斑蝥素酸镁通过ERK1/2信号通路对肝癌细胞增殖的抑制作用

目的 探讨斑蝥素酸镁抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖及其裸鼠皮下移植瘤生长的作用。方法 体内外实验随机分为空白对照组、斑蝥素酸镁组、ERK1/2激动剂组(EGF组)、ERK1/2抑制剂组(SCH772984组)、斑蝥素酸镁+EGF组、斑蝥素酸镁+SCH772984组。CCK-8法、流式细胞术分别检测各组细胞增殖、周期及凋亡变化,Western blot法检测各组细胞周期蛋白(Cdc25C、Cdc2、p-Cdc2)、ERK1/2蛋白磷酸化表达及凋亡蛋白(Bad、cleaved caspase-3和Bcl-2)表达;观察各组裸鼠皮下移植瘤的生长及质量变化,Western blot法检测裸鼠移植瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)表达及裸鼠移植瘤组织ERK1/2蛋白磷酸化表达。结果 斑蝥素酸镁+EGF组、斑蝥素酸镁+SCH772984组SMMC-7721细胞增殖率、p-ERK1/2、Cdc25C、Cdc2、Bcl-2蛋白表达分别低于EGF组、SCH772984组(P<0.01),而G₂/M期细胞比例、凋亡率、p-Cdc2、Bad、cleaved caspase-...     

二苯乙烯苷在体吸收动力学研究

目的:研究何首乌主要成分二苯乙烯苷在胃肠道的吸收。方法:通过大鼠在体胃肠灌流模型,采用酚红标记法校正肠循环液体积,HPLC法同时检测各时间点二苯乙烯苷和酚红的浓度,研究不同浓度二苯乙烯苷体内吸收情况。结果:质量浓度为60,30,10μg·mL~(-1)的二苯乙烯苷在胃内每小时的吸收百分率(PA)分别为(28.65±9.75)%,(17.04±3.98)%,(13.75±5.94)%;在小肠内的PA依次为(3.36±0.40)%,(3.36±0.79)%,(4.54±0.95)%。结论:二苯乙烯苷主要在胃内被吸收,在小肠段吸收较少。在胃酸环境下,随浓度的升高,吸收率显著增加,推测二苯乙烯苷在胃内的吸收机制为被动转运。不同浓度二苯乙烯苷在小肠内的吸收率无显著性差异,其机制可能为主动转运,还需进一步研究。     

交错皮瓣楔形切除法在小阴唇缩小术中的临床应用

目的 研究交错皮瓣结合错位缝合法进行小阴唇楔形切除术术后伤口愈合和瘢痕挛缩的情况.方法 自2019年1—12月中国医学科学院整形外科医院妇科整形中心选取107例符合小阴唇楔形切除指征的患者,随机分为两组,A组:56例患者采用常规楔形切除法;B组:51例患者采用交错皮瓣楔形切除法.B组通过改变小阴唇皮肤面和黏膜面切缘高度...     

不同生长年限人参中8种酶活力比较

目的:通过对4、5、6、7年生人参中的8种酶活力进行比较,为人参的生长发育研究奠定基础。方法:采用中性缓冲液提取粗酶液,应用分光光度法对4个不同生长年限的人参中苹果酸脱氢酶(MDH),乳酸脱氢酶(LDH),乙醇脱氢酶(ADH),葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH),超氧化物歧化酶(SOD),葡萄糖磷酸异构酶(GPI),谷丙转氨酶(GPT)和延胡索酸酶(Fumarase)8种酶活力进行比较。结果:除SOD和GPI外,其他6种酶活力均是6年生人参样品最高,4年生样品活力最低。结论:这8种酶的活力可以作为不同生长年限人参生长发育研究的理论依据。     

人参叶生长发育过程中几种氧化还原酶活力比较

目的:对五年生人参叶生长发育过程中苹果酸脱氢酶(Malate Dehydrogenase MDH),乳酸脱氢酶(Lactate de-hydrogenase LDH),乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase ADH),葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(Glucose-6-phosphate Dehydro-genase G6PDH),α-磷酸甘油脱氢酶(α-Glycerophosphate dehydrogenaseα-GPD)5种氧化还原酶的活力进行比较,了解人参叶生长情况。方法:分别于展叶期、开花期、绿果期、红果期、枯萎期采取人参叶样品。采用中性缓冲液提取粗酶液,应用分光光度法测定MDH、LDH、ADH、G6PDH、α-GPD的活力。结果:在人参叶生长发育过程中,MDH、ADH和LDH活力在展叶期明显高于其他时期;LDH、G6PDH在展叶期和结果期末期活力最高;α-GPD在结果期出现活力峰值。结论:通过测量MDH、LDH、ADH、G6PDH、α-GPD的活力变化可判断人参生长情况。     

成人Still病并发急性早幼粒细胞白血病1例报告

<正>1病历摘要患者,女,30岁,以"间断发热、双手皮疹3年,乏力头晕2个月"为主诉于2012年10月24日收入院。3年前间断发热,体温最高39℃,畏冷,无寒战,后出现双手皮疹,发热时皮疹加重,突出于皮面,双手关节肿痛,握拳困难,周身肌肉酸痛,就诊于我院,化验检查血清铁蛋白>1 500μg/L,WBC 21.7×109/L,ANA(-),诊断成人Still病。应用泼尼松、羟氯喹治疗,后症状缓解,激素逐渐减量,白细胞恢复正常。2个月前因乏力、头晕再次入我院风湿免疫科,血常规检查示白细胞及血红蛋白减少,转入血液科进一步诊治。入院时查体:T:36.4℃,P:82次/min,R:17次/min,Bp:125/70 mm Hg(1 mm     

