原发性肝癌多药耐药基因的表达及意义

目的 探讨５种多药耐药（ＭＤＲ）基因在肝癌组织中的表达,建立ＭＤＲ的基因诊断标准。方法 用逆转录ＰＣＲ、流式细胞术检测肝癌组织中５种ＭＤＲ基因ｍＲＮＡ和蛋白质的表达,用ＭＴＴ法检测抗癌药物对肝癌原代细胞的ＩＣ５０值。结果 肝癌耐药涉及ｍｄｒ１、ＭＲＰ、ＬＲＰ、ＧＳＴＰ１和ＴｏｐｏⅡα基因。ｍｄｒ１ ｍＲＮＡ≥０．５、ＭＲＰ ｍＲＮＡ≥０．６、ＬＲＰ ｍＲＮＡ≥０．８、ＧＳＴＰ１ ｍＲＮＡ≥０．７Ｔ ＴｏｐｏⅡαｍＲＮＡ≤０．４为耐药联合诊断标准,符合率为９８．００％。结论 多重ＭＤＲ是肝癌耐药的主要形式。用逆转录ＰＣＲ方法联合检测５种ＭＤＲ基因ｍＲＮＡ表达在肝癌化疗敏感性预测中具有必要性和可行性。     

五种多药耐药性基因在正常人体组织的表达

目的：观察五种多药耐药性（MDR）基因在正常人体组织中的表达。方法：采用二重RT-PCR法及免疫组织化学SP法，分别从mRNA和蛋白质表达水平检测（90例，共15种）正常人体组织中5种MDR基因的表达。结果：五种MDR基因在人体不同器官和组织中均有表达。同时表达5种MDR基因的器官和组织有肝脏、肺脏、肾脏、食管、结肠、小肠、胰腺、甲状腺、前列腺及胎盘。皮肤组织中未发现LRP基因表达（0/5）。乳腺和卵巢组织未发现MRP基因表达（0/5）。不同MDR基因在各种组织中的表达存在差别。结论：正常情况下，五种MDR基因的mRNA和蛋白质在人体组织中广泛表达，以在肝脏、肺脏、肾脏、结肠、小肠和胰腺组织中表达较强。     

肝动脉复流时机对大鼠肝内胆管上皮细胞缺血再灌注后超微结构的影响

目的 观察不同肝动脉复流时机对大鼠肝内胆管上皮细胞缺血再灌注损伤后超微结构的影响。方法 建立大鼠原位部分肝脏缺血再灌注损伤模型，54只大鼠随机分为假手术组（SO）、肝动脉先复流组（IAR）和门静脉先复流组（IPR），IAR组、IPR组分别于复流后0．5、2．0、4．0、12．0h时取材，用透射电镜观察肝内胆管上皮细胞的超微结构，通过计算机图像分析系统对线粒体形态计量分析。结果 （1）随着缺血再灌注后时间的延长，IAR组与IPR组肝内胆管上皮细胞损伤均有加重趋势，表现为线粒体肿胀、嵴模糊或消失、微绒毛减少等超微结构改变。（2）IPR 0．5h组、IPR 2h组胆管上皮细胞与IAR组相应时间点比较，超微结构损害无明显加重，线粒体平均面积、平均周径及数密度差异均无统计学意义（P〉0．05）；但IPR 4h组、IPR 12h组与IAR组相应时间点比较，超微结构损害加重，线粒体平均面积增大，差异有统计学意义（P〈0．05），线粒体平均周径增大，差异有统计学意义（P〈0．05），其中IPR 12h组线粒体数密度减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 与门静脉先复流相比较，肝动脉先复流对大鼠肝内胆管上皮细胞缺血再灌注后的超微结构具有保护作用。     

改良背驮式原位肝移植病人围手术期的护理

20 0 2年 1月— 2 0 0 2年 9月 ,我院完成了 7例同种异体改良背驮式原位肝移植手术。我们重点做好围手术期的护理工作 ,取得了良好的效果。现总结如下。1　临床资料　　 7例同种异体改良背驮式原位肝移植手术病人男 4例 ,女 3例 ,年龄 19岁～ 5 8岁 ,平均年龄 3 9.7岁 ;其中肝豆状核变性 2例 ,肝癌 3例 ,肝硬化失代偿期 2例。围手术期死亡率为零 ,肝功能恢复时间 3d～ 14d ,平均住院时间 4周。2　术前护理[1～ 3 ]2 .1　心理支持　移植病人均是身临绝境、不移植他人器官不能存活的病人。对器官移植的基本知识 ,医生的医疗技术及移植后的生命…     

原位肝移植术后的彩色多普勒超声监测

目的:初步探讨彩色多普勒超声在肝移植术后监测中的应用价值.方法:应用彩色多普勒超声观察2例原位肝移植术后患者肝实质、肝内管系的情况,并进行相应的血流参数测量.结果:各项监测指标随着时间的推移而逐步变化,为临床实施治疗方案提供帮助.结论:彩色多普勒超声是肝移植患者术后监测的首选影像学方法.     

