高迁移率族蛋白B1对调节性树突状细胞的免疫效应及其作用机制

目的 观察高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)对分泌IL-10树突状细胞(dendritic cell,DC)亚群CD11clowCD45RBhigh DC功能的影响. 方法 采用磁珠分选技术获得Bab/c小鼠脾脏CD11clowCD45RBhighDC和CD4+T淋巴细胞,加不同浓度HMGB1处理(20,100,500 ng/ml,以不加HMGB1的细胞作为对照)CD11clowCD45RBhighDC细胞;流式细胞术检测CD11clow CD45RBhigh DC表面分子CD40、CD80、CD86、Ⅰ-a/e及Toll样受体(TLR)4的表达强度;应用ELISA检测CD11clowCD45RBhighDC培养液中IL-10的含量.将CD4+T淋巴细胞分为正常对照组(未作任何处理)、未刺激组(加入未经HMGB1处理的CD11clowCD45RBhighDC与CD4+T淋巴细胞混合培养)、高浓度HMGB1刺激组(加入经500 ng/ml HMGB1处理后的CD11clowCD45RBhighDC与CD4+T淋巴细胞混合培养)、高浓度HMGB1刺激+抗体1组(加入经500 ng/mlHMGB1处理后的CD11clowCD45RBhighDC、抗IL-10抗体与CD4+T淋巴细胞混合培养)和高浓度HMGB1刺激+抗体2组(加入经500 ng/ml HMGB1处理后的CD11clowCD45RBhighDC、IL-10的同型对照抗体与CD4+T淋巴细胞混合培养).流式细胞术检测CD4+T淋巴细胞培养液中IL-4和干扰素-γ(IFN-γ)的含量. 结果 与未加HMGB1刺激相比,HMGB1能显著增强CD11clowCD45RBhighDC表面分子CD86、TLR4的表达及IL-10的分泌,其中IL-10分泌呈HMGB1浓度依赖性.高浓度HMGB1刺激组IFN-γ水平为(279±17) pg/ml,显著低于未刺激组(963±11)pg/ml(P＜0.05);高浓度HMGB1刺激组IL-4水平为(372±14) pg/ml,明显高于未刺激组(213±10) pg/ml(P ＜0.05). 结论 HMGB1可促进CD11clowCD45RBhighDC IL-10的分泌,诱导CD4+T淋巴细胞向Th2型反应分化,通过激活CD11clowCD45RBhighDC介导机体免疫抑制活性.     

血管组织工程的进展

血管病变尤其是冠状动脉的闭塞性病变为人类的主要病死原因之一。其主要的治疗方法是血管搭桥手术,需要各种直径的血管移植物作为修补材料。临床已经应用的血管移植物包括自体血管、异体血管和合成材料管道。然而目前无论那种血管移植物都无法满足临床需要,临床需要一种新的血管替代物,这种管道应具有高度的组织相容性、可生     

中医防治桥本甲状腺炎的临床研究进展

近年来桥本甲状腺炎在我国的发病率逐年递增,中医治疗桥本甲状腺炎取得良好效果。通过分析近10年中医治疗桥本甲状腺炎的相关文献资料,从中医病名、病因病机、分期论治、辨证论治、自拟方治疗、单味药治疗、针灸治疗及预防调护等不同方面对桥本甲状腺炎的中医研究进展进行综述。桥本甲状腺炎归属于中医学的“瘿病”“虚劳”范畴,治疗上初期采用疏肝理气、清泻肝火之法,中期采用疏肝健脾、化痰散结之法,后期采用温补脾肾、化痰祛瘀之法。除常用方外,自拟方治疗桥本甲状腺炎也在改善患者症状和体征、调节甲状腺功能、降低甲状腺自身抗体滴度水平方面有显著优势。中药选择方面现代医家主张禁用含碘中药,常用中药包括夏枯草、黄芪、穿山龙等。针灸、隔药饼灸治疗可改善患者的自身免疫性异常。预防方面饮食应限制碘的摄入量,避免情志不顺而引起的肝气郁结。     

