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【摘要】 目的 探讨晚期糖基化终产物(AGE)对大鼠肾小球内皮细胞(rGEnC)紧密连接的影响及激活细胞内肾素血管紧张素系统(RAS)在其中的作用。 方法 采用原代培养的rGEnC,予不同浓度AGE(20、40、80 mg/L)分别作用6 h、12 h和24 h,采用跨内皮细胞电阻抗和异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白滤过率观察通透性的变化;Western印迹检测晚期糖基化终产物受体(RAGE)、紧密连接蛋白[occludin、claudin-5、连接黏附分子A(JAM-A)和闭合小环蛋白1(ZO-1)]和细胞RAS组分[血管紧张素原、肾素和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型受体(AT1)]蛋白表达量的变化;免疫荧光技术显示紧密连接的完整性;紫外光法和酶免疫分析技术测定细胞内外血管紧张素转化酶(ACE)活性及AngⅡ水平。 结果 AGE可引起内皮细胞通透性、RAGE表达量、ACE活性、AngⅡ浓度和AT1表达量的升高,occludin、claudin-5和JAM-A表达量的下降。加入抗RAGE抗体(100 mg/L)预处理后,上述AGE作用被阻断。AGE可引起上述紧密连接蛋白在细胞连接处的中断。予卡托普利(1 mmol/L)或缬沙坦(10 μmol/L)预处理可部分阻断AGE上述效应。 结论 AGE可通过上调RAGE表达,激活细胞内肾素血管紧张素系统,破坏肾小球内皮细胞紧密连接,导致其通透性的升高。 相似文献
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目的: 探讨IgA肾病血清IgA1与系膜细胞共培养上清对足细胞分泌TNF-α的影响及机制。方法:Jacalin 亲和层析柱和Sephacryl S-200 分子筛用来纯化蛋白,单体IgA1(mIgA1)热聚合为聚合体IgA1(aIgA1), 同步化的系膜细胞与患者和健康对照来源的aIgA1共培养,收集上清,分别与同步化的足细胞作用;ELISA检测足细胞上清TNF-α水平,real time PCR 检测凋亡相关基因Ang、ACE mRNA表达情况。结果:IgAN患者来源的aIgA1与系膜细胞共培养得到上清可刺激足细胞分泌TNF-α,其水平显著高于对照组[(12.47±1.45) ng/L vs (2.33±0.65) ng/L,P<0.05]。与对照和健康上清组相比,该上清可上调足细胞Ang和ACE mRNA显著升高(P<0.05)。依那普利拉(10-5 mol/L)可使该上清作用后的足细胞分泌的TNF-α显著下降至(7.52±1.12) ng/L (P<0.05);而缬沙坦(10-5 mol/L)则使之下降至(6.64±0.68) ng/L (P<0.05);而依那普利拉(0.5×10-5 mol/L)和缬沙坦(0.5×10-5 mol/L)联合治疗可使足细胞TNF-α下降至(2.72±0.55) ng/L,与对照无显著差异(P>0.05)。结论:IgA肾病患者血清IgA1与系膜细胞共培养上清可通过激活肾素-血管紧张素系统而刺激足细胞TNF-α分泌,参与IgAN的进展。 相似文献
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【目的】 探讨IgA肾病患者血清IgA1对足细胞凋亡的影响。 【方法】 Jacalin 亲和层析和Sephacryl S-200 分子筛用来纯化蛋白,单体IgA1(mIgA1)热聚合为聚合体IgA1(aIgA1), 同步化的足细胞与患者和健康对照来源的aIgA1共培养,流式细胞仪评价细胞凋亡情况,Real time PCR 检测Bcl-2, Bax, Fas and Fas-L mRNA表达情况。 【结果】 IgAN患者的aIgA1可诱导足细胞的凋亡,其凋亡率显著高于对照组[(30.5 ± 5.4)% vs (20.6 ± 4.5)%, P < 0.05];而健康对照的aIgA1可诱导足细胞的凋亡,凋亡率也显著高于对照[(31.4 ± 5.3)% vs (20.6 ± 4.5)%,P < 0.05];IgAN患者的aIgA1诱导足细胞的凋亡呈现时间和浓度依赖?与对照相比,IgAN患者和健康对照来源的aIgA1诱导足细胞Fas mRNA 升高2.4倍(P < 0.05),而Bcl-2 mRNA和Bax mRNA无显著性变化(P > 0.05)。【结论】 IgA肾病患者血清IgA1可诱导足细胞的凋亡,其可能参与IgAN的进展。 相似文献
