肝肾联合移植 22 例报告

目的 对临床肝肾联合移植(CLKT)进行总结. 方法 为22例肝功能衰竭合并尿毒症患者实施CLKT,每例受者所移植的肝脏和肾脏来自同一供者,采取原位灌注、多器官联合快速切取.10例行经典式原位肝移植术,12例行背驮式肝移植术,均未行静脉转流,肾移植采用常规术式,均为一期移植.术后采用抗胸腺细胞球蛋白或(和)抗CD25单克隆抗体诱导治疗,采用他克莫司、吗替麦考酚酯和泼尼松预防排斥反应. 结果 22例手术全部成功,移植肝和移植肾功能恢复良好.术后发生移植肝急性排斥反应1例,移植肾急性排斥反应2例,他克莫司中毒1例,上消化道出血1例,腹腔继发性出血1例.胸腔积液6例,肺部感染2例,腹腔感染1例.本组随访6个月至7年11个月,死亡3例,其中2例患者分别在术后第7个月和第10个月死于肺部巨细胞病毒感染,1例患者在术后第9个月死于急性心肌梗死.受者术后1、3、5年存活率分别为86.4%、81.3%和72.7%. 结论 CLKT是治疗终末期肝病合并肾功能衰竭的有效方法.     

肾移植受者术后早期他克莫司用药剂量及浓度个体差异的研究

目的 探讨肾移植受者术后早期他克莫司(FK506)剂量及浓度个体差异的原因.方法 肾移植术后早期采用FK506、霉酚酸酯及激素三联免疫抑制剂的受者118例,记录性别、年龄、身高,术后第3、7、14、30天分别记录体质量、FK506剂量,激素剂量、腹泻、血脂、肝功、肾功、白蛋白、血细胞比容等指标,测定每例患者细胞色素酶P450-3A5(CYP3A5)和多药耐药基因1(MDRl)3435、2677、1236位点基因多态性及不同时期FK506全血谷浓度,以FK506浓度/(剂量X体表面积)为因变量分别进行多元线性回归分析.结果 多元线性回归模型的拟合度偏低,修正R2值在术后第3、7、14、30天分别为0.284、0.267、0.417、0.324.药物基因组学因素有MDR1 2677、MDRl 1236、MDR1 3435且变化剧烈,不同个体达到相同FK506浓度所需剂量突变型纯合子＜杂合子＜野生型纯合子.非药物基因组学因素在术后第3天为年龄、白蛋白和高密度脂蛋白胆固醇,第7天为白蛋白、年龄和血清肌酐,第14天为激素剂量和天冬氨酸转氨酶,上述影响因素均与FK506浓度/(剂量×体表面积)呈正相关.结论 肾移植术后早期受者FK506剂量及浓度个体差异的原因主要是术后用药和受者剧烈的内环境变化,并与受者MDR1基因多态性、年龄、白蛋白、移植肾功能恢复情况、血脂和肝功能有关,术前应充分透析,尽可能改善患者一般情况,术后应当尽量避免使用对FK506吸收和代谢干扰大的药物.     

肾移植术后应用新型免疫抑制剂受者肺部感染的临床研究

目的 探讨肾移植术后应用新型免疫抑制剂受者肺部感染的发病率、发病原因及治疗效果.方法 对我院752例肾移植术后受者的临床资料进行回顾性分析.752例病人中分为3组,应用环孢素A、骁悉、强的松治疗226例为环孢素A组,应用FK506、骁悉、强的松治疗386例为FK506组,应用FK506、雷帕霉素(Rap)、强的松治疗140例为雷帕霉素组;观察3组肺部感染发病率、死亡率的差异,分析肺部感染的原因、诊断和治疗.结果 752例病人中发生肺部感染53例,治愈50例,死亡3例.环孢素A组肺部感染发病率为7.08/226),死亡1例;FK506组发病率为7.25%(28/386),死亡2例;Rap组发病率为6.43%(9/140),无死亡病例.53例病人中混合感染者17例,单纯细菌感染24例,巨细胞病毒感染9例,真菌感染1例,病原菌不明2例;检出的细菌中G(革兰氏阴性)细菌占68.35%.结论 G菌是肾移植术后肺部感染的常见病原菌,术后前6个月是肺部感染的高危时段.环孢素A组、FK506组、雷帕霉索组肺部感染的发生率差异无显著性.肾移植术后重视围手术期呼吸道管理、避免排斥反应发生和生物制剂的应用.是预防肺部感染的主要手段;早发现、早治疗,是减少重症肺炎死亡率提高人肾存活率的关键.＃     

