腈水解酶2基因沉默细胞模型的制备

目的为腈水解酶2（NIT2）基因研究奠定基础。方法采用siRNA质粒转染技术制备NIT2基因沉默细胞模型,用筛网方法从大鼠肾脏中提取出肾小球用于培养原代系膜细胞,将NIT2靶序列构建pGU6/GFP/Neo质粒中（siNIT2质粒）,采用JETPRIME脂质体转染法将质粒转染入原代系膜细胞中,48h后荧光显微镜观察转染效率,利用SYBR GREEN 1定量PCR法检测NIT2基因表达,琼脂糖凝胶电泳观察PCR产物。结果荧光显微镜下转染阳性率可达50%,定量PCR结果示siNIT2质粒转染后NIT2 mRNA显著降低,琼脂糖电泳结果示PCR产物无明显杂带。结论 siRNA质粒转染法可抑制原代系膜细胞NIT2基因的表达;为NIT2基因功能研究奠定了基础。     

高效液相色谱指纹图谱在熟地黄质量稳定性中的应用

目的研究分析高效液相色谱指纹图谱在熟地黄质量稳定性中的应用情况。方法采用安捷伦(13569)高效液相色谱仪,流动相:乙腈-0.1%醋酸溶液;柱温:25℃;检测波长:300 nm;流速:1 ml/min,梯度洗脱,将样品溶液进样5 ul,记录色谱图,考察各批次熟地黄质量的稳定性和一致性。结果经方法学考察,实验方法具有良好的稳定性、重复性和精密度。各批次蒸熟地黄样品与其共有图谱相似度较高,仅4号和7号样品相似度低于0.9,各批次酒熟地黄样品与其共有图谱相似度较高,仅6号样品相似度低于0.9,产品质量较好,且酒熟地黄的一致性优于蒸熟地黄。结论应用高效液相色谱指纹图谱评价熟地黄质量稳定性方法稳定,重复性好,可见该方法是建立熟地黄质量评价和控制的重要手段。     

中医药辨治骨关节炎研究进展

随着肥胖人口的增加,人类寿命的延长及人口老龄化程度的加重,骨关节炎不仅严重影响中老年人的自理能力和生活质量,同时又给家庭和社会造成沉重的负担。目前西医治疗骨关节炎大多局限于缓解症状,并不能阻断病变的发展进程,且存在多种不良反应。中医药的内、外治法在OA的辨治方面不良反应少,药简而效彰。通过查阅近年相关文献,对中医药内、外治法治疗骨关节炎常用方法进行归纳总结,内治法从不同辨证分型、外治法从不同治疗方法进行阐述,发现中医药内外治法综合使用疗效极佳,建议在内服中药、中成药的基础上辅以中医外治法,中医药的内外综合治法对于骨关节炎的治疗具有显著疗效,值得临床推广应用。     

来自于肉苁蓉的一个新天然产物(英)

从中药肉苁蓉（CistanchedeserticolaY.C.Ma）中得到一个新天然产物,2,5-二氧-4-咪唑烷基-氨基甲酸,经光谱鉴定和X-射线衍射推定其化学结构和立体构型。     

大分割放疗联合EP方案化疗治疗局限期小细胞肺癌的临床疗效及安全性

Objective To investigate the efficacy and safety of hypofractionated thoracic radiotherapy combined with EP chemotherapy in the treatment of limited-stage small-cell lung cancer (LS-SCLC). Methods A total of 117 patients with LS-SCLC were enrolled and randomly divided into test group (n=59) and control group (n=58). Patients in the experiment group were given hypofractionated thoracic radiotherapy combined with EP chemotherapy, while patients in the control group were given hyperfractionation radiotherapy combined with EP chemotherapy. Objective response rate (ORR), 2-year overall survival (OS), 2-year progression free survival (PFS), and immune cell level were used to evaluate clinical efficacy. We compared the incidence of side effects between the two groups. Results After the treatment, the ORR of patients in the test group was higher than that in the control group (P>0.05). The mean OS and PFS of patients in the test group were significantly longer than those in the control group (P<0.05). The levels of CD3+, CD4+, CD4+/CD8+, and NK cells in the test group were significantly higher, whereas the levels of CD8+ were significantly lower than those in the control group (P<0.05). The incidence of radiation pneumonitis, radiation esophagitis, and severe dermatitis in the test group was significantly lower than that in the control group (P<0.05). Conclusion Hypofractionated radiotherapy combined with EP chemotherapy for treatment of LS-SCLC can effectively improve the anticancer efficacy and patient survival, reduce the damage to the body’s immune function, and alleviate adverse reaction of radiotherapy. © 2023, CHINA RESEARCH ON PREVENTION AND TREATMENT. All rights reserved.     

