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91.
目的 克隆肿瘤特异Ki-67启动子,观察其在人肿瘤细胞中的转录活性.方法 提取肾癌Ketr-3细胞基因组总DNA作为模板,聚合酶链反应(PCR)获取1.6 kb的Ki-67启动子DNA片段.克隆到pGL3-Basic载体构建双荧光素酶检测质粒pGLB-Ki-67.将pGLB-Ki-67转染4种人肿瘤细胞及人脐静脉内皮Huvec细胞,使用双荧光素酶检测系统鉴定启动子活性及肿瘤特异性.结果 电泳与测序结果 显示克隆出的Ki-67启动子片段序列与Genbank中记录一致,pGLB-Ki-67质粒构建成功.其启动子活性在Hela、BIU-87、Ketr-3、A549 4种人肿瘤细胞内分别达到SV40 promoter/enhancer活性的21.0%、31.1%、23.9%和7.2%;在Huvec细胞内仅为0.5%.结论 克隆出I(5-67基因启动子(-820~+771),并证明其具有良好转录活性. 相似文献
92.
目的 观察含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)肽模体的白细胞介素(IL)-24突变体蛋白(RGD-IL-24)对肝癌细胞的抑制作用.方法 肝癌HepG2细胞分别加入各10μl的RGD-IL-24(8 mg/L)、IL-24(8 mg/L)和磷酸盐缓冲液(PBS),噻唑蓝(MTT)比色法检测HepG2细胞生长抑制作用;DAPI染色检测HepG2细胞凋亡;免疫印迹法检测HepG2细胞bax、bcl-2及Caspase-3蛋白表达;黏附实验检测与HepG2细胞的靶向黏附.结果 RGD-IL-24、IL-24治疗4 d后HepG2细胞存活率分别为(0.219±0.015)、(0.397±0.009),与对照组(0.823±0.013)比较差异有统计学意义(P<0.01).RGD-IL-24、IL-24治疗组细胞凋亡率分别为(0.631±0.027)、(0.472±0.031),与对照组(0.082±0.013)比较差异有统计学意义(P<0.01).RGD-IL-24抑制HepG2细胞生长、诱导凋亡效果均比IL-24显著增强(P<0.05).与IL-24治疗组比较,RGD-IL-24治疗组HepG2细胞促凋亡蛋白bax增加、抗凋亡蛋白bcl-2减少、活化Caspase-3蛋白量增加.黏附实验证实RGD-IL-24与HepG2细胞的靶向结合作用增强.结论 含RGD肽模体的IL-24蛋白能通过与肝癌HepG2细胞的靶向结合增强其凋亡诱导作用. 相似文献
93.
目的:鼠抗人CD83功能性单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定.方法:以人CD83转基因细胞L929/CD83为免疫原,常规免疫6~8周龄的雌性BALB/c小鼠;采用B淋巴细胞融合技术,将免疫小鼠脾脏细胞与Sp2/0融合,以L929/CD83、293/CD83转基因细胞为抗体筛选阳性细胞,经免疫荧光标记分析对杂交瘤进行反复筛选和多次的克隆化培养;采用Ig类和亚类快速定性试纸法、染色体核型分析、竞争结合抑制试验、间接免疫荧光法、Western blot对mAb的生物学特性进行鉴定.结果:获得1株稳定分泌鼠抗人CD83mAb的杂交瘤细胞株(命名为9D8),该mAb能特异性地识别成熟的DC、活化的T细胞及肿瘤细胞株Daudi、8226表达的CD83分子,该mAb识别的位点不同于商品化抗人CD83mAb(HB15e).结论:成功地研制1株鼠抗人CD83mAb,识别位点与HB15e不同,为更好地研究该分子的功能提供良好的物质基础. 相似文献
94.
