血管平滑肌细胞钙库Ca2+动员的变化在休克血管低反应性形成中的作用

目的:探讨大鼠腹主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)在缺氧培养时胞内钙库钙释放的变化情况,并探讨胞内钙库钙释放在休克血管对去甲肾上腺素(NE)低反应性中的可能作用,为进一步阐明休克血管低反应性的发生机制提供依据。方法:建立大鼠失血性休克(40mmHg,2h)的在体模型及大鼠VSMCs缺氧细胞模型;采用Fura-3/AM钙离子成像方法测定VSMCs胞浆钙离子浓度()的变化情况及其与IP3受体(IP3R)及雷诺定受体(RyR)介导的钙释放通道的关系;采用离体器官张力测定技术,检测不同内钙释放依赖信号通路在休克血管低反应性形成中的可能作用。结果:在细胞外液无Ca2+的前提下,NE可通过动员内钙释放引起VSMCs胞浆的明显升高;缺氧培养后VSMCs胞浆较正常对照组有所升高,由NE诱导的VSMCs胞浆较对照组有所降低,但均无显著差别;但在缺氧培养的VSMCs,细胞内钙库钙释放功能明显改变,表现为与正常对照组比较,缺氧VSMCs由IP3R敏感钙释放通道开放剂adenophostinA(10-5mol/L)及ATP-Na2(10-4mol/L)诱导的VSMCs胞浆升高不显著,但RyR敏感钙释放通道开放剂caffeine可诱导缺氧VSMCs胞浆的明显升高;失血性休克(40mmHg,2h)可引起大鼠腹主动脉血管对由NE诱导的收缩反应性明显降低,IP3R激动剂ATP-Na2(10-4mol/L)并不明显提高休克血管对NE的收缩反应性,但IP3R阻断剂heparin(104U/L)可明显抑制休克血管对NE的收缩反应性;此外,在无钙及含钙的K-H液中,RyR阻断剂ryanodine(10-5mol/L)可部分恢复休克血管对NE的收缩反应性,而RyR激动剂caffeine(10-3mol/L)可进一步降低休克血管对NE诱导的收缩反应性。结论:失血性休克后由RyR介导的内钙释放被激活部分参与了休克血管低反应性的形成。     

吡那地尔预处理提高失血性休克血管的反应性和钙敏感性

目的:观察吡那地尔预处理诱导对失血性休克血管反应性和钙敏感性的保护作用以及与蛋白激酶C(PKC)α、ε的关系。方法:观察不同剂量吡那地尔在休克前不同时间预处理,对失血性休克大鼠去甲肾上腺素(NE)的升压效应和收缩血管效应的影响,以及对SMA一级分支微血管环血管反应性和钙敏感性的影响;观察PKCα、PKCε抑制剂对吡那地尔预处理诱导保护效应的影响,以及吡那地尔预处理对PKCα、PKCε蛋白转位的影响,证实PKCα和PKCε的作用。结果:(1)失血性休克2h后,NE的升压效应和收缩血管效应、SMA血管反应性和钙敏感性较正常组均显著降低(P<0.01),25μg/kgBW吡那地尔休克前30min预处理可改善休克后的上述变化;(2)PKCα和PKCε的拮抗剂可以消除25μg/kgBW吡那地尔休克前30min预处理诱导的失血性休克血管反应性和钙敏感性保护,使NE的Emax分别降低42.9%和62.9%(P<0.01),使Ca2+的Emax分别降低31.1%和56.1%(P<0.01);25μg/kgBW吡那地尔休克前30min预处理使PKCα和PKCε的胞膜表达较休克2h增高,胞浆表达较休克2h降低(P<0.01)。结论:吡那地尔预处理可通过诱导PKCα和PKCε的转位和活化,提高大鼠失血性休克后血管的反应性和钙敏感性。     

TRH与HAD单用及合用抗大鼠高原创伤失血性休克的作用

目的:在西藏拉萨进行现场实验,观察促甲状腺素释放激素(TRH)与5%NaCl/2.5%醋酸钠/6%右旋糖酐70(HAD)伍用对高原创伤失血性休克大鼠的治疗作用.方法:初进高原大鼠27只,分乳酸林格氏液对照组(8只),TRH治疗组(7只),HAD治疗组(6只)和TRH与HAD合用组(6只),大鼠右侧股骨粉碎性骨折加放血(维持动脉血压6.0 kPa 1 h)复制创伤失血休克模型,观察TRH(5 mg/kg),HAD(4 ml/kg)和两者合用对创伤失血性休克大鼠血流动力学指标和动物存活时间的影响,以等容量乳酸林格氏液作对照.结果:TRH、HAD单用或合用均能显著提升创伤休克大鼠血压,改善其左室内压(LVSP),左室内压最大变化速率(±dp/dtmax),实测心肌最大收缩速度(Vpm),心肌收缩向量环面积(Lo),明显延长休克动物的存活时间,合用效果稍优于TRH或HAD单用效果.结论:TRH、HAD均具有较好的抗高原创伤失血休克作用,两药可联合用于高原创伤休克的早期救治.     

