介导的人Notch1基因RNA干扰体外表达体系并观察对恶性脑胶质瘤细胞的作用.方法 将人Notch1基因RNAi双链转录DNA片段重组到逆转录病毒质粒Psilencer 5.1-H1 Retro中,构建成携带人Notch1基因RNAi逆转录病毒载体pSiRNA-Notch1,经PT6细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染U251和CHG-5恶性脑胶质瘤细胞,用WST-8、RT-PCR和Western blot分别检测对转染细胞活性、人Notch1 mRNA和蛋白表达的影响.结果 重组pSiRNA-Notch1质粒经测序鉴定正确.重组逆转录病毒滴度可达224×10 4cfu/ml,感染U251和CHG-5恶细胞后3 d能明显抑制细胞生长,RT-PCR和Western blot检测人Notch1 mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组.结论 携带人Notch1基因RNAi双链转录DNA片段的逆转录病毒有明显的抑制恶性脑胶质瘤细胞生长作用,为下一步开展基因治疗恶性脑胶质瘤奠定了基础. 相似文献
99.
人脑胶质瘤干细胞增殖和分化过程中NOTCH-1信号通路的调控 总被引:2,自引:0,他引:2
背景:研究发现NOTCH-1信号通路在神经干细胞或种经前体细胞的自我更新、增殖及分化中起重要作用.目的:探讨NOTCH-1信号通路在人脑胶质瘤干细胞增殖和分化过程中的调控作用.设计、时间及地点:开放性实验,于2005-01/2007 03在解放军第三军医大学新桥医院完成.材料:人脑胶质瘤组织、正常成人脑组织由解放军第三军医大学新桥医院神经外科提供.U251胶质瘤细胞株由解放军第三军医大学新桥医院神经外科吕胜青副教授惠赠:CHG-5胶质瘤细胞株由解放军第三军医大学西南医院病理研究所卞修武教授、姚晓红博士惠赠.方法:取人脑胶质瘤组织、正常成人脑组织、U251及CHG-5胶质瘤细胞株,采用免疫磁珠法分选获得CD133+脑胶质瘤干细胞,加入DMEM/F12无血清培养基进行增殖培养,形成细胞克隆后,加入含体积分数为10%胎牛血清的培养液,2 h后行抗CD133和抗巢蛋白免疫荧光双标染色.主要观察指标:人脑胶质瘤十细胞的生长和鉴定,采用WST-8法、免疫组化实验、流式细胞仪、免疫荧光双标实验检测NOTCH-1信号通路蛋白的表达.结果:在无血清培养基中,细胞呈悬浮生长,培养24~48 h可见单个细胞开始分裂生长,形成肿瘤球,将肿瘤球转入含胎牛血清的培养基后,4 h周边细胞伸出突起并逐渐分化,24 h后肿瘤球迁移出的细胞增多,形成单细胞层.肿瘤球能同时表达干细胞标志物CDl33和巢蛋白,CD133脑胶质瘤干细胞核浆比例达2/3~3/4,突起少,胞浆中线粒体等细胞器较少,核糖体丰富,未见胶质丝等分化结构,符合干细胞超微结构特点.NOTCH-1蛋白在人脑胶质瘤组织中的表达明显强于正常成人脑组织(P<0.01),在CDl33+U251及CHG-5胶质瘤细胞中有很强的表达,在GFAP+和MAP2+U251及CHG+5胶质瘤细胞中的表达强弱不等,在MBP+U251及CHG-5胶质瘤细胞中早弱表达或不表达.在脑胶质瘤干细胞增殖过程中能检测到较强的NOTCH-1信号通路关键基因NOTCH-1,CBF-1,HES-1 mRNA及NO和TChH-1,HES-1蛋白表达;而在细胞分化时NOTCH-1信号通路关键基因NOTCH-1,CBF-1,HES-1 mRNA和HES-1蛋白表达逐渐减弱.结论:NOTCH-1信号通路的关键蛋白分子NOTCH-1在人脑胶质瘤组织和胶质瘤细胞株中均有表达,而在正常成人脑组织中仅微弱表达.NOTCH-1信号通路关键基因NOTCH-1和HES-1的表达强弱可能参与了胶质瘤干细胞增殖和分化的调控. 相似文献
100.
住院医师规范化培训是指住培人员以住院医师身份在国家认定的培训基地接受系统性、规范化的培训,以提高临床实践能力的培训过程。住培基地建设是依据国家政策法规实施住培制度的重要环节,以新桥医院神经外科基地建设为例,围绕基地建设的要求和评估指标进行详尽分析讨论,提出了神经外科基地建设的具体目标、举措和实施环节,尤其对神经外科住培人员需要掌握的疾病诊疗过程和手术操作作出了明确规定。通过对新桥医院神经外科基地建设的细化解读与具体实施,总结经验、克服不足,将有助于提高我国住院医师规范化培训的质量。 相似文献