腹部多器官联合移植的围手术期处理

目的 总结腹部多器官联合移植的围手术期处理经验。方法 我院自2001年10月至2005年1月共施行19例腹部多器官联合移植术,其中胰肾联合移植6例、肝肾联合移植12例、肝胰联合移植1例;分析手术方法、免疫抑制剂的使用和术后并发症处理的方法。结果 19例患者手术均获成功,术后发生FK506中毒1例(5.3%),发生急性排斥反应3例(15.8%),消化道出血发生2例(10.5%),腹腔出血1例(5.3%),肺部感染1例(5.3%),经相应治疗后好转。结论 腹部多器官联合移植成功的关键是作好供体选择、保证供器官质量、选择适当手术方式、术后合理应用免疫抑制剂以及有效防治术后并发症。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A对小鼠T细胞的影响

以环磷酰胺（CTX）作为阳性对照组,生理盐水作为阴性对照,采用不同浓度曲古抑菌素A（TSA）作用于小鼠,以荧光标记的单克隆抗体分别作用于小鼠外周血及脾脏中T淋巴细胞,流式细胞仪观察T细胞数量及CD4^＋和CD4^＋亚群的变化情况。结果TSA可以显著减少外周血及脾脏中T淋巴细胞数量,且与浓度相关,同时TSA还引起T细胞亚群CD4^＋和CD4^＋T细胞数量减少,同时也减少了CD4^＋／CD4^＋比值。本实验为应用TSA抑制T细胞的免疫应答和诱导免疫耐受提供了依据。     

末端岩藻糖基化抑制剂对环孢素诱导的肾脏上皮-间充质转化的影响及其机制

目的  探讨末端岩藻糖基化抑制剂2-脱氧-D-半乳糖（2-D-gal）对环孢素（CsA）诱导的肾脏上皮-间充质转化（EMT）的影响及其机制。方法  将15只8~10周的雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组（Ctrl组）、CsA组和CsA+2-D-gal组,每组各5只。通过蛋白质印迹法检测Ctrl组和CsA组小鼠肾脏组织岩藻糖基转移酶1（FUT1）和EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,免疫荧光法检测Ctrl组和CsA组小鼠肾脏组织末端岩藻糖的表达,Masson染色检测各组小鼠肾脏组织纤维化情况,并检测各组小鼠血尿素氮和血清肌酐水平。体外建立CsA诱导肾小管上皮HK2细胞EMT模型,分别用0、2.5、5.0和10.0 μmol/L的CsA刺激HK2细胞24 h,另将HK2细胞分为Ctrl组、2-D-gal组、CsA组和CsA+2-D-gal组,观察不同浓度CsA刺激后及各组HK2细胞形态,通过蛋白质印迹法检测不同浓度CsA刺激后及各组HK2细胞FUT1、E-cadherin、Vimentin和α-SMA的表达,免疫荧光法检测Ctrl组和CsA组HK2细胞末端岩藻糖的表达。结果  与Ctrl组比较,CsA组小鼠肾脏组织E-cadherin的蛋白相对表达量下降,FUT1、Vimentin和α-SMA蛋白相对表达量均升高（均为P < 0.05）,小鼠肾脏组织末端岩藻糖表达增多。与Ctrl组比较,CsA组和CsA+2-D-gal组小鼠的血尿素氮和血清肌酐水平均升高,与CsA组比较,CsA+2-D-gal组小鼠的血尿素氮和血清肌酐水平均降低（均为P < 0.05）。与Ctrl组比较,CsA组和CsA+2-D-gal组小鼠肾脏组织胶原纤维沉积均增多,α-SMA蛋白相对表达量均升高;与CsA组比较,CsA+2-D-gal组小鼠肾脏组织胶原纤维沉积减少,α-SMA蛋白相对表达量下降（均为P < 0.05）。随着CsA的浓度增加,HK2细胞的形态由正常的鹅卵石样逐渐变长变细,HK2细胞FUT1、Vimentin和α-SMA蛋白相对表达量升高,E-cadherin蛋白相对表达量下降,呈浓度依赖性。与Ctrl组比较,CsA组HK2细胞末端岩藻糖表达增多。CsA处理的基础上联合2-D-gal干预后,CsA+2-D-gal组的HK2细胞形态恢复到与正常HK2细胞形态相似。与CsA组比较,CsA+2-D-gal组的HK2细胞E-cadherin蛋白相对表达量升高,Vimentin和α-SMA蛋白相对表达量均下降（均为P < 0.05）。结论  CsA在体内和体外均可诱导EMT发生,并且伴有末端岩藻糖基化水平增加。2-D-gal可以通过抑制末端岩藻糖基化来抑制CsA诱导的EMT。     