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【目的】 观察晚期糖基化终产物对内皮细胞血管生成样蛋白-4表达的影响及作用机制?【方法】 不同浓度晚期糖基化终产物(AGE)干预内皮细胞24 h,实时荧光定量PCR 和免疫印迹检测血管生成样蛋白-4 mRNA和蛋白的表达,酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测细胞上清和裂解液中血管紧张素Ⅱ的浓度,异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖漏出率和跨内皮电阻检测内皮细胞的通透性?预氯沙坦(10-5 mol/L)预处理内皮细胞后,观察Angptl-4和内皮细胞通透性的变化?【结果】 AGE上调内皮细胞血管生成样蛋白-4的mRNA和蛋白的表达(P<0.05),升高细胞上清及裂解液中血管紧张素Ⅱ的水平,增加内皮细胞的通透性 (P<0.05),氯沙坦预处理后能减轻AGE介导的这些改变(P<0.05)?【结论】 AGE可能通过激活内皮细胞内的肾素-血管紧张素系统,上调血管生成样蛋白-4表达的机制,增加内皮细胞的通透性? 相似文献
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目的 探讨高糖对大鼠肾小球内皮细胞肾素-血管紧张素系统(RAS)的影响及机制。 方法 5 mmol/L、30 mmol/L葡萄糖(加或不加卡托普利、糜蛋白酶抑制剂)分别作用于细胞12、24、48、72 h后,用ELISA法检测上清与细胞内的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平;实时荧光定量PCR法检测血管紧张素原、肾素mRNA的表达;Western印迹法检测细胞AngⅡ1型受体(AT1R)、AngⅡ2 型受体(AT2R)、血管紧张素原及肾素的表达;激光共聚焦间接免疫荧光法检测AT1R、AT2R、肾素在细胞内的分布及改变。 结果 与对照组相比,高糖刺激细胞12、72 h时,上清AngⅡ水平均升高(P < 0.05);而在细胞内AngⅡ水平只在72 h时有升高 (P < 0.05);在高糖刺激24、48 h时,细胞内外AngⅡ水平均未发生明显变化。加入卡托普利、糜蛋白酶抑制剂预处理,然后高糖刺激细胞72 h,上清和胞内AngⅡ水平较不加抑制剂时显著下降(P < 0.05)。高糖可使血管紧张素原mRNA表达上调、肾素 mRNA表达下调(均P < 0.05)。同时,高糖可使血管紧张素原蛋白表达上调、AT1R蛋白表达下调,而AT2R、肾素蛋白表达量无明显变化,但激光共聚焦间接免疫荧光观察到AT2R发生由细胞核到细胞质的转移。 结论 高糖可激活大鼠肾小球内皮细胞内的RAS,这种作用至少与血管紧张素转换酶(ACE)和非ACE途径有关。高糖可通过增加底物水平引起肾小球内皮细胞AngⅡ的改变,同时AngⅡ受体在高糖刺激下也发生相应的改变。 相似文献
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目的探讨中国慢性肾脏病(CKD)患者左心室肥厚(LVH)的发生率及影响因素。方法收集2010~2012年入住中山大学附属第三医院肾内科CKD 3~5期非透析患者270例,使用携带式动态血压计进行动态血压监测,并测量临床血压,彩超评价心脏结构和功能改变,收集尿蛋白及血生物化学等临床指标。结果 46.67%的患者合并LVH,其中男性为39.74%,女性为55.46%,女性患者LVH发生率较男性显著增多(P<0.05)。CKD 3、4、5期患者LVH发生率分别为25.0%、44.9%和53.6%,三组间差异有统计学意义(P<0.05)。与非LVH患者相比,LVH患者的体质指数(BMI)、甲状旁腺激素(iPTH)、血磷、血肌酐、左心室质量指数、脉压差、脉搏及临床收缩压明显升高,24 h动态收缩压及舒张压、白天及夜间收缩压和舒张压也明显升高(P<0.05);而估算肾小球滤过率、血红蛋白、血总钙、心脏射血分数则显著下降(P<0.05)。多元线性回归分析显示BMI、iPTH和夜间收缩压与左心室质量指数独立相关,多因素逻辑回归分析显示,女性、BMI、iPTH、白天及夜间收缩压是LVH的独立危险因素。结论 LVH是CKD患者常见的合并症,高iPTH及动态收缩压增高是其独立危险因素。 相似文献