脾脏调节性树突细胞对烫伤小鼠炎症反应及预后的影响

Objective To observe the effect of regulatory dendritic cells (DCregs) on burn injury induced proinflammatory cytokine production and mortality rate after a single intraperitoneal injection of CD11clowCD45RBhigh DCs to injured mice. Methods DCregs were isolated and purified from spleen of 100 normal BALB/c mice to procure CD11clowCD45RBhigh DCs by MiniMACS. Mice were subjected to a 15% total body surface area (TBSA) burn injury on the back. Twenty mice were used, and splenic DCregs (1×105/ml, 5×105/ml, 10×105/ml) were given to them to investigate the protective effect of DCregs against lethality at postburn hours (PBH) 48, and to decide the optimal dosage of intervention. Another group of 70 mice were used, and they were divided into normal control group (n=7), sham burn injury group (n= 21), burn injury group (n = 21), and DCregs treatment group (n = 21). The mice in burn injury group received intraperitoncally 1 ml of Ringer solution for resuscitation. 10×105/ml of CD11clowCD45RBhigh DCs were added to lactated Ringer solution for intraperitoneal injection in DCregs treatment group. Seven animals of each group were sacrificed at PBH 12, 24 and 48, respectively, and blood samples were collected aseptically for measurement of cytokine levels in plasma and phenotype expressions on DCs by flow cytometry. Results Treatment with 10×105/ml DCregs showed a significant decrease in mortality rate compared with burn injured mice and burn injured mice given lower doses of DCregs (1×105/ml, 5×105/ml DCregs, 0% vs. 80%, 80% and 60%, all P＜0. 01). A single intraperitoneal injection of 10×105/ml DCregs to burn injury mice showed a significant decrease in plasma interleukin-6 (IL-6, ng/L: 98. 76 ±10.02, 57. 83 ±6. 83, 13.29 ±1.07) compared with burn injury mice (156.32 ± 12. 85, 84. 50 ±9. 29,23.04±2. 53) at PBH 12, 24 and 48 (all P＜0. 01). Similarly, in 10×105/ml DCregs treatment group,plasma macrophage chemoattractant protein-1 (MCP-1) levels (ng/L: 102.79 ±9. 88, 42. 56 ±5. 90,12. 96±1. 34) were markedly lower than those in burn injury group (168. 23±23. 85, 83. 39±8. 41, 42. 92±4. 96) at PBH 12, 24 and 48 (all P＜0. 01). A single intraperitoneal injection of 10×105/ml DCregs to burn injury mice showed significant reduction in plasma tumor necrosis factor-α (TNF-α) levels (ng/L: 16. 84±1.92, 16. 62±1.28, 10. 26±1. 10) compared with burn injury mice (24. 16±4. 93, 24.25±4. 01, 17. 91±1.82) at PBH 12, 24 and 48 (all P＜0. 01). Conclusion DCregs may effectively improve the outcome of mice with severe burn injury through a single intraperitoneal injection of DCregs accompanied by lowering excessive inflammatory reaction.     

沈阳地区2型糖尿病患者数字化舌诊信息与饮食习惯的相关性研究

目的 了解沈阳地区2型糖尿病患者饮食习惯现状,并探讨患者数字化舌诊舌象信息与其饮食习惯的相关性,为后续制定相应的诊疗方案提供理论依据。方法 采用横断面调查方法对2022年10月—2022年11月在辽宁中医药大学附属医院住院的92例2型糖尿病患者,采用慧医谷中医望诊信息采集管理系统采集舌象,同时采用行MMC系统进行饮食问卷调查。结果 喜荤食组的腻苔频率高于饮食正常组频率(P<0.05),喜荤食组齿痕舌频率高于饮食正常组频率(P<0.05)。喜荤食组薄苔频率小于饮食正常组频率(P<0.05)。结论 沈阳地区2型糖尿病患者的舌象与其饮食习惯有着很大的关联,根据其舌象调整其饮食结构,可辅助其后续血糖控制和治疗情况。     

兔骨髓间充质干细胞的分离、培养与鉴定

背景：目前对骨髓间充质干细胞常用的分离方法有密度梯度离心法、贴壁筛选分离法。目的：联合应用密度梯度离心法和贴壁筛选分离法体外分离培养、扩增兔骨髓间充质干细胞，并对其进行鉴定。设计、时间及地点：对比观察的细胞学实验，于2007-10／2008-03在上海市第六人民医院中心实验室完成。材料：2月龄新西兰纯种大耳白兔6只用于骨髓间充质干细胞取材与原代培养，1．073kg／L的Percoll分离液。方法：实验采用Percol分离液利用密度梯度离心法及结合贴壁分离筛选法来分离、纯化骨髓间充质干细胞，在采用密度梯度离心法得到骨髓间充质干细胞后，经贴壁培养及反复换液纯化骨髓间充质干细胞。分别取第3，5，7，9代骨髓间充质干细胞，行细胞计数，绘制细胞生长曲线。主要观察指标：倒置显微镜下观察原代及传代细胞的形态、生长情况。采用CD44及CD34抗体进行间接免疫荧光标记鉴定培养的干细胞。CD44染色呈阳性，CD34染色呈阴性，说明所提取、纯化的细胞是骨髓间充质干细胞。结果：增殖传代的骨髓间充质干细胞呈长梭形均匀分布生长，形态比原代培养的细胞更均匀，细胞生长旺盛、增殖迅速，胞核明显，核仁清晰，核浆比例大，细胞形态均匀，平行排列呈螺旋状或漩涡状，传代至第5代时无明显变化。随传代次数的增加，细胞增殖能力逐渐下降，第3～5代细胞增殖能力强。所分离培养的细胞均表达CD44，不表达CD34。结论：在体外采用密度梯度离心及贴壁培养法可获得高纯度的兔骨髓间充质干细胞。     

