FISH检测乳腺癌组织HER-2原癌基因50例分析

目的:探讨荧光免疫原位杂交法(FISH)检查乳腺癌HER-2基因扩增在临床中的应用价值。方法:选取50例乳腺癌手术患者,免疫组化染色方法检查乳腺癌组织中HER-2蛋白表达,FISH检查HER-2基因扩增情况,比较二者之间差异。结果:50例乳腺癌中免疫组化方法检测HER-2蛋白表达,者7例,者21例,+者17例;FISH检查50例中有8例出现HER-2基因扩增,42例无扩增。两种检测方法检测阳性结果有显著性差异(P<0.01)。结论:免疫组化检测可做为HER-2表达状态的初筛,对于初筛阳性患者有必要进行FISH检测,有助于指导临床应用赫赛汀(Herceptin)的治疗及对患者预后的判断。     

抗人L-PGDS人-鼠嵌合轻链的真核表达

目的:在Sp2/0细胞中表达抗人L-PGDS人-鼠嵌合轻链.方法:采用RT-PCR技术从稳定分泌抗人L-PGDS单克隆抗体(mAb)的小鼠杂交瘤细胞中扩增抗体轻链可变区基因VL, 并构建到人-鼠嵌合轻链表达载体pAG4622.重组质粒pAG4622/VL经DOTAP试剂转染入Sp2/0细胞, 酶酚酸筛选后用ELISA和RT-PCR检测表达产物.结果:在筛选后的转染细胞上清中检测到抗人L-PGDS人-鼠嵌合轻链蛋白, 且其细胞中存在相应嵌合轻链mRNA.结论:嵌合轻链的稳定表达, 为后续抗人L-PGDS人-鼠嵌合抗体的获得奠定基础.     

小肠部分切除大鼠术后一氧化氮代谢途径干预对葡萄糖代谢的影响

目的：观察小肠部分切除大鼠术后一氧化氮代谢途径干预对大鼠术后葡萄糖代谢的影响，寻找解决术后胰岛素抵抗的方法。方法：实验于2005—01／2006—08在解放军第四军医大学第二附属医院中心实验室完成。实验分组：96只大鼠随机数字表法分为4组，正常对照组，L-硝基-精氨酸甲酯处理组，L-精氨酸处理组，L-精氨酸＋L-硝基-精氨酸甲酯处理组，每组24只。实验干预：建立大鼠小肠部分切除模型，各干预组分别尾静脉注射1mg／kg L-硝基-精氨酸甲酯、100mg／kg L-精氨酸处理、0．5mg／kg L-硝基-精氨酸甲酯＋50mg／kg L-精氨酸处理进行一氧化氮代谢途径干预。正常对照组只注射1mL生理盐水。实验评估：①给药后2，8，12，24，48h取血，测定血清中一氧化氮含量及血糖检测。②给药后24h，48h，1周后采用胰岛素敏感性实验计算每公斤代谢体质量每分钟代谢葡萄糖的量。结果：96只大鼠均进入结果分析。①血清一氧化氮含量：L-硝基-精氨酸甲酯处理组各时间点血清一氧化氮含量低于正常对照组（P〈0、05），而L-精氨酸处理组各时间点血清一氧化氮含量高于正常对照组（P〈0．05）；L-精氨酸＋L-硝基-精氨酸甲酯处理组与正常对照组比较差异无显著性（P〉0．1）。②空腹血糖：给药后8，12，24，48h L-硝基-精氨酸甲酯处理组高于正常对照组（P〈0．05）。给药后8，12，24，48h L-精氨酸处理组低于正常对照组（P〈0．05）；L-精氨酸＋L-硝基-精氨酸甲酯处理组与正常对照组比较差异无显著性（P〉0．1）。③稳态情况下每千克代谢体质量每分钟代谢葡萄糖的量：L-硝基-精氨酸甲酯处理组显著低于正常对照组（P〈0．05），而L-精氨酸处理组则显著高于正常对照组（P〈0．05）；L-精氨酸＋L-硝基-精氨酸甲酯处理组与正常对照组比较差异无显著性（P〉0．1）。结论：小肠部分切除大鼠术后一氧化氮代谢途径在葡萄糖转运和胰岛素活性方面可能起着重要作用，提示其可能是解决术后胰岛素抵抗的一种方法。     