食管癌同期放化疗的临床观察 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:观察中晚期食管癌同期放化疗与单纯放疗的毒副反应及疗效.方法:将中晚期食管癌患者155例分为同期放化疗组77例和单纯放疗组78例,两组患者均接受三维适形放疗或调强放疗,中位处方剂量均为60 Gy.化疗方案为顺铂、5-FU和亚叶酸钙针,于放疗开始的第1、5周同期给予,观察患者治疗完成情况和急性毒副反应及生存率、局控率并进行亚组分析.结果:1)同期组白细胞、血小板、血色素减少情况均高于单放组,P<0.05.两组≥2级急性放射性食管炎发生率分别为51.95% (40/77)和24.36%(19/78),x2=12.510,P=0.000,中重度急性放射性肺炎发生率分别为15.58%(12/77)和3.85%(3/78),x2 =6.108,P=0.013.2)同期组与单放组1、2、3和4年局控率和总生存率差异均无统计学意义,P>0.05.亚组分析未寻找到加入同期化疗后局控和生存获益的患者.3)局部控制失败仍然是患者死亡的主要原因,同期组与单放组死于远处转移患者的比率分别为28.6%( 10/35)和32.6%(14/43),x2=0.144,P=0.704.结论:食管癌精确放疗联合同期化疗有可能出现较重的毒副反应,患者总生存率、局控率及中位生存期有提高的趋势,但均未达统计学差异,临床价值需要进一步探讨. 相似文献
95.
96.
目的采用多重巢式PCR(multi—nest PCR)方法,以TEL-AML1融合基因为靶分子,研究TEL-AML1阳性儿童急性淋巴细胞性白血病(Acute Lymphoblastic Leukemia,ALL)的临床特点及生存分析。方法以20例TEL-AML1阳性患儿为研究对象,选取同期初诊的融合基因阴性的52名患儿为对照,研究两组患儿初诊临床特征并比较TEL-AML1阳性和阴性患儿的无事故生存率(Event Free Survival,EFS)。所有结果用SPSS10.0统计软件包处理。结果TEL-AML1阳性患儿多伴随白细胞〈25×10^9/L、年龄在1至9岁之间、B系淋巴细胞表型等临床特征;TEL-AML1阳性患儿的5年EFS为91%,对照组为87%,两者无显著性差异。结论TEL-AML1融合基因携带者多伴随提示预后良好的临床特征;TEL-AML1融合基因阳性不是影响预后的独立因素。 相似文献
97.
98.
目的:探索残余胆固醇(RC)是否可成为老年冠脉综合征(ACS)患者的危险分层及预后评估指标。
方法:本研究为前瞻性队列观察研究。连续入组2020年3月—2021年3月于解放军总医院心血管内科住院的老年ACS患者,通过电子病历系统收集患者的基线临床资料、实验室检查等资料并计算RC水平,通过冠脉造影的分析进行Gensini评分。对所有患者进行随访,随访终点为发生主要不良心血管事件(MACEs)。采用多因素Logistic回归模型分析发生MACEs的危险因素,受试者工作特征(ROC)曲线评估不同危险因素对ACS患者预后的预测价值,并采用Spearman相关性检验评估RC与冠脉病变严重程度的关联。
结果:研究最终入选老年ACS患者740例,其中1年随访期内发生MACEs者84例(11.35%)。多因素Logistic回归分析结果显示,通过校正,LDL-c(OR=0.998,95%CI:0.997-1.000,P=0.015)与RC(OR=0.135,95%CI:0.069-0.265,P<0.001)为老年ACS发生MACEs的独立危险因素。ROC曲线分析结果显示LDL-c及RC对预后评估有良好的预测价值,AUC分别为0.754(95%CI:0.719-0.786)、0.774(95%CI:0.740-0.805),二者联合评估预后的效能优于二者单独预测0.868(95%CI:0.840-0.893)(P<0.001)。RC与Gensini评分的相关系数R2为0.49,二者呈正相关。
结论:RC与老年ACS患者的冠脉病变狭窄程度正相关,并对患者MACEs的预后评估具有较好的应用价值。 相似文献
99.
目的 与Rutkow术治疗成人原发腹股沟疝比较,探讨Modify Kugel术的优点.方法 回顾性分析笔者所在医院2006年3月~2009年3月开展的30例(35侧)Rutkow 疝环填充式无张力疝修补术及Modify Kugel 无张力疝修补术35例(40 侧)的临床资料.结果 全组病例按手术情况、术后并发症等,对两种手术方式进行比较,Modify Kugel术术后止痛剂应用次数、平均恢复自主活动时间、切口疼痛及异物感例数均明显减少,差异有统计学意义(P<0.01);平均切口长度、平均手术时间、发热例数、平均住院时间均减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 与Rutkow术比较,Modify Kugel术更符合工程力学原理,适应证更广,免缝合,减少了手术时间及并发症,术后疼痛轻、恢复快;具有微创手术的特点,与腹腔镜手术具有相似的效果.Modify Kugel术是一种具有良好发展潜力的无张力疝修补术. 相似文献
100.