生化法检测胃蛋白酶原1、胃蛋白酶原2对胃炎患者诊断价值

目的分析探讨在生化法检测下胃蛋白酶原1和胃蛋白酶原2对胃炎患者的诊断价值。方法选择我院于2018年3月至2018年12月收治的胃炎患者90例作为本次研究的实验组,再选择同时期到我院体检的健康者90例作为本次研究的对照组。通过对两组对象的血清标本检测,并分析其血清胃蛋白酶原1(PG1)、胃蛋白酶原2(PG2)、胃蛋白酶原比值(PGR)的水平变化,以筛查胃炎患者。结果实验组患者的PG1、PGR水平均明显降低,PG2水平明显提高,与对照组的差异均有统计学意义(P0.05)。并且,实验组中不同类型的胃炎患者,其PG1、PG2和PGR的水平变化均有所不同,且差异均有统计学意义(P0.05)。同时,血清胃蛋白酶水平检测与胃镜检测诊断胃炎患者的准确性差异不大。结论血清胃蛋白酶生化检测对胃炎患者的诊断具有较高的应用价值,且其检测方法简便、无痛,便于对患病人群进行早期诊断和治疗,降低了胃癌的发生率。     

IgA肾病患者肾脏组织中差异细胞因子的探索研究

目的筛选IgA肾病(IgAN)患者肾脏组织中的差异蛋白质-细胞因子,进一步探讨IgAN的发病机制。 方法入选年龄18～60岁,解放军总医院肾脏病科住院肾活检确诊为IgAN患者10例;泌尿外科行肾癌肾脏切除的患者10例,取癌旁6 cm以外正常肾脏组织作为对照。肾脏组织利用L-493细胞因子抗体芯片进行检测,筛选差异蛋白质,并对差异蛋白质进行基因本体论(GO)分析。以IL-33(白介素-33)利用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行验证。采用IBM SPSS Statistics 19.0软件对结果进行统计分析,利用T检验对差异蛋白质进行筛选,P<0.05,并且差异蛋白质差异倍数>1.4认为是差异蛋白质。 结果L-493细胞因子抗体芯片检测,在20例患者中(IgAN组10例,对照组10例),发现了25种差异蛋白质,GO分析结果表明：这些蛋白质主要与应激、细胞粘附、蛋白质代谢、信号转导相关。ELISA验证结果显示：IgAN患者肾组织中IL-33表达水平显著高于对照组。 结论IgAN患者肾脏组织中差异表达蛋白质直接或间接调控着炎症、细胞增殖和凋亡及纤维化过程。IL-33可能与IgAN发病机制有关。     

miR-34a调控HEK293细胞自噬作用的初步研究

目的探讨miR-34a对HEK293细胞自噬作用的影响。方法采用miR-34a模拟物(模拟物组)和miR-34a抑制剂(抑制剂组)分别转染HEK293细胞,并设空白对照(对照组)。采用定量PCR检测miR-34a、p53基因表达的变化,Western blotting检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ及p53表达的变化,并采用生物信息学方法分析miR-34a对自噬相关基因(Atg6/beclin1、sestrin2、FoxO3等)的可能作用。结果定量PCR结果显示,模拟物组miR-34a表达显著上调(P<0.05),抑制剂组miR-34a表达显著下调(P<0.05)。与对照组相比,miR-34a模拟物可显著抑制HEK293细胞LC3Ⅱ蛋白的表达(P<0.05),而miR-34a抑制剂则显著上调HEK293细胞LC3Ⅱ蛋白的表达(P<0.05)。定量PCR和Western blotting结果显示,各组p53mRNA及蛋白表达无统计学差异。生物信息学分析显示,Atg6/beclin1、sestrin2、FoxO3等自噬相关基因是miR-34a潜在的靶基因。结论miR-34a能抑制HEK293的自噬作用,可能是通过直接抑制...     

恶性肿瘤细胞系自发性老化的研究

目的:探讨恶性肿瘤细胞系是否普遍存在自发性老化.方法:应用老化相关半乳糖苷酶(senescence-associated beta-galactosidase,SA-β-Gal)染色法检测10种恶性肿瘤细胞系中SA-β-Gal的表达情况,以及血清饥饿后该酶的表达变化.结果:在无诱导处理且处于对数生长期的10种恶性肿瘤细胞系中,均发现有SA-β-Gal表达阳性的细胞,但不同细胞系中该酶表达阳性的老化细胞所占比率明显不同,最低的是宫颈癌HeLa细胞系(0.65 %),最高的是肝癌HepG2细胞系(3.69 %) (F=13.006,P=0.000);SA-β-Gal阳性表达的老化细胞不都是多倍体细胞;给予无血清培养液饥饿24 h后,老化细胞数目明显增加(P=0.001).结论:恶性肿瘤细胞系会发生自发性老化,其程度与细胞系种类有关.短期饥饿培养会明显增加老化细胞所占的比率,提示饥饿诱发细胞老化可能是抗肿瘤治疗的又一快速、简单且有效的途径.     

多元统计及“成分-靶点-疾病”在线关联分析脑心通胶囊中质量标志物

目的基于质量标志物(Q-marker)概念,通过筛选脑心通胶囊Q-markers,构建活性化合物-靶点网络,建立脑心通的整体质控方法。方法采用多元统计方法找到多批次脑心通胶囊的特异性成分,运用基于BATMAN-TCM网络药理学计算平台构建"Q-markers-靶点-通路-疾病"网络,并进行生物学信息注释。进一步建立超高效液相色谱法(UPLC)同时质控Q-markers的分析方法。结果多元统计分析将桑皮苷A、羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、毛蕊异黄酮苷、迷迭香酸、丹酚酸B、芒柄花素和丹参酮IIA 9种成分初步确定为脑心通胶囊整体质控的Q-markers。通过靶点网络构建和拓扑学分析结果推测,Q-markers主要作用于PTGIS、PTGS2、CHRNA10、ENPP1和ADORA2A 5个关键靶点。针对Q-markers建立的UPLC质控方法,线性关系良好(r0.999),重复性、稳定性、精密度试验RSD均3%。结论基于多元统计,网络药理学和UPLC多成分定量测定技术的Q-markers辨析方法,可以初步建立有效成分群多角度的分析方法,并用于脑心通胶囊的质量控制。