肿瘤生物学基础(4)

体外试验表明,有E鄄Cad表达的肿瘤细胞株无浸润性,而浸润性表型的肿瘤细胞株则无E鄄Cad表达。E鄄Cad表达与肿瘤细胞分化之间有密切关系,分化好的细胞E鄄Cad正常,分化差的细胞E鄄Cad不表达。编码E鄄Cad的基因,功能上是肿瘤抑制基因,此基因突变或缺失导致过度增生、细胞形态及分化异常。转染E鄄CadcDNA可抑制肿瘤细胞的浸润转移。Vleminchix等给高浸润性细胞株转染E鄄CadcDNA,使其浸润性降低,体内形成肿瘤后分化亦较未转染的细胞为好。而转染E鄄Cad反义RNA到E鄄Cad高表达的细胞株中,使E鄄Cad表达下调,可促使肿瘤浸润。Navarro等…     

MAGE-3逆抗原转染树突状细胞的抗胃癌免疫效率

目的 构建逆抗原表达载体,以获得理想的肿瘤疫苗.方法 运用RT-PCR方法合成MAGE-3 cDNA,分别将RANTES基因分泌段前导序列和受体Fc段克隆至MAGE-3 cDNA两端(pS-MAGE-3-Fc)再转染入DC表达,将致敏的DC与外周血T细胞和胃癌细胞共培养,观察产生的免疫效应.结果 转染pS-MAGE-3-Fc的DC诱导的刺激淋巴细胞增殖反应和CTL杀伤效应均显著高于转染pMAGE-3的转染组和对照组(P＜0.05).结论 逆抗原策略是理想的肿瘤疫苗策略,能够显著提高肿瘤免疫效率.     

5-FC/CD 系统对荷大肠癌裸鼠肿瘤的杀伤效应

目的研究ｃｄ基因对大肠肿瘤的特异杀伤作用，探索自杀基因靶向治疗大肠癌的有效途径．方法逆转录病毒感染法将Ｇ１ｃｅａｃｄＮａ及ｐｃｄ２分别转导入高分泌ＣＥＡ的大肠癌细胞Ｌｏｖｏ中，再分别接种到裸鼠皮下．成瘤后腹腔给予５ＦＣ（５００ｍｇ／ｋｇ）治疗，观察肿瘤重量的变化及病理学特点．结果含Ｇ１ｃｅａｃｄＮａ及ｐｃｄ２逆转录病毒载体的病毒滴度分别为：１３×１０７及２１×１０８ＣＦＵ／Ｌ．所有转基因成功并接种动物均成瘤．腹腔给予５ＦＣ治疗后发现，转由ＣＥＡ基因顺式转录调控序列（ＴＲＳ）驱动ｃｄ基因的组织特异性重组逆转录病毒载体Ｇ１ｃｅａｃｄＮａ的肿瘤对５ＦＣ的敏感性明显高于转非ｃｅａ调控ｃｄ基因的肿瘤，治疗结束后肿瘤重量分别为３１ｍｇ±８ｍｇ及１１３ｍｇ±２３ｍｇ（Ｐ＜００１）．结论本实验提示ｃｅａ转录调控序列可控制ｃｄ基因在ＣＥＡ阳性的大肠癌组织中高效表达，进而在前药５ＦＣ的作用下发挥选择性杀伤肿瘤的作用     

蛋白质组研究技术及其在筛选肿瘤标志物中的应用

肿瘤标志物是细胞在特定疾病状态下的分子信号．是检测、诊断、治疗、监测肿瘤和判断肿瘤预后的重要工具。如何发现新的、具有高度特异度和灵敏度的肿瘤标志物多年来一直是肿瘤研究的热点之，蛋白质和蛋白质组学研究的快速发展给肿瘤标志物研究注入了新的活力。蛋白质组一词由Wilkins于1994年首次提出，意指一种基因组或一种细胞所表达的全套蛋白质，近年迅速发展为一门新兴学科——蛋白质组学(pmteomics)，其含义主要包括3个方     

Demethylation of the γ-synuclein gene CpG island in colorectal cancer and its clinical significance

Objective To explore the relationship between γ-synuclein gene expression and CpG island demethylation in colorectal cancer (CRC), and the relationship between the demethylation and clinicopathological factors of CRC. Methods The expression of γ-synuclein mRNA was examined in 30 pairs of tumor tissues and tumor-matched non-neoplastic adjacent tissues (NNAT) by RT-PCR.CRC cell lines including COLO205, LoVo, and SW480 were used and treated with a demethylating agent, 5-aza-2'-deoxycytidine (5-aza-C). Before and after the treatment, the expression of γ-synuclein mRNA in the cells was determined by RT-PCR, and bisulfite sequencing PCR was also used to analyze methylation status of CpG island. The methylation status of γ-synuclein was then examined in 67 CRC samples and 30 NNAT samples by nested methylation-specific PCR (NMSP) and real time methylationspecific PCR (real-time MSP). The relationship between the demethylation of γ-synuclein in CRC and clinicopathological factors was analyzed. Results The mean γ-synuclein mRNA expression was 0.66±0.34 in CRC samples, which was much higher than 0.45±0.26 in NNAT samples (P=0.011). 5-aza-C could induce expression and demethylation of γ-synuclein in COLO205, LoVo and SW480 cells. Γ-Synuclein gene was demethylated in 80.0%(24/30) of the CRC samples and 50.0%(15/30) of the NNAT samples.The demethylated status of γ-synuclein was much higher in CRC samples than that in NNAT samples (P=0.030), and was significantly correlated with clinical stage, lymph node involvement, and distant metastasis of CRC (P＜0.05). Conclusion The upregulation of γ-synuclein expression in CRC is primarily attributed to the demethylation of CpG island, which may be used as a marker for prognosis.     