NO代谢途径干预对肥胖大鼠术后胰岛素敏感性的影响

目的 探讨一氧化氮（NO）代谢途径干预对肥胖大鼠术后胰岛素敏感性的影响。方法 对2005年5月时2006年1月建立的肥胖大鼠小肠切除模型资料进行分析，随机分为正常对照组、L-硝基-精氨酸甲酯（L-NAME）处理组、L-精氨酸（L-Arg）处理组、L-Arg＋L-NAME处理组，术后给予NO代谢途径干预，通过血清NO质量浓度和血糖检测以及胰岛素敏感性实验，对肥胖大鼠术后NO代谢途径与胰岛素敏感性的相关性进行分析。结果 L-硝基-精氨酸甲酯处理组与对照组相比血糖较高，血清NO质量浓度及胰岛素敏感性降低（P〈0.05），L-精氨酸处理组则相反，L-Arg＋L-NAME处理组和正常对照组相比各项指标差异无显著性。结论 NO代谢途径与肥胖大鼠术后胰岛素敏感性有着显著的相关性，NO代谢途径干预改变了肥胖大鼠术后的胰岛素敏感性。     

急性腹腔感染与胰岛素抵抗关系及炎症因子作用时间“窗”

目的 探讨急性腹腔感染大鼠早期葡萄糖代谢与炎症因子水平的关系.方法 SD大鼠随机分为4组:A组,盲肠结扎穿孔(CLP)组;B组,腹腔脂多糖(LPS)注射组;C组,CLP加LPS注射组;D组,对照组.A,B,C组均为急性腹腔感染模型.检测各组血浆中不同时间点葡萄糖、胰岛素、肿瘤坏死因子a(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的水平.HOMA法计算胰岛素抵抗指数(IRI),以此评价胰岛素抵抗(IR)程度.结果 大鼠急性腹腔感染组(A、B、C组)早期血浆中葡萄糖水平及IRI升高,6 h达峰值.IPd变化与TNF-α,IL-6水平的对数值之间呈正相关(r=0.609和0.755).接受LPS注射者(B、C组)IL-6升高较未接受LPS注射组(A组)升高明显.IL-6较TNF-α维持时间延长.结论 急性腹腔感染早期可出现IR;TNF-α和IL-6与IR的程度呈正相关,不同感染模型的炎症因子水平变化存在差异,其作用时间"窗"不同.     

三角吻合在完全腹腔镜远端胃癌根治术中的应用研究

目的 对比分析远端胃癌根治术中全腹腔镜下三角吻合与腹腔镜辅助Brillroth Ⅰ式吻合的近期疗效,探讨三角吻合技术的应用价值.方法 回顾性分析2013年3月至2014年2月开展的50例全腹腔镜下远端胃癌根治术加三角吻合的临床资料（三角吻合组）,并以同期开展的43例腹腔镜辅助远端胃癌根治术加Brillroth Ⅰ吻合作为对照（BⅠ吻合组）,比较两组患者的手术相关指标和术后并发症发生情况.结果 两组手术时间、术中出血量、淋巴结清除数、术后肛门排气时间、并发症发生率和术后住院天数比较,差异均无统计学意义（均P＞0.05）;三角吻合组切口长度[（3.4±0.4）cm]和术后第1天疼痛评分[（3.1±1.0）]小于BⅠ吻合组[（6.9±0.8）cm和（4.6±1.4）],差异均有统计学意义（均P＜0.05）.结论 全腹腔镜下远端胃癌根治术三角吻合技术安全可行,在切口美观和舒适度方面较腹腔镜辅助下Brillroth Ⅰ式吻合更有优势。     

