Ⅳ型胶原黏附法分选表皮干细胞

目的:评估Ⅳ型胶原黏附法分选表皮干细胞的分选效果及对细胞生物学特性的影响。方法:实验于2004-11/2005-05在中山大学附属第一医院外科实验室完成。选取中山大学附属第一医院外科门诊包皮环切手术患者的皮肤标本5份(患者知情同意),进行表皮细胞的分离培养。取培养的二三代表皮细胞,消化后加入铺有100mg/LⅣ型胶原的培养瓶中分选。取分选细胞悬液于培养箱中过夜培养,第2天取出爬片,磷酸缓冲液冲洗3min×2次,去除残留培养液,4%多聚甲醛室温下固定10min,磷酸缓冲液冲洗3min×2次,以含0.1%Triton-100的3%山羊血清封闭、透膜20min,滴加稀释好的角蛋白K19/β1整合素抗体进行双标,4℃过夜孵育,磷酸缓冲液冲洗3min×2次,加入配置好的双标用二抗,37℃下孵育20min,磷酸缓冲液冲洗3min×2次,加入5mg/L的Hochest33258,标记细胞核,37℃下孵育5min,磷酸缓冲液冲洗3min×2次,滴加含40%甘油的碳酸氢钠缓冲液,盖玻片封片,以上步骤均在暗室中操作,同时以磷酸缓冲液代替一抗作为阴性对照。激光共聚焦显微镜下观察,拍照。同时表达角蛋白K19、β1整合素认为是表皮干细胞。分别取分选前及筛选后细胞各4×106个,检测表皮干细胞(α6briCD71dim细胞)、短暂扩增细胞(α6briCD71bri细胞)及终末分化细胞(α6dim细胞)的百分率及分选前后的细胞周期。结果:①分选后细胞体积小,均匀一致,核浆比例大,免疫荧光检测同时表达K19、β1整合素。②与分选前细胞比较,分选后细胞中表皮干细胞α6briCD71dim细胞、短暂扩增细胞α6briCD71bri细胞的百分率明显增高,差异显著[(9.41±0.31)%,(38.74±1.09)%;(43.66±1.12)%,(48.92±2.49)%,P<0.01]。③与分选前细胞比较,分选后细胞G0/G1期所占比例明显增高,差异显著[(80.80±1.69)%,(94.37±1.32)%,P<0.01]。提示分选后细胞处于相对静止状态的表皮干细胞所占比例高。结论:Ⅳ型胶原黏附分选出的细胞含有高纯度的表皮干细胞,此分选方法对细胞活力无明显影响。能够为组织工程皮肤构建提供理想的种子细胞。     

鞘内注射布比卡因复合小剂量舒芬太尼用于剖腹产麻醉的效果

目的探讨布比卡因复合小剂量舒芬太尼对剖宫产术患者腰麻效果的影响及镇痛情况。方法将60例行剖宫产术的初产妇随机分为对照组(C组)和蛛网膜下腔注射舒芬太尼5μg组(S组),各30例。观察注药前即刻(T0)、注药后3 min(T1)、5 min(T2)、15 min(T3)、30 min(T4)时平均动脉压、心率、脉搏血氧饱和度。观察感觉平面固定后测双下肢阻滞情况和运动神经阻滞完全恢复时间、镇痛时间。感觉阻滞及运动神经阻滞情况。注药后48 h内寒战、恶心呕吐和瘙痒情况。结果 2组患者年龄、身高、体质量和手术时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。与T0比较,C组与S组MBP在T1,T2均降低(P<0.05)。2组均无呼吸抑制出现,与C组比较,S组运动神经阻滞不全发生率降低,但瘙痒及术后恶心呕吐的发生率升高,感觉阻滞平面消退时间及运动神经阻滞完全恢复时间缩短(P<0.05)。结论剖宫产术患者蛛网膜下腔注射舒芬太尼5μg,可明显增强布比卡因腰麻的效果,血流动力学平稳,不良反应少,并可以起到一定的术后镇痛作用,值得临床推广。     