湿热困脾论治肥胖型2型糖尿病及治疗研究进展

糖尿病隶属于中医古籍中讲到的消渴病,正是《素问》饮一溲一之疾,本虚标实是其本质特点,分为脾瘅(肥胖型)和消瘅(消瘦型)两大类型。肥胖与2型糖尿病独立又相关,尤其是腹型肥胖,会导致机体胰岛素抵抗,所以肥胖程度越严重,引起糖尿病的发生的危险性更高。     

兔骨髓间充质干细胞的分离、培养与鉴定

背景：目前对骨髓间充质干细胞常用的分离方法有密度梯度离心法、贴壁筛选分离法。 目的：联合应用密度梯度离心法和贴壁筛选分离法体外分离培养、扩增兔骨髓间充质干细胞，并对其进行鉴定。 设计、时间及地点：对比观察的细胞学实验，于2007-10/2008-03在上海市第六人民医院中心实验室完成。 材料：2月龄新西兰纯种大耳白兔6只用于骨髓间充质干细胞取材与原代培养，1.073 kg/L的Percoll分离液。 方法：实验采用Percol分离液利用密度梯度离心法及结合贴壁分离筛选法来分离、纯化骨髓间充质干细胞, 在采用密度梯度离心法得到骨髓间充质干细胞后，经贴壁培养及反复换液纯化骨髓间充质干细胞。分别取第3，5，7，9代骨髓间充质干细胞，行细胞计数，绘制细胞生长曲线。 主要观察指标：倒置显微镜下观察原代及传代细胞的形态、生长情况。采用CD44及CD34抗体进行间接免疫荧光标记鉴定培养的干细胞。CD44染色呈阳性，CD34染色呈阴性，说明所提取、纯化的细胞是骨髓间充质干细胞。 结果：增殖传代的骨髓间充质干细胞呈长梭形均匀分布生长，形态比原代培养的细胞更均匀，细胞生长旺盛、增殖迅速，胞核明显，核仁清晰，核浆比例大，细胞形态均匀，平行排列呈螺旋状或漩涡状，传代至第5代时无明显变化。随传代次数的增加，细胞增殖能力逐渐下降，第3~5代细胞增殖能力强。所分离培养的细胞均表达CD44,不表达CD34。 结论：在体外采用密度梯度离心及贴壁培养法可获得高纯度的兔骨髓间充质干细胞。     

不同甲状腺功能状态对非高密度脂蛋白胆固醇及脂蛋白(a)的影响

目的研究不同甲状腺功能状态对人体非传统致动脉硬化因子——血清非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)及脂蛋白(a)[lp(a)]的影响。方法选取甲状腺功能亢进症患者50例,甲状腺功能减退症患者50例和健康对照40名,抽取静脉血测甲状腺功能水平及血脂水平,包括lp(a)及non-HDL-C。结果甲状腺功能减退症组患者血清non-HDL-C,胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)明显高于健康对照组(P<0.01);甲状腺功能亢进症组患者血清non-HDL-C,TC和LDL-C明显低于健康对照组(P<0.01);甲状腺功能减退组血清TG水平明显高于临床甲状腺功能亢进组及健康对照组(P<0.05);血清lp(a)、HDL-C在不同的甲状腺功能状态组差异无统计学意义(P>0.05)。经体质量指数(BMI)及年龄校正后结果一致。相关性分析,non-HDL-C与LDL-C呈正相关(r=0.914),与TSH呈正相关(r=0.330),与游离甲状腺素(FT4)呈负相关(r=-0.273)。Lp(a)与上述指标无明显的相关性。结论作为非传统的心血管危险因子non-HDL-C,与甲状腺功能状态明显相关。甲状腺功能减退患者升高的心血管病风险与升高的non-HDL-C密切相关。Lp(a)作为新发现的致动脉硬化风险因子,不同甲状腺功能状态对其未见明显影响。     

腹部手术后并发肠梗阻危险因素分析及诊治对策

目的:分析患者腹部手术后并发肠梗阻(POI)的相关危险因素,并结合临床实际病例探讨其预防、诊断与治疗对策.方法:选取2010年1月至2013年12月期间378例行腹部手术患者作为观察对象,其中57例发生POI的患者作为POI组,其他患者作为对照组,分析相关因素与POI的发生关系并观察患者的治疗情况.结果:(1)POI的发生与患者的年龄、手术方式、腹部手术史、手术时间、肠道准备情况、麻醉方式有关,其中开腹手术、有腹部手术史、全身麻醉及未行肠道准备是POI发生的独立危险因素.(2)本组共57例患者出现POI(15.08％),经胃肠外营养、抗感染及胃肠减压等治疗后,54例痊愈出院,其余3例经手术治疗2周后均痊愈出院.结论:开腹手术、有腹部手术史、全身麻醉及未行肠道准备是POI发生的独立危险因素,及早发现POI的早期症状,给予积极治疗,可以明显提高临床治愈率.