原发性肝癌根治性切除术后骨转移的危险因素分析

目的 探讨原发性肝癌根治性切除术后骨转移的危险因素。方法 回顾性分析2005年1月至2012年12月我院349例原发性肝癌行根治性手术治疗患者的临床资料。结果 术后随访期内出现骨转移43例。甲胎蛋白（AFP）〉400mg/mL、肿瘤数目、肿瘤大小、微血管侵犯对于原发性肝癌根治性手术治疗后是否出现骨转移的差异有统计学意义。Logistic回归分析显示,AFP〉400mg/mL、肿瘤数目、微血管侵犯是原发性肝癌根治性切除术后骨转移的独立影响因素。结论 对于术前AFP升高、肿瘤多发以及存在微血管侵犯的患者,术后容易出现骨转移,需密切随访。     

基于肝脏三维图像的肝段自动划分及虚拟解剖性肝切除

目的:利用肝脏三维图像进行肝内血管分析并自动划分肝段及虚拟解剖性肝切除术,以适应虚拟肝脏手术计划的要求.方法 基于患者螺旋CT断层扫描图像,应用自主研发的虚拟肝脏手术规划系统软件Liv1.0,对门静脉分支在段水平上进行标记,自动划分肝段范围并模拟解剖性肝切除术.结果 按照肝段血管的分布,软件自动分割出门静脉每个段分支分布的相应肝段范围,重建出以肝段划分为基础的肝脏三维模型,清楚、准确地显示各肝段分布范围和界限.在此基础上可行肝脏虚拟解剖性切除术及估算切除的肝脏体积.结论 利用软件Liv 1.0可清晰地重建肝脏及其管道系统三维图像,自动划分肝段并进行虚拟解剖性肝脏切除手术及肝脏体积测量.所有操作在个人计算机上完成,便于临床外科医生掌握,从而为虚拟肝脏技术在临床中的应用提供了一个软件平台.     

肝癌切除肝缺血再灌注损伤前后的蛋白质组学变化

背景：肝癌切除肝缺血再灌注损伤可促进微小转移灶的侵袭转移并引起线粒体损伤。目的：比较肝癌切除手术过程中肝正常组织缺血再灌注损伤前后蛋白质表达谱的改变,筛查发生肝缺血再灌注损伤应激的相关蛋白质分子标志物并探讨可能机制。方法：应用双向等电聚焦/聚丙烯酰胺凝胶电泳建立20例肝癌切除患者肝缺血再灌注前与灌注后15min肝正常组织的全细胞蛋白质和线粒体蛋白质表达图谱,并进行差异分析,应用基质辅助激光解吸离子化串联时间质谱对差异蛋白质点进行鉴定,并进行生物信息学分析。结果与结论：相同条件下对各组全细胞和线粒体蛋白样品分别进行3次双向电泳,筛选在3次电泳中均存在的差异点进行分析,在全细胞蛋白质图谱中共鉴定出5个差异蛋白,在线粒体蛋白质图谱中未鉴定出明显的差异蛋白。结果可见肝癌切除手术过程中肝缺血再灌注15min即可使细胞骨架蛋白、热休克蛋白等细胞保护蛋白表达发生改变,同时有促进肿瘤转移的风险,需要采取预防措施降低影响,但线粒体蛋白表达基本未发生改变。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠肝纤维化的作用

目的探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）移植在大鼠肝纤维化形成过程中的作用。方法应用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化雄性SD大鼠MSCs,分别在四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型的第1天、第6周、第8周以5×10^6的剂量经尾静脉注入同种雌性大鼠体内。各组大鼠均在MSCs移植4周后,评价干预组与对照组的生存状态,并用Scheuer炎症活动度评分法和SchmidM纤维化评分法评价肝脏病理情况。结果第1天移植MSCs,干预组12只大鼠中有6只肝脏炎症活动度评分≤1分,对照组11只中仅有1只,两组Scheuer评分均值分别为1．50和2．55（t=2．894,P=0．009）;SchmidM评分均值分别为0．75和0．82（t=0．217,P=0．83）。第6周移植MSCs,干预组和对照组在炎症活动度方面无明显差异,Scheuer评分均值分别为3．58和3．73（P=0．559）;在纤维化方面,干预组12只大鼠中有3只≥6分,对照组11只中则有7只≥6分,SchmidM评分均值分别为4．75和5．54（t=2．424,P=0．024）;干预组与对照组的腹水发生率分别为25％和45．4％（t=2．241,P=0．036）。第8周移植MSCs,干预组与对照组炎症活动、纤维化程度及腹水发生率均无明显差异,Scheuer评分的均值分别为3．64和3．92（P=0．113）;SchmidM评分均值分别为5．27和5．67（t=1．207,P=0．241）;腹水发生率分别为18．2％和25％（t=0．703,P=0．490）。值得注意的是,对照组有5／12出现异形细胞,而干预组未见一例。结论早期移植MSCs可减轻四氧化碳引起的肝脏炎症,改善大鼠的肝纤维化程度,但对肝硬化无作用,MSCs移植可以减少肝硬化大鼠异形细胞发生的现象值得进一步探讨。