腹腔镜辅助经肛外翻式直肠癌切除术5例分析

目的 探讨中、低位直肠癌保留肛门括约肌功能的理想术式.方法 对早、中期低位直肠癌5例,采用腹腔镜辅助经肛外翻式直肠癌切除术资料分析.结果 全组腹腔镜手术均顺利,无手术死亡,无中转开腹.肿瘤远端切缘均为阴性.平均随访6.8个月,无局部复发,无肝脏转移,均无瘤生存.术后1例发生吻合口狭窄.术后平均住院时间11(9～14)d.结论 在严格掌握手术适应证的条件下,腹腔镜辅助经肛外翻式直肠癌切除术是治疗早、中期低位直肠癌的一种经济、可靠的手术方式,其远期疗效尚有待于进一步观察.     

新型分离式磁控钳辅助单孔腹腔镜胆囊切除术的临床应用

目的探讨新型分离式磁控钳在经脐单孔腹腔镜胆囊切除术中的应用价值。方法本研究为前瞻性病例系列研究。前瞻性收集2023年3—8月空军军医大学第二附属医院普通外科连续收治的接受单孔腹腔镜胆囊切除术治疗的符合纳入和排除标准的患者资料。所有患者术中接受新型分离式磁控钳辅助经脐腹腔镜胆囊切除。记录手术时间、术中出血量、术中是否需要辅助切口和住院时间等指标。记录患者术后疼痛评分及并发症发生情况等。采用5分李克特量表记录术者及助手的配合体验, 评价该术式的可推广度。所有患者均签署知情同意书, 符合医学伦理规定。患者出院后通过门诊或电话随访, 术后7 d、1个月各随访 1 次, 复查切口愈合和瘢痕形成情况并完成满意度调查问卷。随访截至2023年9月30日。结果共有45例患者纳入研究, 男性19例, 女性26例, 年龄(42.7±21.2)岁(范围:32～61岁)。38例(84.4%)的手术难度术中被评估为1级或2级, 7例(15.6%)被评估为3级。手术操作时间(37.3±15.3)min(范围:25～80 min), 术中出血量[M(IQR)]17.8(35.0)ml(范围:10～60 ml)。所有手...     

人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库的建立

目的 建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库,经过扩增和筛选,得到目的抗体。方法自肝癌患者外周血单个核细胞中扩增全套人抗体Fd片段基因,分别克隆入含嵌合轻链的展示载体pComb3和pComb3X中,建立人鼠杂合．Fab噬菌体抗体库。然后利用肝癌抗原HAb18GE进行筛选,并对抗体库的扩增和筛选条件进行优化。结果pComb3展示抗体库在37℃进行扩增挽救时存在明显的目的片段重组丢失现象。pComb3X展示抗体库在不同的扩增条件下均未发现明显的重组丢失现象。经过4轮筛选后,噬菌体展示抗体ELISA显示,鉴定克隆与原核表达GST及无关蛋白存在明显交叉反应,而改用诱导表达细菌裂解上清进行ELISA鉴定可以抑制交叉反应的发生。结论通过建立杂合Fab抗体库,并对扩增和筛选条件进行优化,作者获得了目的抗体。     

婴儿肝内胆管囊腺瘤1例并文献复习

肝内胆管囊腺瘤(Intrahepatic biliary cystadenoma)是来源于肝内胆管上皮细胞的罕见肝脏肿瘤,由Hueter于1887年最先报道,5年后Keen提出了手术切除肝内胆管囊腺瘤的报道,之后Edmondson首次描述了肝内胆管囊腺瘤的病理组织学特点[1,2]。既往研究提示肝内胆管囊腺瘤好发于肝左叶,男女发病比例约1∶4,占所有肝脏囊性病变病例总数5%以下[3]。此病在儿童中极其罕见,复习国内外文献,迄今为止已被报道的儿童病例仅13例[4-16]。天津市儿童医院收治的1例婴儿肝内胆管囊腺瘤是目前已有报道中年龄最小的患儿,笔者通过复习有关文献,旨在综合分析小儿肝内胆管囊腺瘤临床特点,提高小儿外科医生对该病的认识。