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目的 评价肾小球滤过率(GFR)评估方程在老年慢性肾脏病(CKD)患者的适用性.方法 选择老年CKD患者103例,采用Cockcroft-Gauh(CG)方程、MDRD1方程、简化MDRD方程、Jelliffe1973(JE73)方程、Mawer(MA)方程、Hull(HU)方程、Jellife1971(JE71)方程、血肌酐倒数公式,Gate(GA)方程、Bjornsson(BJ)方程,分别预测GFR值,与""Tc DTPA肾动态显像检测的GFR(sGFR)进行比较. 结果 Bland-Ahman分析显示,CG方程、BJ方程和HU方程估计的GFR与sGFR的一致性较好,但所有各方程估计的GFR与sGFR的一致性限度均超过事先规定的专业界值.线性回归结果 显示,JE方程和CG方程估测的GFR与X轴的斜率较其他方程更接近0,MDRD1方程较其他方程有较小的偏差;在所有方程中,BJ方程、JE方程和CG方程GFR符合率较高.在CKD的不同分期中,BJ方程、CG方程和JE方程具有较小的偏差和更优的准确性. 结论 当血肌酐的测定方法 为酶法时,如果直接应用目前临床常用的GFR评估方程预测老年CKD患者的GFR,可能会产生明显的偏差.J方程和HU方程估计的GFR与sGFR的一致性较好,但所有各方程估计的GFR与sGFR的一致性限度均超过事先规定的专业界值.线性回归结果 显示,JE方程和CG方程估测的GFR与X轴的斜率较其他方程更接近0,MDRD1方程较其他方程有较小的偏差;在所有方程中,BJ方程、JE方程和CG方程GFR符合率较高.在CKD的不同分期中,BJ方程、CG方程和JE方程具有较小的偏差和更优的准确性. 结论 当血肌酐的测定方法 为酶法时,如果直接应用目前临床常用的GFR评估方程预测老年CKD患者的GFR,可能会产 相似文献
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目的:评价现有在中国人群基础上开发的肾小球滤过率(GFR)评估方程在慢性肾小球肾炎患者的适用性。方法:选择143例慢性肾小球肾炎患者,用中国方程、瑞金方程、MDRD1方程和简化MDRD方程,分别计算GFR值,与^99mTc—DTPA测的GFR(sGFR)进行比较。结果:Bland—Altman分析显示MDRD1方程和瑞金方程估计的GFR和sGFR的一致性较好,但所有各方程估计的GFR和出FR的一致性限度均超过事先规定的专业界值。线性回归结果显示,MDRD1方程和瑞金方程估测的GFR与X轴的斜率较其他方程更接近0。在所有方程中,MDRD1方程和中国9方程偏差较小,瑞金方程估测GFR30%符合率和50%符合率均最高,但瑞金方程估测GFR30%符合率依然低于70%。在慢性肾脏病不同分期中,瑞金方程和MDRD1方程较其他方程有较小的偏差和更优的准确性。结论:当血肌酐的测定方法为酶法时,如直接应用现有在中国人群基础上开发的肾小球滤过率评估方程评估慢性肾小球肾炎患者肾功能,可能会产生明显的偏差。 相似文献
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肾小球滤过率评估方程在糖尿病肾病患者的应用评价 总被引:1,自引:1,他引:0
目的评价Cockcroft—Gault(CG)方程及肾脏病膳食改良试验(MDRD)方程在糖尿病肾病患者的适用性。方法选择67例糖尿病肾病患者,用CG方程、MDRD1方程和简化MDRD方程,分别计算肾小球滤过率(GFR),与99mTc—DTPA测的GFR(sGFR)进行比较。结果Bland—Altman分析显示各方程估计的GFR和sGFR的一致性限度均超过事先规定的专业界值。线性回归结果显示CG方程估测的GFR与X轴的斜率较其它方程更接近0。从总体以及慢性肾脏病(CKD)的不同分期分析,CG方程较其它方程有较小的偏差和更优的准确性。结论对于糖尿病肾病患者肾功能的评估,CG方程优于MDRD1方程和简化MDRD方程。 相似文献
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肾小球滤过率评估方程评价慢性肾脏病肾滤过功能适用性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 评价目前临床常用的肾小球滤过率(GFR)评估方程在慢性肾脏病(CKD)中的适用性.方法 选择2005年1月至2007年12月中山大学附属第三医院327例CKD患者,用Cockcroft-Gault(CG)方程、MDRDI方程、简化MDRD方程、Jelliffe1973(JE73)方程、Mawer(MA)方程、Hull(HU)方程、Jellifee1971(JE71)方程、血肌酐倒数公式、Gate(GA)方程、Bjornsson(BJ)方程,分别预测GFR值,与99mTc DTPA测的GFR(sGFR)进行比较.结果 Bland-Altman分析显示CG方程、BJ方程和HU方程估计的GFR和sGFR的一致性较好,但所有方程估计的GFR和sGFR的一致性限度均超过事先规定的专业界值.线性回归结果显示,JE方程和CG方程估测的GFR与X轴的斜率较其他方程更接近0.MDRDI方程较其他方程有较小的偏差.在所有方程中,BJ方程、JE方程和CG方程GFR符合率较高.在CKD的不同分期中,BJ方程、CG方程和JE方程具有较小的偏差和更优的准确性.结论 当血肌酐的测定方法为酶法时,如果直接应用目前临床常用的GFR评估方程预测GFR,可能会产生明显的偏差. 相似文献