不同年龄人真皮多能干细胞的分离及体外分化特点

目的研究不同年龄人真皮多能干细胞的分离、鉴定及体外分化特点。方法切取胎儿、患儿、中青年患者、老年患者正常皮肤标本（1cm×1cm），采用干细胞培养基筛选原代细胞克隆并记录其数量和直径；检测各种标本来源细胞克隆的体外分化情况；行单个细胞克隆分化分析，并检测其相关蛋白的表达。结果胎儿、患儿、中青年患者、老年患者正常皮肤原代培养获得的细胞克隆数分别为（20．1±2．5）×10^2、（15．8±5．7）×10^2、（10．8±1．3）×10^2、（6．2±1．4）×10^2个，两两比较，差异有统计学意义（P＜0．01）；克隆直径分别为（83±12）、（55±10）、（46±12）、（42±8）μm，胎儿＞患儿＞中青年及老年患者（P＜0．05）。各种细胞克隆均能向神经元细胞、神经胶质细胞、平滑肌细胞和脂肪细胞分化，其中胎儿来源的细胞克隆有向神经元细胞分化的优势。培养1个月，胎儿、患儿、中青年患者、老年患者单个细胞克隆形成率依次为41．1％、25．5％、17．7％、15．2％；单个细胞克隆亦能同上多向分化，同时表达巢蛋白、纤维连接蛋白、原癌基因c-mye、信号转导和转录激活因子3、端粒体逆转录酶。结论采用干细胞培养基能够有效分离不同年龄人真皮中具有克隆增殖和多向分化潜能的干细胞，年龄对其的数量、增殖和分化有明显影响。     

舒芬太尼在剖宫产术麻醉中的应用效果观察

目的分析舒芬太尼在剖宫产术麻醉中的应用效果。方法将本院收治的62例患者随机分为对照组和研究组，对照组手术中主要采用布比卡因麻醉，研究组患者在对照组患者麻醉的基础上行舒芬太尼麻醉，并观察两组麻醉效果。结果两组产妇血流动力学、运动阻滞Bromage评分、新生儿分娩后1、5minApgar评分等各方面比较差异无统计学意义（P〉0．05），但研究组产妇牵拉痛VAS评分明显优于对照组，麻醉后寒战发生率显著低于对照（P〈0．05）。结论舒芬太尼用于剖宫产术麻醉中麻醉的效果好，安全性高，值得临床推广使用。     

浓缩生长因子作为生物敷料在稳定期节段型白癜风自体表皮移植术中的应用

 目的 观察浓缩生长因子在稳定期节段型白癜风自体表皮移植中应用的有效性及安全性。方法 纳入65例面部稳定期节段型白癜风患者,随机分为治疗组33例和对照组32例。所有患者均行自体表皮移植,治疗组移植区覆盖自体表皮后,加盖自体浓缩生长因子凝胶膜,然后凡士林纱布覆盖,无菌纱布加压包扎。对照组仅覆盖凡士林纱布。术后两周后,两组患者均行308 nm准分子光照射及外用0.1%他克莫司乳膏。规律随访至术后6个月。 结果 治疗后6个月,治疗组、对照组有效率分别为93.94%和75.00%,差异有统计学意义（X²=12.44,P=0.040) ;色素沉着发生率分别为9.09%和31.25%,差异有统计学意义 （X²=4.99,P=0.026);光晕现象发生率分别为15.15%和37.50%,差异有统计学意义（X²=4.20,P=0.040)。治疗组感染发生率为3.03%,对照组感染发生率为6.06%,差异无统计学意义 （X²<0.01,P=0.978) 。结论 浓缩生长因子作为生物敷料在节段型白癜风自体表皮移植中应用安全有效,值得临床推广。     

19例腹膜后阑尾炎病人临床分析

目的：通过对19例病人临床资料分析，进一步明确腹膜后阑尾炎病人的诊断及治疗方法。方法：对19例腹膜后阑尾炎病人临床表现、实验室检查、手术方式回顾性分析，明确其临床及治疗方式特点。结果：腹膜后阑尾炎由于阑尾的位置较深症状多不典型，诊断困难，确诊后应尽早手术。结论：腹膜后阑尾炎在临床上较为少见，术前诊断困难，确诊后应尽早手术。     

异体脱细胞真皮基质作为组织工程皮肤真皮支架的可行性*

背景：组织工程皮肤是目前研究皮肤损伤修复重建的重要手段之一,异体脱细胞真皮基质不存在免疫原性,在异体移植时不会发生排斥反应,是比较理想的真皮替代物。 目的：观察异体脱细胞真皮基质的组织相容性。 方法：以正常人体真皮组织作为对照,通过体外、体内细胞毒性实验检测异体脱细胞真皮基质的组织相容性,以膨胀度、饱和含水量及生物力学分析检测异体脱细胞真皮基质的亲水性及机械性能。 结果与结论：真皮基质中未见任何细胞成分,其网孔直径介于100~180 μm 之间。脱细胞真皮基质组饱和含水量为(69.6±3.97)%,膨胀度2.30±0.42,最大断裂力为(3.082±0.046) N,与对照组相比,差异无显著性意义(P > 0.05)。体内外细胞毒性检测,未见明显细胞生长抑制及免疫排斥反应。提示异体脱细胞真皮基质机械性能接近正常皮肤,组织相容性好,免疫排斥反应小,是构建组织工程皮肤理想的真皮材料。     