猪带绦虫重组Bb(pGEX-TSO45W-4B-TSOL18)疫苗的构建及鉴定

目的构建和鉴定猪带绦虫重组双歧杆菌(Bb)(pGEX-TSO45W-4B-TSOL18)疫苗。方法用疏水甘氨酸接头连接TSO45W-4B和TSOL18编码基因,通过全基因合成方法合成猪带绦虫TSO45W-4B-TSOL18融合基因。将该融合基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX-TSO45W-4B-TSOL18。电穿孔法将该质粒导入Bb,构建猪带绦虫重组Bb(pGEX-TSO45W-4B-TSOL18)疫苗,从具有氨苄青霉素抗性的rBb中抽提质粒进行酶切、PCR和测序鉴定。结果全基因合成789bp的TSO45W-4B-TSOL18融合基因片段。从具有氨苄青霉素抗性的rBb中抽提质粒pGEX-TSO45W-4B-TSOL18,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切得到4 944bp的pGEX-1λT载体片段和789bp的TSO45W-4B-TSOL18融合基因片段,与预期结果相符;以该重组质粒为模板进行PCR扩增得到789bp的TSO45W-4B-TSOL18融合基因片段,经测序基因片段为789bp,与预期大小相符。结论成功构建了猪带绦虫重组Bb(pGEX-TSO45W-4B-TSOL18)疫苗,为该疫苗的表达及免疫原性研究奠定了基础。     

精神行为异常合并癫痫发作的女性青年麻痹性痴呆1例

以精神行为异常起病的麻痹性痴呆需要与相关精神疾病鉴别。本文报告1例女性青年患者,以间断性精神行为异常合并癫痫发作的麻痹性痴呆临床资料及其诊疗过程,供临床医生参考。患者女,29岁因性格改变、行为异常就诊于精神专科医院,病情反复,后因合并癫痫发作,就诊于神经内科,行血液及脑脊液梅毒相关抗体检查、简易智力状态评定量表检查、头部MRI等相关检查,诊断为麻痹性痴呆,予青霉素治疗,症状有所好转。本病例发病年龄轻,神经系统症状出现早,提示临床医生要注意年轻患者梅毒的早期筛查,做到早发现、早治疗。     

猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗诱导仔猪免疫应答的动态观察

目的 研究猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗免疫仔猪后诱导免疫应答的动态变化。方法 将16头40 d龄健康仔猪均分为4组:重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗组、重组Bb-TSO45W-4B疫苗组、重组Bb-TSOL18疫苗组和双歧杆菌液体培养基(MRS)对照组。各疫苗组均以1011CFU灌胃免疫,间隔2周免疫1次,共免疫2次。在免疫后0、2、4、6、8周采集仔猪前腔静脉血,分离血清和外周血淋巴细胞(PBMC)。采用ELISA法检测仔猪血清IgG、IgG1及IgG2a水平和PBMC培养上清液IL-2、IFN-γ、IL-4及IL-10水平;MTT比色法检测PBMC增殖水平;FCM检测CD₄⁺和CD₈⁺T细胞亚群。结果 　各疫苗组血清IgG、IgG1、IgG2a水平均在免疫后2~8周升高,均在免疫后4周、6周、4周达较高水平;PBMC增殖水平均在免疫后2~8周升高,均在免疫后6周达较高水平CD₄⁺和CD₈⁺T细胞水平均在免疫后2~8周升高,均在免疫后8周和6周达较高水平;PBMC培养上清液IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平分别在免疫后2~6周、2~8周、4~6周和2~8周升高,分别在免疫后4周、6周、4周和8周达较高水平。各疫苗组上述指标与MRS对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗组与重组Bb-TSO45W-4B疫苗组和重组Bb-TSOL18疫苗组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B-TSOL18疫苗免疫仔猪可诱导产生特异性的免疫应答,且TSO45W-4B-TSOL18融合抗原疫苗组优于TSO45W-4B或TSOL18单一抗原疫苗组。     

猪带绦虫TSOL18基因的表达、纯化和兔抗血清的制备

目的 构建猪带绦虫重组质粒pGEX-TSOL18,表达纯化TSOL18重组蛋白,制备兔抗重组蛋白血清。方法 全基因合成猪带绦虫TSOL18抗原编码基因,定向克隆到pGEX-1λT表达载体,构建重组质粒pGEX-TSOL18;转化大肠埃希菌ArcticExpress(DE3), IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达情况;亲和层析纯化获得重组蛋白,免疫兔制备抗血清;ELISA测定抗血清的效价,Western blot鉴定抗血清的特异性。结果 全基因扩增出393 bp的TSOL18抗原编码基因,酶切和测序鉴定证实TSOL18基因成功插入pGEX-1λT中;SDS-PAGE分析显示表达重组蛋白相对分子质量(Mr)约为41 kDa,经亲和层析后可获得纯度为75%的重组蛋白;ELISA测定抗血清的效价为1∶256 000,Western blot证实该抗血清能与重组蛋白发生特异性反应。结论 猪带绦虫TSOL18基因能在大肠埃希菌中高效表达,成功制备了高纯度的TSOL18重组蛋白和高滴度的兔抗重组蛋白血清,为猪带绦虫的疫苗研制奠定了基础。