白细胞介素10启动子基因多态性与强直性脊柱炎的易感性

背景：在强直性脊柱炎患者中,基因多态性很可能影响细胞因子的分泌模式.目的：在中国胶东半岛地区汉族人强直性脊柱炎患者中,探讨白细胞介素10启动子基因的单核苷酸多态性和单体型与强直性脊柱炎易感性的相关性.方法：用酶联免疫吸附测定法测定血清中白细胞介素10的水平,用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性方法对白细胞介素10基因启动子中的-1082A/G、-819C/T和-592C/A位点的单核苷酸多态性进行分析.结果与结论：收集了110例强直性脊柱炎患者和120例同种族的健康人,强直性脊柱炎患者组血清中白细胞介素10水平明显高于健康对照组（Z=10.9,P 〈0.001）,单核苷酸多态性分析显示：在强直性脊柱炎患者组和健康对照组之间-592A/C位点基因型分布和等位基因频率没有明显差异,该研究中没有发现-1082GG基因型.强直性脊柱炎患者-1082G等位基因频率较健康对照组增加（P=0.047）,通过logistic回归分析,强直性脊柱炎患者-1082AG 基因型的比值比为1.993（95%CI：1.046-3.800,P=0.034）,而-819CC基因型的比值比为3.125（95%CI：1.246-7.836,P=0.015）,此外,单体型分析显示与ATA 基因型相比,GCC基因型显著增加了患强直性脊柱炎的风险（OR=2.19,95%CI：1.13-4.26,P=0.020）.结果表明白细胞介素10的基因单体型与中国胶东半岛地区汉族人强直性脊柱炎的易感因素相关.     

青岛地区特立帕肽治疗绝经后重度骨质疏松症6个月(阶段性)有效性和安全性

目的观察特立帕肽治疗绝经后重度骨质疏松症6个月后的有效性和安全性,观察骨密度和骨代谢标志物的变化。方法选取2016年10月-2017年9月于青岛市3家医院治疗的218例绝经后重度骨质疏松症患者,预计疗程13个月。截止到2017年9月共有160例患者完成了6个月的治疗并接受随访。治疗前和治疗后3、6个月测定Ⅰ型前胶原氨基端前肽(procollagen type 1 N-terminal propeptide,P1NP)和Ⅰ型胶原C端肽β降解产物(β-C-terminal telopeptide of type 1 collagen,β-CTX);治疗前和治疗6个月行双能X线吸收检测法(dual energy X ray absorptiometery,DXA)骨密度检查,并监测患者的不良事件。结果与基线(21. 04±9. 28)μg/L相比,特立帕肽治疗3、6个月后,P1NP分别升至(135. 75±61. 32)和(193. 35±54. 93)μg/L(P0. 001);而与基线(0. 12±0. 05)μg/L相比,治疗3、6个月后β-CTX分别升至(0. 49±0. 28)和(0. 64±0. 22)μg/L (P0. 05)。骨密度基线和治疗6个月相比,L1-4 (0. 692±0. 125) g/cm2vs.((0. 744±0. 130) g/cm2,股骨干(0. 749±0. 168) g/cm2vs.(0. 789±0. 117) g/cm2,均有提升(P0. 05)。结论中国青岛地区绝经后重度骨质疏松患者使用特立帕肽治疗6个月后,P1NP和β-CTX水平明显提升,且PINP比β-CTX提升的更明显,有利于促骨形成;同时L1-4、股骨干骨密度提升,且无明显严重不良反应。     

自体骨软骨柱及骨膜骨柱混合嵌入修复大面积骨软骨复合缺损

骨软骨缺损是指同时有软骨下骨和软骨的复合缺损,重建坚强的软骨下骨支撑和光滑的软骨面对于远期效果同等重要.     

人胰岛素样生长因子1基因转染脂肪源性干细胞的效应

背景：人胰岛素样生长因子1基因对脂肪源性干细胞的增殖和分化也可能会产生有效作用。目的：验证人胰岛素样生长因子1基因转染对体外培养的脂肪源性干细胞的效应。方法：构建含人胰岛素样生长因子1基因的双顺反子真核表达载体plRES2-EGFP-hlGF-1,利用阳离子脂质体Lipofectamine2000介导转染体外培养的人脂肪源性干细胞。观察基因转染后细胞增殖及形态的变化,倒置荧光显微镜观测标记基因增强绿色荧光蛋白的表达并计算转染效率,酶联免疫吸附试验检测培养上清中人胰岛素样生长因子1的浓度,免疫组织化学染色及RT-PCR检测人胰岛素样生长因子1的表达,流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化。结果与结论：测序及酶切证实真核表达载体plRES2-EGFP-hlGF-1构建正确。体外培养的脂肪源性干细胞为多种形态并存,转染后6h检测到有EGFP的表达,至60h达到高峰,转染效率为（16±3）％。细胞上清中人胰岛素样生长因子1的浓度在60h达到22．65υg／L。免疫组织化学染色及RT-PCR均检测到人胰岛素样生长因子1的表达。转染后的细胞分裂增殖加快,细胞群体倍增时间缩短,S期细胞比例增多。证实人胰岛素样生长因子1基因可有效转染脂肪源性干细胞并表达人胰岛素样生长因子1蛋白质,同时可促进细胞增殖。     