TRH对吗啡镇痛作用的影响及其对呼吸、循环和中枢神经系统的作用

本文就TRH与NAL拮抗吗啡类药物的镇痛、成瘾及制动作用作了比较研究,并观察了TRH对呼吸、循环及中枢神经系统的作用。结果发现TRH不能拮抗吗啡类的镇痛、成瘾及制动作用。TRH(10μg icv或5mg/kg iv)可显著升高正常动物平均动脉压,加快心率及呼吸。TRH腹腔注射可缩短戊巴比妥钠的睡眠时间,并呈一定剂量依赖关系。     

Cx40和Cx43调节大鼠肠系膜上动脉收缩反应性与钙敏感性的机制

目的：研究连接蛋白Cx40/Cx43对大鼠肠系膜上动脉内膜依赖的血管收缩反应性与钙敏感性的调节作用机制。方法:以SD大鼠肠系膜上动脉（SMA）为研究对象,用Cx40或Cx43反义寡脱氧核苷酸（Cx40/Cx43AODN）阻断SMACx40或Cx43表达,观察缺氧处理后SMA的收缩反应性、钙敏感性、肌球蛋白轻链磷酸酶/激酶（MLCP/MLCK)的活性、20kD的肌球蛋白轻链（MLC20）磷酸化程度的变化。结果:Cx40AODN可以降低正常组、1h和3h缺氧组SMAMLCP活性,增加MLC20磷酸化水平,改善血管的钙敏感性和内膜依赖的收缩反应性;Cx43AODN可以增加各组血管的MLCP活性,减少MLC20磷酸化水平,降低血管的钙敏感性和内膜依赖的收缩反应性。Cx40和Cx43AODN对SMAMLCK活性无明显作用。结论:Cx40和Cx43主要通过调节血管平滑肌细胞的MLCP活性和MLC20磷酸化水平调节血管的钙敏感性,从而调节休克后内膜依赖的血管收缩反应性。     

地榆皂苷Ⅰ对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究

目的 基于网络药理学方法探讨地榆皂苷Ⅰ对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及机制,并通过实验进行验证。方法使用网络药理学方法预测地榆皂苷Ⅰ治疗脓毒症急性肺损伤的潜在靶点。采用盲肠结扎穿孔术复制大鼠脓毒症模型进行实验验证。将192只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、脓毒症组（Sep组）、常规治疗组（CT组）和地榆皂苷Ⅰ治疗组（ZgⅠ组）。Sham组、Sep组给予无菌生理盐水,CT组和ZgⅠ组大鼠给予相应剂量的林格氏液和地榆皂苷Ⅰ。观察各组大鼠动脉血气、血清炎症因子、肺湿/干质量比、肺组织病理变化、肺血管通透性、肺静脉紧密连接蛋白1(ZO-1)和血管内皮钙黏蛋白（VEcadherin）蛋白表达、72 h存活情况。结果 网络药理学结果显示,地榆皂苷Ⅰ治疗脓毒症的潜在靶点有47个,基因本体功能富集分析和京都基因与基因组百科全书通路富集分析结果显示,其机制可能与活性氧族代谢正向调控（positive regulation of reactive oxygen species metabolic process）、损伤修复（would healing）、内皮细胞增殖调控（regulat...     

失血性休克大鼠PKCα mRNA表达变化规律及对血管低反应性的调节作用

目的 观察PKCot在大鼠失血性休克血管平滑肌中mRNA表达变化规律,及其对失血性休克血管反应性和钙敏感性的调控作用.方法 采用PCR技术测定大鼠肠系膜上动脉不同休克时间点(休克即时、30 min、1 h、2 h、4 h)的PKCct mRNA表达;用离体血管环张力测定技术观察不同休克时间点的肠系膜上动脉一级分支的血管环反应性和钙敏感性变化,以及PKCa激动剂和抑制剂对休克2 h血管反应性、钙敏感性的影响.结果 ①失血性休克后大鼠血管反应性和钙敏感性早期增高、晚期降低,PKCot mRNA表达逐渐增高,于1 h达到峰值(P<0.01),4 h时仍处于较高水平(P<0.01).②PKCa激动剂和抑制剂可分别增高和降低休克2 h大鼠的血管反应性和钙敏感性.结论 PKCct在失血性休克血管反应性和钙敏感性调控中起重要作用,可能是休克血管功能的重要保护性分子.     

