前列腺素E_2对重症胰腺炎大鼠血清肿瘤坏死因子及白介素-6的调控作用

目的 :探讨前列腺素E2 (PGE2 )对大鼠重症胰腺炎 (SAP)血清白介素 6 (IL 6 )、肿瘤坏死因子(TNF a)的含量及存活率的影响。方法 :SD大鼠 2 9只随机分三组 ,PGE2 组 (N =9) ,SAP组 (N =11)和生理盐水组 (NS ,N =9)。大鼠的SAP模型用 5 %牛磺去氧胆酸钠诱导成功后 30分钟经门静脉注入PGE2 ,采用ELISA检测血清IL 6与TNF a含量 ,动态观察同组不同时间、不同组同时间的IL 6与TNF a变化。并与未经PGE2保护 (SAP组 )及注入生理盐水 (NS组 )相比较。结果 :30分钟时 ,PGE2 组与SAP组的IL 6、TNF a值相比较差异无显著性 (P =2 .79,P =0 .90 7) ,而与NS组比较有显著差异 (P≤ 0 .0 0 1,P =0 .0 14,P <0 .0 0 0 1)。 0 .5～ 2h时 ,PGE2 组的IL 6与TNF a值明显下降 ,而SAP组上述二值却持续上升 (P <0 .0 0 0 1)。 2h～ 6h时 ,PGE2 组上述二值快速下降 ,但SAP组此二值下降缓慢 (P <0 .0 0 0 1) ,差异显著。PGE2 组在同组不同时间的IL 6和TNF a值比较 ,0 .5～ 2h与 2～ 6h时段均呈明显下降态势 (P <0 .0 0 0 1) ,差异有显著性。存活率比较 :0～ 12h时PGE2 保护组 9只 (占 10 0 % )全部存活 ,SAP组死亡 4只 (4 / 11,占 36 .4% )。 0～ 2 4h时 ,SAP组全部死亡 (11/ 11,占 10 0 % ) ,PGE2 组存活 4只 (4 / 9,占 44 .5 % )     

影响电转化效率的几个因素探讨

目的：探讨大规模DNA测序技术平台中影响电转化效率的几个因素。方法：电转化法测定经稀释或乙醇沉淀处理后连接反应混合物的转化效率。结果：电转化电压在2．1—2．5kV之间可获得高转化效率；乙醇沉淀法虽能降低盐浓度，但同时使微量质粒DNA丢失，不能提高电转化效率；稀释法能提高转化效率5倍左右；连接反应物转化时，感受态细胞悬浮于无菌去离子水中的转化效率比悬浮于10％甘油无菌去离子水中的高。结论：降低连接反应混合物的盐浓度能有效提高电转化效率，在大规模DNA测序技术平台中，急需研究开发一种纯化回收微量质粒DNA的简单而有效的方法。     

温州地区汉族群体D7S2846基因座的遗传多态性研究

目的 :研究STR位点D7S2 846在温州地区的遗传多态性 ,获得相应的群体遗传学数据。方法 :在温州地区随机抽取 194名无血缘关系汉族个体的静脉血 ,EDTA抗凝 ,用chelex10 0法提取DNA。应用PCR技术和聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分型。结果 :温州地区汉族群体D7S2 846基因座发现 6个等位基因及 15种基因型 ,其基因型分布符合HardyWeinberg平衡 (P >0 .0 5)。其杂合度 (H)、个人识别能力 (Dp)、非父排除率(PE)和多态性信息含量 (PIC)分别为 0 .644、0 .854、0 .3 4 7和 0 .63 0。结论 :D7S2 846在法医学应用和群体遗传学研究中有较高的价值     

一株多重耐药肺炎克雷伯菌KF3的质粒研究

目的 通过对肺炎克雷伯菌KF3质粒DNA全序列测定,从基因组水平研究质粒DNA的结构、功能基因和与宿主菌耐药相关性.方法 碱裂解法提取质粒DNA,构建质粒DNA文库并测序.采用Phred/Phrap/Consed软件包进行序列拼接,Glimmer软件预测开放阅读框架(ORF)及功能分析.结果 构建包含3个质粒DNA的pUC18文库和Fosmid文库,测序获得3个质粒全序列.功能注释分析发现3个质粒均为可接合转移质粒,编码大量耐药相关基因.结论 肺炎克雷伯菌KF3的3个质粒都是可接合转移质粒,将耐药基因在细菌间进行水平转移,造成了耐药菌的播散.     

