苦碟子注射液用于肝纤维化大鼠疗效观察及其作用机制探讨

对10只肝纤维化大鼠模型(苦蝶子组),采用苦碟子注射液腹腔注射(0.4 mL/100 g,1次/d),连用2周后检测大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(AJb)含量,肝组织丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,并观察其肝脏内α-平滑肌蛋白(α-sMA)表达.结果与模型组比较,观察组显著降低肝血清ALT、AsT含量及肝组织中MDA水平明显降低,使血清Alb含量及肝组织中SOD活性显著升高(P＜0.01);肝脏内α-SMA阳性细胞数明显减少(P＜0.01),认为苦碟子注射液具有抗肝纤维化的作用,其机制可能为抗脂质过氧化及降低HSC活化.     

护肾Ⅰ号对顺铂致贵州小型猪肾损伤的预防作用及机制探讨

将12只贵州小型猪随机分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组,各4只.3组均行膀胱造瘘后,Ⅲ组给予护肾Ⅰ号灌服5d,其余两组给予等量生理盐水.然后Ⅱ和Ⅲ组给以4 mg/kg顺铂一次性腹腔注射建立贵州小型猪肾损伤模型,Ⅰ组注射等量生理盐水.测定注射顺铂前1 h,注射后24、48、96 h时三组血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及尿β2-微球蛋白(β2-MG).结果 :与Ⅰ组比较,Ⅱ组血清BUN、Cr、MDA含量明显升高,血清SOD活力降低,尿β2-MG浓度升高(P均＜0.05).Ⅲ组的各项指标较Ⅱ组明显改善.认为护肾Ⅰ号可预防顺铂所致的肾损伤,其机制可能与抑制顺铂致血液脂质过氧化反应增强有关.     

环氧合酶2基因沉默诱导人肝癌细胞凋亡的作用观察

目的 观察作用于环氧合酶2(COX-2)mRNA的发卡状COX-2(COX-2 shRNA)真核表达质粒对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响.方法 设计靶向COX-2基因的RNA干扰序列,构建COX-2 shRNA表达载体,用阳离子脂质体Lipofectamine 2000转染体外培养的HepG2细胞.半定量RT-PCR检测COX-2 mRNA表达水平的变化,筛选有效抑制COX-2基因表达的序列.采用CCK-8细胞计数法检测COX-2 shRNA对细胞增殖的影响,流式细胞仪测定细胞凋亡率和细胞周期,Western blotting检测细胞内COX-2和Bcl-2蛋白表达水平.结果 测序结果显示成功构建了2个表达COX-2shRNA的质粒载体,转染HepG2细胞后COX-2 mRNA表达下降至阴性对照组的41.66％和77.79％.选择沉默效率较佳者转染细胞并经G418筛选,获得稳定表达COX-2 shRNA的细胞,胞内COX-2 mRNA表达水平下降了75.30％,细胞增殖活性下降了 29.33％.在稳定表达COX-2 shRNA、错义序列以及未转染的细胞中,细胞凋亡率分别为17.83％、4.63％和4.47％,G0/G1期细胞比例分别为73.93％、61.2％和57.630％,而S期细胞比例分别为13.43％、26.03％和26.90％.Westernblotting检测显示,表达COX-2 shRNA的HepG2细胞内COX-2蛋白水平下降至表达错义序列组的31.25％(P＜0.01),Bcl-2蛋白水平下降至表达错义序列组的54.93％(P＜0.01),而转染错义质粒组与未转染组之间比较差异无统计学意义.结论 构建的真核表达载体pSilencer 2.1-U6-COX-2 shRNA能有效沉默人肝癌HepG2细胞内COX-2基因的表达,并具有抑制细胞增殖、促进细胞凋亡和细胞周期阻滞、降低胞内抗凋亡蛋白(H)Bcl-2水平的作用.     

SARS冠状病毒S蛋白S1区多肽与SARS病人血清的免疫反应

目的 测定根据计算机预测的SARS冠状病毒S蛋白S1区的抗原表位多肽与SARS病人血清的免疫反应,以寻找和确定SARS相关冠状病毒的中和抗原表位。方法 采用多肽合成仪合成SARS冠状病毒S蛋白S1区的多肽,并用ELISA方法检测合成的多肽与SARS病人血清的免疫反应。结果 合成的8个多肽与SARS病人血清免疫反应的光密度值是其与正常人血清免疫反应的光密度值的1.5～2.6倍。结论 合成的多肽与SARS病人血清的免疫反应较低,提示这些多肽是否为SARS冠状病毒的抗原表位还要进一步研究。     

PSB0739抑制精液来源的淀粉样纤维形成

目的探究PSB0739对精液来源的淀粉样纤维形成的抑制作用。方法440 μmol/L的PAP248-286多肽分别与不同浓度的 化合物孵育,在不同时间点分别取样,用刚果红染色法、透射电子显微镜法检测药物对淀粉样纤维形成的影响;通过病毒感染实 验分析在PSB0739作用下,精液淀粉样纤维促进病毒感染的能力;利用Zeta电势仪检测PSB0739对成熟的精液来源性淀粉样 纤维表面电荷的影响;MTT法检测PSB0739对Hela细胞的毒性作用,以评价磺酸类化合物PSB073的体外安全性;体外细胞病 毒感染实验检测PSB0739抗HIV-1的活性。结果PSB0739在体外能有效抑制精液淀粉样纤维的形成,在48 h内,220 μmol/L 的PSB0739能抑制440 μmol/L的PAP248-286形成淀粉样纤维SEVI;透射电子显微镜可以直接观察到220 μmol/L的PSB0739 就能有效抑制PAP248-286形成的淀粉样纤维;PSB0739能拮抗SEVI介导的增强病毒感染的作用;体外220 μmol/L的PSB0739 能逆转SEVI携带的正电荷,差异均有统计学意义（P<0.05）。浓度低于62.5 μmol/L时PSB0739对宫颈癌Hela细胞无明显毒性 作用,细胞存活率无统计学意义（P>0.05）;PSB0739能直接抑制HIV的能力与浓度正相关,PSB0739具有抗HIV作用,其IC50为 21.77±5.15 μmol/L。结论PSB0739能抑制精液来源的淀粉样纤维的形成。     

基于双重差分法评价按病种分值付费(DIP)实施效果

[目的]分析按病种分值付费对脑血管疾病住院患者住院费用及天数的影响。[方法]选择广州市某大型三甲医院2017年7月15日-2019年3月31日脑血管疾病(ICD编码为：I60-I69)住院患者的病案首页费用信息。采用双重差分法对患者的住院总费用、住院天数、药品费用、西药费用、中药费用进行净效应评估，并基于疾病诊断相关分组权重、DRGs分组的治疗方式对患者进行分组，分析不同组别的住院费用情况，评价DIP的实施效果。[结果]DIP实施后患者的住院总费用较实施前下降1657.87元。疑难病例组的住院总费用下降5946.90元，药品费用下降596.45元，西药费用下降521.18元；手术组的药品费用下降1555.22元、西药费用下降1683.14元；非手术室操作组的住院总费用下降8594.75元，住院天数下降6.74天，以上差异均有统计学意义。[结论]按病种分值付费改革有利于减轻患者的直接经济负担、提高医疗机构的运营效率，强化医疗机构的自主管理。在医保政策的制定过程中，应保证门诊等支付方式改革的协同性，警惕住院费用转移；在医疗机构的精细化管理过程中，应特别重视病案首页质量。