肾移植患者自测健康评价

目的:评估肾移植患者健康状况,并与血液透析患者和健康者进行比较,同时对接受两种免疫抑制剂治疗的肾移植患者的健康状况进行比较。方法:①选择2005-06/12南方医科大学南方医院肾移植科门诊就诊的肾移植患者300例。皆因终末期肾脏疾病进行肾移植,且移植后肾功能稳定。纳入同期本院透析中心接受血液透析的患者100例。皆因终末期肾脏疾病,进行透析治疗,且稳定透析半年以上。纳入同期南方医科大学进行健康体检的教职员工100名。上述纳入对象均自愿接受量表评估。②采用自测健康评定量表评估纳入对象健康状况。该量表包括个体健康的生理、心理和社会3个子量表,3个评定子量表分和自测健康评定量表修订版总分的理论最高值分别为170,150,120,440分;理论最小值均为0。分数越高,表明自测健康状况越好。③采用单因素方差分析比较多组间计量资料差异,进一步两两比较采用q检验;两组间比较采用t检验。结果:分别发给肾移植患者、血液透析患者、健康者300和100及100份,收回填写完完整、准确的量表分别为228,61,89份,其中接受环孢素和他克莫司治疗的肾移植患者分别为141和87例。①肾移植患者、血液透析患者和健康人间自测健康评定量表评分比较:健康人自测健康评定量表总分最高(343.74±45.60)分,其次是肾移植患者(323.26±51.95)分,得分最低的为血液透析患者(264.00±61.18)分。肾移植患者生理、心理和社会健康3个方面、9个维度及量表总分明显高于血液透析患者(P<0.05￣0.01)。肾移植患者自测健康评定量表中日常生活功能、心理症状与负向情绪、角色活动和社会资源与社会接触得分接近于健康人,身体症状与器官功能、身体活动功能、正向情绪、认知功能、社会支持上得分明显低于健康人(P<0.05￣0.01)。②环孢素、他克莫司治疗的肾移植患者自测健康评定量表评分比较:他克莫司治疗的肾移植患者自测健康评定量表中心理健康子量表的正向情绪、认知功能维度和社会健康子量表的社会支持维度得分明显高于环孢素治疗者(t=2.024￣2.899,P<0.05￣0.01),在生理健康子量表的3个维度上差异不明显(P>0.05)。结论:①肾移植患者的总体健康状况明显优于血液透析患者,但生理健康、心理健康较健康人差。②环孢素和他克莫司对肾移植患者生理健康的影响无明显差异,但服用他克莫司肾移植患者心理健康和社会健康状况更好些。     