双向电泳联合串联质谱技术筛查人胃癌血清蛋白质标记物

目的:通过血清蛋白质组学技术寻找胃癌标记物,是目前肿瘤研究的热点.文中比较胃癌患者与正常人血清蛋白质的差异,以寻找候选血清标记物. 方法:①随机选取20例胃癌患者(胃癌组)血清,pTNM分期(Ⅰ～Ⅳ期)各5例,10例正常人(对照组)血清作对照.②血清样品处理:通过蛋白亲和柱去除血清清蛋白和IgG两种高丰度蛋白.③通过双向电泳进行差异比较,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI/TOF/TOF/MS)鉴定差异蛋白点.④利用免疫印记方法对筛选的标记物蛋白质进行验证. 结果:发现胃癌患者较正常人存在多个蛋白质点差异,差异蛋白质点质谱鉴定结果显示,补体 C4-B 前体在胃癌血清中含量明显增高;补体因子Ⅰ前体和血清结合珠蛋白前体则含量显著降低(P＜0.01). 结论:利用血清蛋白质组学技术可筛选出胃癌血清蛋白标记物,为胃癌的血清学诊断提供依据.     

以树突状细胞为基础的肿瘤疫苗研究进展

树突状细胞作为一种目前已知的功能最强的抗原提呈细胞，可以体内外向Ｔ细胞提呈抗原并诱发ＣＴＬ反应。９０年代开始，ＤＣ在肿瘤免疫治疗中的作用逐渐受到重视。近年来，在ＤＣ的基础和临床应用研究方面取得了一些突破性的进展。     

树突状细胞肿瘤疫苗研究进展

人类肿瘤疫苗治疗的目标是诱导肿瘤特异性和长期的免疫应答,以清除体内肿瘤。树突状细胞(dendriticcells,DC)是一类专职的抗原提呈细胞,在诱导、调节、维持机体抗肿瘤免疫中起核心作用[1]。本文就DC的肿瘤疫苗研究进展作一综述。树突状细胞概述1.DC生物学特性人DC发育经历4个阶段:①骨髓干细胞;②在血液、淋巴液和淋巴样组织中循环的DC前体;③定居于组织中的未成熟DC;④次级淋巴样器官中的成熟DC。CD34+造血干细胞经粒鄄巨噬细胞集落刺激因子(GM鄄CSF)和肿瘤坏死因子(TNF)诱导可产生髓样DC、表皮朗格罕细胞和间质DC。表皮朗格罕…     

胃癌微卫星不稳定性及其与临床病理生物学的关系

目的探讨微卫星不稳定性 (MSI)发生与胃癌临床病理生物学行为的关系及其临床意义.方法采用酚氯仿异戊醇法从胃癌组织切片中提取 DNA.组织切片中肿瘤成分不足 50%时采用显微微切割方法.以 PCR为基础的单链构像多态性方法分析胃癌组织分别在 BAT26、 BAT40、 D2S123、 D5S346和 D17S250 5个位点的微卫星不稳定性.结果按照微卫星不稳定性的发生频率将胃癌患者分为 3组 出现 2个或 2个以上微卫星位点不稳定性为高 MSI组( MSI-H);出现 1个位点不稳定性为低 MSI组( MSI-L);无 MSI发生为微卫星稳定组( MSS). 61例胃癌患者中, 12例( 19.7%)为 MSI-H, 11例( 18.0%)为 MSI-L, 38例( 62.3%)表现为 MSS. MSI-L组与 MSS组患者在胃癌各临床病理生物学参数间差异无显著性意义( P >0.05),但这两组与 MSI-H组比较,在肿瘤的发生位置、 Lauré n分型、淋巴结是否转移和肿瘤分期方面差异有显著性意义( P< 0.05). MSI-H型胃癌多发生于胃窦部,多见于淋巴结转移阴性、肠型和较早期胃癌,其发生与患者年龄、性别和肿瘤大小无明显的相关性.结论 MSI-H型胃癌与 MSI-L或 MSS型胃癌具有不同的临床病理学行为, MSI-H型胃癌与肿瘤位置、淋巴结是否转移、 Lauré n分型及肿瘤分期密切相关.微卫星不稳定性可能是胃癌发生的另一分子机制.     

完整组织块裸鼠胃壁原位种植建立胃癌转移模型

完整组织块裸鼠胃壁原位种植建立胃癌转移模型刘炳亚１陶厚权１王瑞年２尹浩然１林言箴１作者单位：１．上海第二医科大学瑞金医院外科（上海２０００２５）２．上海第二医科大学病理教研室浸润转移是阻碍肿瘤治疗成功的关键因素，是肿瘤病人的主要死亡原因［１］。对肿瘤...