志贺菌的质粒谱及耐药性分析

目的 分析志贺菌质粒谱,耐药性及流行菌株在遗传学上的同源关系。方法 用改良Ｋａｄｏ－Ｌｉｕ法提取细菌质粒,琼脂糖凝胶电泳检测质粒,用平板稀释法测定药物最低抑菌浓度（ＭＩＣ）,用试管内肉汤接合法和平板表面接合法进行接合转移试验。结果 １３０株志贺菌都含有５条小质粒带,１２８株含有１条分子量约为１２０×１０＾６的大质粒带,１８株有１或２条分子量介于３４－８０×１０＾６之间的质粒带;１５种抗生素的ＭＩＣ     

2462例婴幼儿急性腹泻轮状病毒感染情况调查

目的：研究5岁以下急性腹泻患儿人类轮状病毒（HRV）的感染情况。方法：酶联免疫吸附试验（ELISA）检测轮状病毒抗原，聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检测HRV核酸型别。结果：HRV的检出率在10－12月份最高（约55％），1－6月份次之（约为35％），7－9月份最低（约为8％）。HRV的感染率以6个月至2岁组最高（占46．0％），＜6月份次之（占27．0％），2－5岁组最低（占8．6％）。1996年10月至1997年1月，本地区流行的HRV电泳型以长型为主，占63．0％（46／73），未见混合型。结论：HRV是本地区10－12月间6个月至2岁婴幼儿急性腹泻的主要病原。     

配对t检验误区与率转化配对t检验方法介绍及各自应用范围

目的明确配对t检验误区与率转化配对t检验方法及各自应用范围,以使医学实践与实验研究的结果判断更为科学、准确。方法对医学实践与实验研究中遇到的具体事件,用配对t检验与率转化配对t检验进行比较。结果与治疗、稀释、保存有关的事件常规配对t检验结果无显著性差异,而采用率转化配对t检验结果有显著性或非常显著性差异;成定值改变的事件用率转化配对t检验无显著性差异,而用常规配对t检验结果有显著性差异。结论与治疗、稀释、保存有关的事件且原个体差别悬殊,应采用率转化配对t检验;而成定值的事件应采用原配对t检验。     

5年间鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶特性与耐药相关性研究

目的 研究2002-2006年每年3-5月临床分离鲍曼不动杆菌中碳青霉烯酶的分布与变迁情况及其与碳青霉烯类抗生素耐药的相关性.方法 琼脂稀释法检测亚胺培南(IPM)和美罗培南(MEN)对174株鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC);2-巯基丙酸(2-MPA)和乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验进行金属β-内酰胺酶表型检测;PCR扩增金属β-内酰胺酶(MBL)VIM、IMP和苯唑西林酶OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58相关基因.结果 2002-2006年每年3-5月临床分离的鲍曼不动杆菌对IPM的耐药率分别为0(0/20)、26%(1/38)、0(0/36)、34.9%(15/43)和59.5%(22/37),对MEN的耐药率分别为0(0/20)、5.3%(2/38)、0(0/36)、20.9%(9/43)和51.4%(19/37);15.5%(27/174)的菌株OXA-23阳性,72.4%(126/174)的菌株OXA-5I阳性,其中15.5%(27/174)菌株同时产OXA-51和OXA-23酶,OXA-23的阳性率从2002年的0上升到2006年的48.6%,OXA-51的阳性率从2002年的35.0%上升到2006年的89.2%;所有菌株均未检出OXA-24、OXA-58、IMP及VIM基因.结论 5年间鲍曼不动杆菌中OXA-23、OXA-5I的检出率及其对碳青霉烯类抗生素的耐药性均呈上升趋势;产OXA-23型B-内酰胺酶是本组鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素产生耐药的重要原因,OXA61可能与鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的低水平耐药有关.     

海藻希瓦菌中发现一种新的qnrA7基因亚型

目的 研究海藻希瓦菌中质粒介导的喹诺酮类耐药基因的分布和特性.方法 PCR检测qnr、qepA、aac(6')Ib-cr基因,阳性产物进行DNA测序以确定其基因型,接合转移试验探讨质粒介导的喹诺酮类耐药基因的体外转移性,E-test法测定菌株MIC,提取质粒对qnrA基因进行初步定位.结果 海藻希瓦菌中检出qnrA基因,为新发现的亚型,命名为qnrA7,GenBank登录号为GQ463707,未检出qnrB、qnrS、qnrC、qnrD、qepA、aac(6')-Ib-cr基因;qnrA7位于约33 kb的质粒上,但体外接合转移试验未成功;该菌对喹诺酮类药物敏感.结论 海藻希瓦菌质粒上检出新的qnrA基因亚型,其作为qnr基因的环境宿主值得关注.     

SARS冠状病毒Orf3和Orf4的克隆和分析

目的:克隆SARS冠状病毒的Orf3和Orf4两个开放性读框,并对其进行DNA序列和蛋白质结构分析.方法:通过RT-PCR,从SARS冠状病毒基因组中扩增得到特异性片段,利用TA克隆将PCR产物克隆入PUCm-T载体并进行测序、同源性比较和蛋白质结构分析.结果:RT-PCR扩增出的特异产物与预期长度相符,序列分析表明,其核苷酸序列与已发表的SARS病毒的Orf3和Orf4同源性在99%以上.结论:成功克隆SARS冠状病毒Orf3和Orf4两个开放性读框,为表达及功能研究奠定了基础.