胸腹部多器官联合切取技术方法探讨

目的　探讨胸腹部多器官联合切取的技术方法及其对获取的器官质量的影响。 方法 采取胸部U型切口联合腹部大“十”切口,分别建立胸部器官和腹部器官原位灌注,在灌注的同时进行多器官游离和切取。 结果　2003年至今采用此方法行胸、腹腔多器官联合切取术8次,获得供心、肝、胰各8个,供肺8对及供肾16个。热缺血时间为(2±1.2)min,器官切取时间约(20±3)min。未出现任何影响器官质量和功能的手术意外损伤。临床行心脏移植6例、心肺联合移植2例、双肺移植3例、单肺移植5例、肝移植6例、肝肾联合移植2例、胰肾联合移植3例、肾移植11例,所有移植器官均在术后立即发挥功能。 结论　采用胸腹部多器官联合切取的技术方法能够快速优质的获取胸部和腹部供器官,缩短热缺血时间,减少手术损伤,提高供器官的质量和数量。     

曲古抑菌素A抑制小鼠CD4+T细胞活化的机制

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对小鼠脾脏CD4+T细胞相关分子的基因转录和表达以及对活化信号转导途径的影响,探讨TSA影响CD4+T细胞活化的作用机制。方法采用2、20、200 nmol/L倍比浓度TSA作用于C57BL小鼠脾脏中分离出的CD4+T细胞24 h,观察对CD3,CD28以及IL-2基因转录和表达的影响;观察TSA对采用抗CD3,CD28单抗激活CD4+T细胞表达蛋白酶ZAP70和PI3K的影响。结果 TSA能抑制CD4+T细胞CD28基因转录和分子表达,且与作用浓度相关;能抑制抗体激活的小鼠CD4+T细胞表达PI3K蛋白,而对CD3分子活化信号下游的ZAP70蛋白的表达无明显影响;TSA还能抑制CD4+T细胞IL-2的基因转录和显著减少激活的CD4+T细胞表达IL-2(P<0.01)。结论 TSA通过抑制CD28基因转录和分子表达,影响激活CD4+T细胞活化过程中共刺激信号向细胞内的传导,减少IL-2的分泌,从而降低CD4+T细胞的免疫活性。     

肾移植受者、慢性肾脏病患者和健康对照者肠道菌群的对比

目的研究表明肠道菌群与移植受体的免疫调节相关,但目前对肾移植受者肠道菌群的组成及功能的研究却很少。方法 我们通过对粪便标本的16S rRNA V3可变区进行深度测序,分析16例肾移植受者（TR）肠道菌群的组成和功能,并与84例慢性 肾脏病（CKD）患者和53例健康对照人群肠道菌群进行比较,以进一步了解肠道菌群的特点。结果TR与CKD肠道菌群结构 相似,菟丝子科、漆树科、芸香科和粪杆菌的丰度显著降低。与对照组相比,TR、CKD中类杆菌、蛋白杆菌、梭形杆菌和肠杆菌科 的丰度均有所增加。功能比较显示TR和CKD患者糖代谢显著增加,辅因子、维生素、细胞活力和遗传信息处理显著降低。TR 和CKD相比也有轻微差异。TR中蛋白细菌和肠杆菌科的丰度,以及涉及转运系统成员和碳水化合物代谢的途径都显著高于 TR。我们发现拉氏囊藻科和微囊藻科的几个有益菌属与临床标志物（血清肌酐和血尿素氮）呈负相关。结论本研究对TR中 肠道菌群的组成及功能进行了分析,提示TR中肠道菌群的改变与患者临床表现密切相关。对肾移植与肠道菌群之间的相关性 进行更前瞻性的研究将有助于预测移植术后的临床反应。