转化生长因子β3基因转染兔骨髓间充质干细胞诱导其向软骨表型的分化

背景:内源性诱导软骨分为就是通过一定的载体将目的基因整合入干细胞内,使其自行分泌诱导因子诱导自身进行分化.目的:观察将转化生长因子β3 通过腺相关病毒载体转染诱导兔骨髓间充质干细胞向软骨表型转化的能力.方法:取体外培养的第3 代骨髓间充质干细胞进行重组腺相关病毒转染,将转染后3,6,9,12 d 细胞裂解提取蛋白进行酶联免疫检测目的蛋白转化生长因子β3 的体外表达.RT-PCR,免疫印迹western blot 分别从基因和蛋白水平上检测1,2 周Ⅱ型胶原的表达,甲苯胺蓝染色检测1,2 周蛋白多糖的表达.结果与结论:重组腺相关病毒转染后,骨髓间充质干细胞可以较稳定的表达目的蛋白转化生长因子β3,并且转染成功的骨髓间充质干细胞较阴性对照组能够更好的向软骨表型转化.证实转化生长因子β3 可以腺相关病毒为载体转染骨髓间充质干细胞并诱导其向软骨表型分化.     

大直径金属/金属股骨头人工全髋关节置换治疗股骨头缺血坏死

背景：与以往大直径股骨头的高磨损率和高髋臼松动率相比,新一代大直径金属对金属全髋关节有着更长的使用寿命和低磨损,低脱位率等优点。目的：评价应用大直径金属/金属股骨头人工全髋关节置换术治疗股骨头缺血坏死的临床疗效。方法：回顾性分析26例股骨头缺血坏死患者实施单侧大直径金属/金属股骨头人工全髋关节置换资料。结果与结论：所有患者均获得随访,在随访期内影像学显示假体位置良好,无假体松动,脱位等并发症。Harris评分由置换前49.5分改善为置换后92.5分,优良率为96%,总体满意率为96%。置换前后及随访时未发生假体松动、脱位、感染等不良反应。说明大直径金属/金属股骨头全髋关节置换治疗股骨头缺血坏死可获得较好的疗效,短期内无明显肾功能变化。     

不同手术方法治疗高龄股骨粗隆间骨折的病例对照研究

目的 :分析股骨近端锁定接骨板(LPFP)、股骨近端防旋髓内钉(PFNA)及双极人工股骨头置换(BPH)治疗高龄老年人股骨粗隆间骨折的临床效果。方法:回顾性分析2011年6月至2016年8月采用LPFP、PFNA内固定及BPH治疗的75岁以上高龄股骨粗隆间骨折86例患者临床资料,LPFP组男10例,女16例;年龄(72.54±4.78)岁;EvansⅡ型5例,Ⅲ型12例,Ⅳ型9例。PFNA组男17例,女22例;年龄(74.41±5.65)岁;EvansⅡ型11例,Ⅲ型18例,Ⅳ型10例。BPH组男9例,女12例;年龄(76.23±6.97)岁;EvansⅡ型1例,Ⅲ型10例,Ⅳ型10例。病程2~3个月。比较3组手术时间、术中出血量、住院时间、术后并发症发生率和髋关节功能Harris评分。结果:术后患者伤口愈合良好,无并发症发生。84例获得随访,2例失访(随访率为97.6%)。随访时间22~41个月,平均26.3个月。手术时间及住院时间比较中,BPH组比LPFP组和PFNA组明显缩短(F=19.782,21.981;P0.05);术中出血量的比较中,BPH组比PFNA组和LPFP组明显减少(F=12.976,P0.05);PFNA组与LPFP组比较差异无统计学意义(t=10.879,P0.05)。术后并发症发生率的比较中,LPFP组较PFNA组和BPH组高(F=30.976,P0.05);PFNA组与BPH组比较差异无统计学意义(χ~2=9.902,P0.05)。术后1年髋关节功能Harris评分的比较中,PFNA组和BPH组均优于LPFP组(F=19.692,P0.05),而PFNA组与BPH组比较差异无统计学意义(t=4.971,P0.05)。结论:对于全身情况较差的高龄患者(75岁),BPH手术时间短,术后并发症少,是最优的选择。对于单纯的股骨粗隆间骨折患者,PFNA也具有明显的优势,术者可根据情况选择。对于高龄的股骨粗隆间骨折患者,不建议应用LPFP。     

