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51.
背景:慢性充血性心力衰竭(CHF)时,心肌肌浆网钙离子ATP酶2a(sarcoplasmic reticulum Ca2 ATPase,SERCA2a)的蛋白表达和活性均明显降低,这导致钙离子的调控异常和心脏收缩和舒张功能不全。目的:观察腺相关病毒为载体的SERCA2a基因转导对CHF大鼠的短期和中长期治疗作用,探讨其治疗心力衰竭的多种可能的机制。设计:随机对照设计。单位:解放军总医院老年心内科和病理生理研究室。方法:将雄性SD大鼠随机分为,假手术组,CHF组,CHF GFP组和CHF SERCA2a组4组,每组又分为基因转导10,30d2个时间点,后3组采用腹主动脉缩窄术建立CHF大鼠模型,手术后18~20周,造模成功的大鼠进行经腹心包腔内注射,CHF组注射500μL无菌生理盐水,CHF GFP组和CHF SERCA2a组分别注射等量携带GFP基因和SERCA2a基因的重组腺相关病毒。主要观察指标:①于基因转导后10,30d,检测大鼠的血流动力学参数,应用WesternBlot方法检测SERCA2a蛋白表达;改良的Jones法测定SERCA2a活性。②应用蛋白质组学研究技术分析比较基因转导30d组中CHF和CHF SERCA2a亚组大鼠的心肌蛋白质组表达的差异。③应用电泳分离和定量的方法检测基因转导30d组的各亚组大鼠心肌肌球蛋白重链亚型的表达情况。结果:①SERCA2a蛋白表达和活性:CHF组和CHF GFP组低于假手术组。基因转导10d后,CHF SERCA2a组与CHF组比较,SERCA2a蛋白表达增加80.7%,活性增加89.9%,但低于假手术组水平;基因转导30d后,CHF SERCA2a组SERCA2a蛋白表达和活性已经达到假手术组大鼠水平。②心脏功能:基因转导10d后,CHF SERCA2a组血流动力学指标中左室舒张末压力明显下降,其他指标明显升高,但未完全达到对照大鼠的心功能水平;基因转导30d后心脏收缩和舒张功能进一步改善,各项指标与假手术组比较差异不显著。③心肌蛋白质组的研究发现,基因转导30d后,CHF SERCA2a组多种能量代谢的酶表达明显增加。④凝胶电泳发现:CHF时α-MHC的表达明显降低而β-MHC则显著增加,α-MHC/β-MHC明显低于假手术组大鼠;基因转导30d后,α-MHC、β-MHC的表达以及α-MHC/β-MHC恢复至假手术组大鼠水平。结论:以重组腺相关病毒2作为载体,SERCA2a基因转导可以增强衰竭心脏的SERCA2a功能,纠正Ca2 稳态异常,增加心脏能量代谢,纠正MHC亚型的异常表达,增强心脏收缩和舒张功能;因而SERCA2a基因转导对CHF具有良好的短期和中长期治疗作用。 相似文献
52.
目的构建人肌纤生成调节因子1全长的真核表达质粒,并观察其在HEK293T细胞系及Sprague-Daw-ley乳鼠心肌细胞中的表达。方法从NCBI GenBank数据库中克隆得到人肌纤生成调节因子1基因(AF417001)全长序列,与真核表达载体质粒pcDNA3.1/Myc-His(-)B连接并转化大肠杆菌XL1-Blue,筛选阳性克隆,T7引物测序,转染细胞后以逆转录聚合酶链反应、Western Blotting方法检测人肌纤生成调节因子1的表达。结果pcDNA3.1/Myc-His(-)B-hMR-1质粒经测序证实目的基因序列正确,无碱基突变。该质粒转染到HEK293T细胞系和乳鼠心肌细胞后人肌纤生成调节因子1的转录水平及表达水平明显增高。结论成功构建了人肌纤生成调节因子1全长的真核表达载体并确定了简便有效的乳鼠心肌细胞瞬时转染方法。 相似文献
53.
目的:在大鼠急性心肌缺血再灌注中,探讨乳酸延长局部组织酸中毒能否模拟后适应发挥有效的心肌保护作用.方法:72只SD大鼠随机分为假手术组、再灌注损伤组、后适应组和乳酸组,每组18只.测定再灌注10 min后右心房血浆pH值,并在不同时间点处死大鼠,分别测定心肌酶活力、心肌丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性、心肌组织线粒体吸光度,磷酸化的细胞外信号调节蛋白激酶、线粒体调控因子Bcl-2和Bax的表达,以及细胞凋亡和心肌梗死面积.结果:再灌注10 min后乳酸组与后适应组右心房血浆pH值相似(P>0.05).再灌注1 h后乳酸组和后适应组同再灌注损伤组相比均显著抑制了线粒体吸光度的降低(P<0.05),但再灌注6 h后乳酸组抑制作用明显减弱(P>0.05).乳酸组和再灌注损伤组相比未改变心肌组织丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性(P>0.05).磷酸化的细胞外信号调节蛋白激酶、Bcl-2和Bax的表达上乳酸组虽优于再灌注损伤组(P<0.05),但同后适应组相比差异仍有统计学意义(P<0.05).另乳酸组可不同程度降低心肌酶活力、凋亡指数和心肌梗死面积,但凋亡指数仍显著高于后适应组(P<0.05).结论:乳酸可以部分模拟后适应带来的保护效应,局部酸中毒的短暂延长可能只是后适应最上游触发因子之一. 相似文献
54.