脱细胞同种异体真皮与自体刃厚皮复合移植烧伤功能部位修复创面

背景：临床修复烧伤功能部位创面的主要方法为自体大张刃厚皮片移植,虽能取得一定的治疗效果,但存在移植后质地薄、僵硬、韧差等缺陷,且移植部位瘢痕增生较重,容易引起挛缩畸形,功能恢复比较差。 目的：分析复合皮移植烧伤功能部位修复创面的临床效果。 方法：将60例(84处)功能部位烧伤创面患者随机均分为2组,观察组给予脱细胞同种异体真皮与自体刃厚皮复合移植修复治疗,对照组给予自体大张刃厚皮片移植修复治疗,比较两组皮片成活率及二次手术率;治疗后1个月,采用温哥华瘢痕评分量表评估皮肤色泽、厚度、血管分布及柔软度,同时判定瘢痕程度。 结果与结论：观察组皮片成活率显著高于对照组(93%,70%,P < 0.05),二次手术率显著低于对照组(0,13%,P < 0.05)。治疗后1个月,观察组皮肤色泽、厚度、血管分布、柔软度各项评分均显著低于对照组(P < 0.05),轻度瘢痕增生率显著高于对照组(52%,29%,P < 0.05)。说明采用脱细胞同种异体真皮与自体刃厚皮复合移植烧伤功能部位修复创面,能有效提高皮片成活率,降低二次手术率,有利于促进创面愈合,还能有效减轻瘢痕增生程度。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

腰丛-坐骨神经阻滞复合七氟醚喉罩吸入对老年股骨颈骨折手术患者的麻醉效果及对脑氧代谢和术后认知功能的影响

目的观察腰丛-坐骨神经阻滞(LP-SNB)复合七氟醚喉罩吸入对老年股骨颈骨折手术患者的麻醉效果及对脑氧代谢和术后认知功能的影响。方法抽取2020年6月至2022年5月于郑州市骨科医院行人工股骨头置换术的老年股骨颈骨折患者98例, 根据麻醉方案分为观察组(51例, 采用LP-SNB复合七氟醚喉罩吸入麻醉)和对照组(47例, 采用七氟醚喉罩吸入全身麻醉)。观察两组患者麻醉不同时刻心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉血压(MAP)的变化情况。记录两组患者麻醉阻滞起效时间、手术时间、术中出血量、苏醒时间及苏醒质量;观察两组麻醉诱导前后, 手术开始时, 术后15、30、60 min及手术结束后脑氧饱和度变化情况;记录术后认知功能障碍(POCD)发生率;记录两组患者不良事件发生情况。结果观察组麻醉阻滞起效时间和术后苏醒时间均短于对照组(P均<0.05)。观察组气管插管前即刻(T1)、插管后即刻(T2)时SBP高于对照组, T1时DBP、MAP、HR高于对照组(F组间=15.13, 6.40, 21.76, 11.08, P均<0.05)。观察组手术开始时, 术后1...     

硬膜外麻醉复合气管插管全麻对老年直肠癌患者术后拔管血压及心率变化的影响

目的探究硬膜外麻醉复合气管插管全身麻醉对老年直肠癌患者术后拔管血压及心率变化的影响。方法选取2017年3月至2019年5月舞钢公司总医院收治的老年直肠癌手术患者94例,根据治疗方案分为对照组和观察组,各47例。给予对照组气管插管全身麻醉,给予观察组硬膜外麻醉复合气管插管全身麻醉。对比两组患者苏醒时间、拔管时间、拔管血压与心率(HR)变化及麻醉前、气腹后30 min、拔管前5 min、拔管即刻HR、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)变化。结果气腹后30 min、拔管前5 min、拔管即刻观察组患者HR、SBP、DBP均低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.01);观察组患者ΔHR、ΔSBP、ΔDBP均低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.01);观察组患者苏醒时间、拔管时间均短于对照组,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论硬膜外麻醉复合气管插管全身麻醉用于老年直肠癌手术患者可维持血流动力学稳定,降低拔管血压及心率变化,提高苏醒质量。