慢病毒介导的aggrecanase-2 shRNA转染对类风湿关节炎患者软骨细胞aggrecan的影响

 目的 探讨慢病毒介导的agggrecanase-2 shRNA对类风湿关节炎患者软骨细胞aggrecan的影响。方法 术中切取类风湿关节炎患者关节软骨,通过胰酶+Ⅱ型胶原酶两步消化法消化软骨块并培养,取第2~3代软骨细胞。以慢病毒为载体将aggrecanase-2 shRNA5~8转染进入软骨细胞,观察转染后细胞的生长变化;以荧光定量PCR检测转染后第2、5、10天aggrecanase-2 mRNA水平的变化及aggrecan mRNA水平的变化,以循环阈值（cycle threshold,Ct）表示;用免疫组织化学方法检测aggrecan蛋白水平的变化,以积分光密度（integral optical density,IOD）表示,筛选最佳抑制序列。结果 以慢病毒为载体介导aggrecanase-2 shRNA转染软骨细胞后对细胞生长速度及形态无明显影响。加入病毒液200 μl、100 μl、50 μl后感染复数分别为100、50、25,转染效率分别为90%、60%、30%。转染后aggrecanase-2 mRNA的表达水平明显下降,特别是mRNA5,由开始的0.876 3±0.115 6 下降至0.069 9±0.015 1（P＜0.05）;aggrecan mRNA 水平显著上调,由开始的0.992 1±0.201 3增加至3.049 2±0.278 2（P＜0.05）;aggrecan蛋白表达水平显著提高,由开始的496.160 5±225.673 7 增加至4 525.433 0±1 131.813 0（P＜0.05）;最佳抑制序列为aggrecanase-2 shRNA5。结论 以慢病毒为载体介导aggrecanase-2shRNA转染骨关节炎患者软骨细胞可有效干扰aggrecanase-2 mRNA表达,相应地增加aggrecan表达,是一种保护aggrecan的有效途径。     

不同浓度透明质酸对骨髓来源间充质干细胞成软骨分化的影响

目的探讨不同浓度透明质酸(HA)对骨髓来源间充质干细胞(MSCs)向软骨方向定向分化的影响。方法 取P3代未诱导的骨髓来源间充质干细胞,按培养液中添加的HA浓度不同分为两实验组,A组:低浓度组(基础培养基+HA0.1mg/ml);B组:高浓度组(基础培养基+HA0.2mg/ml)。同时设立空白对照组(基础培养基)及阳性对照组(基础培养基+10ng/mlTGF-β3),观察细胞形态、增殖情况并绘制生长曲线,分别于诱导后第7、14、21天行免疫组化染色及RT-PCR检测细胞Ⅱ型胶原表达。结果 经添加软骨诱导剂后,干细胞的细胞增殖速度放缓,形态由长梭形变为多角形、椭圆形,胞质Ⅱ型胶原免疫组化阳性,RT-PCR检测示Ⅱ型胶原mRNA表达阳性,表现出软骨细胞的分化特点,半定量分析显示两实验组Ⅱ型胶原表达无差异,但均比阳性对照组弱,空白对照组无Ⅱ型胶原表达。结论 不同浓度外源性HA诱导兔MSCs向软骨细胞分化的能力无差异,且均比TGF-β3的诱导能力弱。提示HA作为细胞外基质的主要成分,有促进MSCs向软骨细胞分化的作用,但改变外环境中HA浓度不会影响MSCs的软骨分化。自体关节腔内环境支持以干细胞为基础的组织工程...     

严重痛风的外科治疗(附8例报告)

目的探讨手术治疗严重痛风的临床疗效。方法对8例严重痛风患者采用外科治疗,分别采用关节内类固醇注射、关节镜下病变清理术、痛风病灶清除术、刮除植骨术、Keller手术及关节融合术等。结果术后切口6例一期愈合,2例由于尿酸盐残留延迟愈合。术后随访2个月~2.5 a,平均13个月。随访2个月时血尿酸较术前平均下降45%,4例无高尿酸血症。疼痛解除5例,缓解3例;局部软组织及骨质破坏进程阻断,3例植骨术后12个月愈合。1例手术部位痛风石复发。5例术后无急性发作,3例在2 a内有再次急性发作史,发作部位为非手术部位,应用秋水仙碱可控制症状。结论积极适时的外科治疗可及时阻断痛风的病变进程,减轻机体尿酸负荷,有利于提高患者的生活质量和功能的改善。