目的:优选目赤消痛颗粒剂的最佳水提工艺。方法:采用正交试验设计法,以黄芩苷的得率为指标,确定加水量,煎煮时间,煎煮次数3个提取参数。结果:确定目赤消痛颗粒剂的最佳水提工艺条件为加8倍量水,煎煮3次,每次2 h。结论:目赤消痛颗粒剂的水提取工艺稳定,可行。 相似文献
55.
目的分析HRCT结合曲面重建在诊断强直性脊柱炎(AS)骶髂关节病变的诊断价值。方法对96例临床明确诊断AS患者的骶髂关节行高分辨CT扫描及曲面重建,分析其影像表现。结果骶髂关节炎可以双侧或单侧。早期(CTⅠ~Ⅱ级)48例,多累及髂骨侧,表现为骶髂关节髂骨面下小虫蚀样破坏或微小囊变,关节面下轻微硬化,关节面皮质白线中断,略毛糙。中期(CTⅢ级)34例,双侧受累,关节面及关节面下骨侵蚀破坏,呈锯齿样或毛刷样改变,周围骨增生硬化明显,关节面模糊毛糙,可见软骨或韧带钙化,关节间隙不规则狭窄,少数可见真空现象。晚期(CTⅣ级)14例,多双侧受累,关节间隙消失,关节强直,周围骨质疏松。结论 HRCT可显示骶髂关节的细微结构,结合曲面重建在影像表现上提供更全面的范围,因此HRCT具有较高的敏感性和特异性,可做出更早期诊断及明确的分级及分期,为临床治疗提供客观依据。 相似文献
56.
建设一流研究型医院的关键在于高素质的医学人才。本文总结“科研式”病理生理学教学体系在研究生教学中的应用情况,该体系的实施可以启迪学员创造性的思维,训练学员的科研思路与技能,提高学员的科研素质,是研究型医院研究生病理生理学教学的一种新探索。 相似文献
57.
目的:了解母亲孕期感染弓形虫的妊娠结局及出生活婴的体格、智力发育情况。方法:孕妇按静脉血弓形虫IgM或CAg阳性/阴性分感染组和非感染组,将小儿按脐血弓形虫检测结果分组,观察发育情况。结果:母亲感染组异常妊娠结局高于正常非感染组;孕期感染弓形虫出生子代发育受到明显影响,体重、智力显著降低,但对身高无明显影响。结论:孕期感染弓形虫可以透过胎盘将病原体传给子代,母亲孕期感染弓形虫不仅脐血阳性子代发育指标明显降低,脐血阴性者也低于非感染组。 相似文献
58.
子宫颈小细胞癌(small cell carcinoma of the cervical,SCCC)是一种原发于子宫颈的神经内分泌癌,仅占子宫颈恶性肿瘤的1%~6%,且SCCC早期即可发生盆腔淋巴结及远处转移,复发率极高,5年存活率仅14%~39%。现将解放军第180医院收治的3例SCCC病例结合免疫组化标记,探讨该肿瘤的临床病理特点、诊断与鉴别诊断。 相似文献
59.
[目的]分析比较老年急性胆囊炎用腹腔镜和开腹手术治疗的疗效. [方法]回顾性分析60例老年急性胆囊炎用腹腔镜技术治疗的临床资料,并与同期60例老年急性胆囊炎开腹手术进行比较. [结果]腹腔镜组与开腹组比较差异有统计学意义(P<0.01),老年急性胆囊炎患者用腹腔镜技术完成手术,手术时间短(45.3±11.8)min,术中出血量少(13.4±11.1)ml,术后(9.2±4.5)h可以下床活动,住院时间短为(4.4±1.5)d. [结论]腹腔镜用于老年急性胆囊炎胆囊切除术具有操作简单、安全、切口小、痛苦小、出血量少,手术、住院时间短的特点,是治疗老年急性胆囊炎的最佳方式. 相似文献
60.
目的: Qc小组活动对突发性耳聋患者临床疗效、焦虑抑郁情绪和患者护理满意度的影响。方法耳鼻喉科收治的80例突发性耳聋患者,观察Qc小组成立前后各40例患者,分别为对照组和观察组。对照组仅接受突发性耳聋常规护理,观察组则接受PDCA循环管理模式指导下的护理干预措施,比较2组患者临床疗效、焦虑抑郁情绪和患者护理满意度。结果观察组患者治疗总有效率为95.00%,明显低于对照组(80.00%),差异有统计学意义( P <0.05)。观察组患者护理满意度为100%,明显高于对照组(85.00%),差异有统计学意义( P <0.05)。2周后,观察组患者焦虑自评量表得分为(50.47±3.26)分,抑郁自评量表得分为(42.35±3.28)分,明显低于对照组,差异有统计学意义( P <0.05)。结论 PDCA循环管理模式指导下的护理干预措施能够明显改善突发性耳聋患者治疗效果,减轻患者焦虑抑郁情绪程度,提高患者护理满意度。 相似文献