肌内皮缝隙连接对失血性休克大鼠血管收缩反应的影响

目的 研究肌内皮缝隙连接（MEGJ）对失血性休克大鼠内皮依赖性和非依赖性血管收缩反应的影响。方法 56只SD大鼠按随机数字表法分为去甲肾上腺素（NE）组和杨梅黄酮组；NE组分为正常对照以及休克0、0．5、1和2h5个亚组；杨梅黄酮组分为正常对照以及休克0、0．5、1、2、3和4h7个亚组。各组取其肠系膜上动脉（SMA）制成血管环，分别测量在18α-甘草次酸（18α-GA）作用前后血管环对NE和杨梅黄酮反应性的变化。结果 SMA血管环对NE的反应性表现为：休克0h和0．5h组明显高于正常对照组和其他休克时间点组，休克1h和2h组明显低于正常对照组和休克0h和0．5h组；18α-GA对NE诱导的SMA血管环收缩反应性无明显影响。SMA血管环对杨梅黄酮的反应主要表现为：休克0、0．5、1和2h组明显高于正常对照组，于休克2h达最高点；休克3h和4h组明显低于正常对照组，运用18α-GA阻断MEGJ后，各组血管环的收缩反应性较18α-GA作用前明显下降，其中以休克1、2和3h组下降幅度明显大于其他组。结论 失血性休克后早期，内皮依赖和非依赖性的血管收缩反应均有不同程度代偿性增加，休克1h和2h表现为非内皮依赖性血管收缩反应下降，休克3h和4h表现为内皮依赖性血管收缩反应明显降低；MEGJ在休克后内皮依赖性血管收缩反应的变化中起重要调节作用。     

创伤低血容量性休克大鼠脑μ、δ、κ阿片受体变化及其在心血管功能抑制中的作用

目的：探讨创伤低血容量性休克后脑组织μ、δ和κ阿片受体的变化及其与心血管功能抑制的关系，明确这３种阿片受体亚型是哪型或哪几型参与了创伤低血容量性休克的发病过程。方法：用大鼠创伤低血容量性休克模型，观察创伤低血容量性休克后大鼠脑组织μ、δ和κ阿片受体数目、亲和力变化以及与平均动脉压（ＭＡＰ）、左心室收缩压（ＬＶＳＰ）、左心室收缩压最大变化速率（±ｄｐ／ｄｔｍａｘ）等血流动力学指标变化的关系；观察δ和κ阿片受体特异性拮抗剂ＩＣＩ１７４８６４和ＮｏｒＢＮＩ侧脑室给药对创伤低血容量性休克大鼠血流动力学指标的影响。结果：创伤低血容量性休克后，大鼠脑δ和κ阿片受体数目明显增加，亲和力无明显变化；μ阿片受体的数目和亲和力均无明显变化；脑δ和κ阿片受体数目增加与创伤低血容量性休克后大鼠ＭＡＰ、ＬＶＳＰ和±ｄｐ／ｄｔｍａｘ等血流动力学指标下降呈显著负相关（Ｐ均＜０．０１）。δ和κ阿片受体特异性拮抗剂ＩＣＩ１７４８６４和ＮｏｒＢＮＩ可明显逆转创伤低血容量性休克大鼠血流动力学指标的下降。结论：脑组织δ和κ阿片受体在创伤低血容量性休克心血管功能抑制中起重要作用，可能参与了创伤低血容量性休克的发病过程。     

促甲状腺素释放激素与多巴胺伍用抗高原创伤低血容量性休克大鼠的作用

目的：观察促甲状腺素释放激素（ＴＲＨ）与多巴胺（ＤＡ）伍用对高原创伤低血容量性休克大鼠的治疗作用。方法：初进高原大鼠２８只，分生理盐水对照组（８只），ＴＲＨ组（７只），ＤＡ组（６只）和ＴＲＨ与ＤＡ合用组（７只）。大鼠右侧股骨粉碎性骨折加放血（血压６．０ｋＰａ维持１小时）复制创伤低血容量性休克模型，观察ＴＲＨ（５ｍｇ／ｋｇ）、ＤＡ（１ｍｇ／ｋｇ）和ＴＲＨ与ＤＡ半量合用对创伤低血容量性休克大鼠血流动力学指标和大鼠存活时间的影响。结果：ＴＲＨ单用或与ＤＡ合用能显著提高休克大鼠的血压，改善心肌收缩向量环面积（Ｌｏ），两药单用或合用均能改善休克大鼠左心室收缩压（ＬＶＳＰ）、左心室收缩压最大变化速率（±ｄｐ／ｄｔｍａｘ）、心肌最大收缩速度（Ｖｐｍ）；ＴＲＨ单用及与ＤＡ合用可明显延长休克大鼠的存活时间，合用效果优于ＴＲＨ或ＤＡ单用效果，并显示出一定的协同作用。结论：ＴＲＨ与ＤＡ合用抗高原创伤低血容量性休克有一定的协同作用。